Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6214-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИМЕТОМОРФА В КЛУБНЯХ
КАРТОФЕЛЯ, ОГУРЦАХ И ПОЧВЕ ЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИЕЙ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Диметоморф (акробат) - экспериментальный фунгицид, предназначенный для борьбы с
фитофторой.
CH O OCH
3 3
\_____/
//
\\
\ ___ / O
__
--- \ \\
/ \
C=CH-C-N O
_____/ \__/
//
\\
\ ___ /
/ ---
Cl
Химическое название
-
(E,Z)-3-/3-(4-хлорофенил)-3-(3,4-
диметоксифенил)акрилоил/морфолин.
Эмпирическая формула: C H ClNO .
21 22 4
Молекулярная масса - 287,9.
Препараты: ЦМЕ 151 поставляется в виде
смачивающегося порошка 500 г/кг для бакового смешения с контактными фунгицидами
или в качестве готового порошка, который уже включает манкоцеб
90/600 г/кг.
Физические свойства: бесцветное твердое
кристаллическое вещество, без запаха, реакции изомеризации происходят в
различных растворителях под влиянием света.
Температура плавления - 127 - 148 °C.
Растворимость: легко растворим в дихлорметане, растворим в ацетоне, ацетонитриле
и метаноле; плохо растворим в гексане - 0,112 г/л и
воде - 0,050 г/л.
Стабильность: хорошая термальная и
гидролитическая стабильность.
-5
Давление паров - E,-форма 10 Па при 20 °C.
Препарат малотоксичен.
ЛД для мышей составляет 3700 мг/кг, а
50
для крыс 3900
мг/кг, не оказывает кожно-раздражающего действия.
2. Методика
определения диметоморфа
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении диметоморфа ацетоном, очистке переэкстракцией
в дихлорметан. Количественное определение
производится с помощью жидкостного хроматографа (УФ-детектор).
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Минимальное детектируемое количество 1 нг
Предел обнаружения 0,01 мг/кг
P - размах варьирования 75 - 87%
C - среднее значение определения 82%
S - стандартное отклонение +/- 5,0%
Доверительный интервал среднего при
альфа = 0,95 и n
= 5 82,0
+/- 14,0%
Мешающих анализу пестицидов не выявлено.
2.2. Реактивы и
растворы
Ацетон, хч,
ГОСТ 2603-79.
Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
Ацетонитрил, хч, ТУ 6-09-3534-87.
Дихлорметан, хч, ТУ 6-09-3435-86.
Натрий хлористый, хч,
ГОСТ 4233-77.
Натрий сернокислый, безводный, ч, ГОСТ 4166-76.
Хлороформ, хч,
ГОСТ 20015-74.
2.3. Приборы и
посуда
Хроматограф жидкостный со
спектрофотометрическим детектором марки "Милихром".
Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на
шлифе, ГОСТ 9737-70.
Колбы круглодонные, ГОСТ 25336-82, на
шлифе, ГОСТ 9737-70.
Воронки химические, ГОСТ 25336-82.
Воронки делительные, ГОСТ 25336-82.
Аппарат для встряхивания проб любого
типа.
Испаритель ротационный вакуумный любого
типа.
Весы технические лабораторные ВЛКТ-500.
Весы аналитические ВЛР-200, ГОСТ
19491-74.
Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.
2.4.1. Отбор и подготовка проб
Отбор проб производится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции,
продуктах питания и объектах окружающей среды", утвержденными заместителем
Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79, N 2051-79.
2.5.1. Экстракция
25 г измельченного материала - картофель,
огурцы, почва - помещают в коническую колбу и заливают 100 мл охлажденного
ацетона (t ~ 10 - 15 °C). Пробу встряхивают 15 мин. на аппарате для
встряхивания. Ацетоновый экстракт фильтруют. Экстракцию повторяют с 80 мл
ацетона, остаток промывают 20 мл ацетона. Экстракты объединяют и упаривают на
ИР до отсутствия запаха ацетона.
2.5.2. Очистка экстракта
1. К сконцентрированному остатку
приливают 100 мл воды, 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и 25 мл дихлорметана (или свежеперегнанного хлороформа). Смесь
встряхивают в течение 5 мин. и переносят в делительную воронку. Нижнюю фазу (дихлорметан) фильтруют через 30 г безводного сернокислого
натрия. Водную фазу экстрагируют еще дважды в течение 5 мин. 25 мл дихлорметана. Экстракты дихлорметана
фильтруют через безводный сернокислый натрий, который затем промывают 15 мл дихлорметана. Фильтраты собирают в круглодонную колбу и
концентрируют до сухого состояния на ротационном испарителе.
Иногда очистки перераспределением диметоморфа в дихлорметан
оказывается недостаточно. В этом случае дополнительно выполняется следующая
очистка.
2. К сухому остатку добавляется 20 мл
воды, 30 мл ацетонитрила и 30 мл гексана.
Смесь встряхивают в течение 5 мин., затем переносят в делительную воронку. Гексан - верхняя фаза - отбрасывают, водный остаток
экстрагируют еще 2 раза в течение 5 мин. 30 мл гексана.
Гексан удаляют, а нижнюю фазу экстрагируют 2 раза 25
мл дихлорметана. Фазы дихлорметана
фильтруют через 20 г сульфата натрия. Сульфат натрия промывают 10 мл дихлорметана. Из полученного экстракта с помощью
ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель.
2.6. Определение диметоморфа жидкостной хроматографией
Сухой остаток по п. 1 и п. 2 (2.5.2)
растворяют в 2 - 4 мл ацетонитрила или дихлорметана в зависимости от используемой колонки.
Измерения выполняются при следующих
условиях:
Колонка: 1) Силасорб
600, 5,0 мкм
размер, мм, - 64 x 2
2) Диасорб-130 -
фенил/Т, 10 мкм
размер, мм, - 120 x 2
Подвижная фаза: 1) гексан:изопропанол:дихлорметан
(35:20:5) (по
объему)
(элюент) 2) ацетонитрил:вода - 60:40 (по объему)
Скорость элюента: 100 мкл/мин.
Длина волны: 240 нм
Объем вводимой пробы: 5 мкл
Диапазон чувствительности: 0,2 - 0,4
Объем удерживания: 1) 264 - 266 мкл
2) 376 - 378 мкл
2.7. Обработка
результатов анализа
Содержание пестицида в анализируемой
пробе определяется методом соотношения пиков стандартов и анализируемых проб.
Количество диметоморфа
рассчитывается по формуле:
H
x V x C x V
2 1
3
X = ----------------,
H x V
x P
1 2
где:
X - количество препарата в пробе, мг/кг;
C
- количество препарата в
стандартном растворе, введенном в
хроматограф,
мкг/мл;
H -
высота пика стандарта, мм;
1
H -
высота пика пробы, мм;
2
V
- объем стандартного раствора, введенного в
хроматограф,
1
мкл;
V -
объем анализируемого раствора, введенного в хроматограф,
2
мкл;
V -
объем анализируемой пробы, мл;
3
P - навеска пробы, г.
Минимально детектируемая концентрация диметоморфа в анализируемой пробе 0,2 мкг/мл. Линейный
диапазон детектирования 0,2 мкг/мл - 4 мкг/мл.
3. Требования
техники безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила
предосторожности при работе с токсичными, взрывоопасными и легковоспламеняющимися
веществами.