Утверждены
Минздравом СССР
5 июня 1978 г. N 1872-78
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
НА МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТРИХОТЕЦИНА В ВОЗДУХЕ
Краткая
характеристика препарата. Трихотецин -
антибиотик
фунгицидного
действия, продуцируемый
грибом Trichotecium roseum.
Применяется для
защиты огурца от
поражения мучнистой росой.
Представляет собой изокротиловый эфир кетоспирта трихотеколона.
Брутто-формула C
H O . Молекулярная масса 333,5.
Т. пл. 118 °C.
19 24 5
В воде
практически нерастворим, хорошо
растворяется в спирте,
ацетоне, диметилформамиде,
хлороформе. Выпускается
микробиологической
промышленностью в форме 1-процентного
дуста и
10-процентного смачивающегося порошка
с наполнителем каолином.
ОБУВ трихотецина в воздухе рабочей зоны 0,2 мг/куб. м.
Принцип метода. Метод основан на
хроматографии трихотецина в тонком слое силикагеля.
Подвижный растворитель - смесь дихлорэтана и ацетона в соотношении 9:1. Зона
локализации антибиотика обнаруживается с помощью ультрахемископа.
Метрологическая характеристика метода.
Нижний предел обнаружения 0,5 мкг в анализируемом объеме. Погрешность
определения +/- 15%. Диапазон измеряемых концентраций 0,1 - 4,0 мг/куб. м.
Определению мешают вещества, поглощающие УФ-свет при
длине волны 254 нм.
Реактивы
и материалы, приборы
и посуда. Этиловый
спирт.
Ацетон.
Дихлорэтан х.ч. Стандартный раствор
трихотецина
1 мг/10
мл, приготовленный на
хлороформе. Хлороформ х.ч. Весы
аналитические.
Воронки делительные. Испаритель
ротационный. Колбы
грушевидные на
25 мл. Камера
для хроматографирования.
Микропипетки.
Пластинки "Силуфол" УФ .
Палочки стеклянные.
254
Ультрахемископ
типа "Хроматоскоп" либо
другой аналогичный.
Цилиндры мерные.
Отбор проб воздуха. Пробу воздуха
отбирают на фильтры АФА-ХП-18 с помощью электроаспиратора
со скоростью 10 л/мин. в течение 30 мин.
Ход анализа. Фильтры с отобранной пробой
помещают в делительную воронку на 25 мл, заливают 5 - 10 мл этилового спирта и
экстрагируют, встряхивая 1 мин. Экстракт сливают в грушевидную колбу на 25 мл
для отгонки и проводят повторную экстракцию. Спиртовые экстракты объединяют и
упаривают на ротационном испарителе при слабом разрежении досуха. Сухой остаток
растворяют в 0,5 - 1,0 мл хлороформа (в зависимости от предполагаемого
количества трихотецина) и проводят хроматографическое определение антибиотика.
На предварительно промытую
ацетоном и высушенную на
воздухе
пластинку "Силуфол" УФ
размером 70 x 50 мм на расстоянии 1,5 см
254
от нижнего
края пластинки и 1,0 см от вертикального края при
помощи микропипетки наносят
3 пробы стандартных
растворов
одинакового объема.
В промежутках между
пятнами стандартных
растворов наносят
такой же объем исследуемой пробы. Размер пятна
на линии старта
(диаметр) 2 - 4 мм.
Пластинку помещают под углом в хроматографическую камеру с подвижной системой, состоящей
из дихлорэтана с ацетоном в соотношении 9:1. Камеру предварительно выдерживают
в течение 15 - 20 мин. в закрытом состоянии для насыщения парами растворителей.
После
развития хроматограммы
пластинку вынимают из камеры,
высушивают на
воздухе и просматривают
в УФ-свете с
помощью
ультрахемископа. Трихотецин
обнаруживается на хроматограмме в виде
малинового пятна
(R 0,36 +/- 0,04).
f
Количественное определение проводят путем
сравнения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее
близка по размеру к площади пробы. Площадь пятен измеряют планиметром.
Количество трихотецина
в воздухе (X, мг/куб. м) рассчитывают по формуле:
CS
x
X = ----,
S V
0 o
где:
C - количество трихотецина в стандарте,
мкг;
S -
площадь пятна пробы, кв. мм;
x
S -
площадь пятна стандарта, кв. мм;
0
V
- объем пропущенного
воздуха, приведенный к атмосферному
o
давлению 101,3
Па и температуре 20 °C, куб. м.
Требования безопасности. Соблюдаются меры
безопасности, рекомендуемые для работы с химическими реактивами.