Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6192-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ДИМЕТОМОРФА (АКРОБАТА)
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ
И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Диметоморф (акробат) - экспериментальный фунгицид, предназначенный для борьбы с
фитофторой.
CH O OCH
3 \ --- / 3
//
\\
\ ___ / O
--- C H ClNO .
--- \ \\
/ \ 21 22 4
\C=CH-C-N O
/ \
/ М.м.
287,9.
--- / ---
//
\\
\ ___ /
/ ---
Cl
Химическое название -
(E,Z)-3/3-(4-хлорофенил)-3-(3,4-
диметоксифенил)акрилоил/морфолин.
Бесцветное
твердое кристаллическое вещество,
без запаха, реакции
изомеризации происходят
в различных растворителях
под влиянием света.
Температура
плавления 127 - 148 °C. Легко растворим в ацетоне, ацетонитриле
и метаноле, плохо
растворим в гексане - 0,122 г/л и
воде - 0,050
г/л.
Препарат малотоксичен. ЛД
для мышей - 3700
мг/кг, а для
крыс - 3900
50
мг/кг, не
оказывает кожно-раздражающего действия.
2. Характеристика
метода
Метод основан на использовании газожидкостной
хроматографии с применением детектора по захвату электронов (ДЭЗ) или
тонкослойной хроматографии.
Отбор проб производится с
концентрированием на бумажном фильтре "синяя лента".
Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме - 0,5 нг
(ГЖХ), 1 мкг (ТСХ).
Нижний предел измерения в воздухе - 0,001
мг/куб. м (ГЖХ), 0,05 мг/куб. м (ТСХ) при отборе 150 л воздуха.
Диапазон измеряемых концентраций: 0,001 -
0,04 (ГЖХ), 0,05 - 0,25 (ТСХ).
Измерению не мешают другие фунгициды.
Суммарная погрешность измерения не
превышает +/- 20,0% (ГЖХ) и +/- 25% (ТСХ).
3. Реактивы,
растворы и материалы
Диметоморф, 95,6-процентный препарат.
Стандартный раствор диметоморфа
с концентрацией 100 мг/мл готовят растворением 10,5 мг препарата в ацетоне в
мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в холодильнике. Годен
к употреблению в течение 30 дней.
Рабочие растворы диметоморфа
концентрации 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках
вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартного раствора.
Хранят рабочие растворы диметоморфа в холодильнике. Годен к употреблению в течение 1 - 3 дней.
Натрия сульфат безводный хч, ГОСТ 4166-76.
Ацетон ч, ГОСТ
2603-79.
Гексан ч, ТУ 6-06-3375-78.
Азот газообразный, ГОСТ 9283-74, в
баллоне с редуктором.
Аммиак 25-процентный, ГОСТ 3760-74.
Бромфеноловый синий чда, ТУ
6-99-3719-83.
Кислота лимонная хч,
ГОСТ 3652-74, 2-процентный водный раствор.
Кислота уксусная хч,
ГОСТ 18290-75, 5-процентный водный раствор.
Серебро азотнокислое чда,
ГОСТ 1277-81.
Проявляющий реагент 1:
смесь растворов бромфенолового
синего (БФС) и азотнокислого серебра. Готовят два раствора: 1. 0,5%
водно-ацетоновый (1:3) раствор азотнокислого серебра. 2. 10 мл 0,05-процентного
раствора бромфенолового синего в ацетоне. Раствор 2
разбавляют раствором 1 до объема 100 мл. Хранят проявляющий реактив в темном
прохладном месте. Годен к употреблению в течение 3 - 5
дней.
Проявляющий реагент 2:
растворяют
0,5 г AgNO в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 5 -
7
3
мл аммиака и
доводят ацетоном до 100 мл. Хранят в темном месте.
Фильтры бумажные обеззоленные
"синяя лента", диаметр 5 - 6 см, ТУ 6-09-1678-77.
Хромосорб 750 с 3% OV-17.
4. Приборы и посуда
Газовый хроматограф с детектором по
захвату электронов.
Весы аналитические ВЛА-200М.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ
25-11-917-74.
Холодильник бытовой.
Шкаф электрический сушильный, ТУ
64-1-1411-72.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ
25336-82.
Колбы грушевидные, ГОСТ 25336-82,
вместимостью 50 - 100 мл (для отгонки растворителя).
Холодильник, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные, цилиндры, мензурки,
пробирки, ГОСТ 1770-74.
Воронки лабораторные, диаметр 5 - 6 см,
ГОСТ 25336-82.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1; 5; 10 мл.
Воронки делительные, ГОСТ 25336-82, на
250 мл.
Микропипетки, ГОСТ 20292-74, на 0,1; 0,2.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.
Скальпель.
Камера для хроматографирования,
ГОСТ 25336-82.
Камера для опрыскивания пластинок, ТУ
25-11-430-70.
Колба с тубусом, ГОСТ 25336-82.
Воронка Бюхнера,
ГОСТ 9147-80.
Секундомер, ГОСТ 5072-79.
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
Фильтродержатель.
УФ-лампа типа ПРК-4 или аналогичная.
5. Отбор пробы
воздуха
Воздух со скоростью 5 л/мин. аспирируют через бумажный фильтр "синяя лента",
закрепленный в фильтродержателе. Продолжительность
отбора пробы - 30 мин. Длительность хранения проб в стеклянной таре в
затемненном от света месте не более 5 суток.
6. Подготовка к
измерению
Пластинку "Силуфол"
помещают в хроматографическую камеру, содержащую
смесь растворителей ацетон - 25% аммиак в соотношении 7:3 (об./об.), глубина погружения пластинки в растворитель составляет
0,5 см. После подъема фронта растворителя до верхнего края пластинки ее
вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до испарения растворителей. После
этого пластинка готова к употреблению.
7. Проведение
измерения
Бумажный фильтр, содержащий диметоморф (акробат), из фильтродержателя
переносят в делительную воронку и заливают 15 - 20 мл ацетона. Экстрагируют
пестицид из фильтра в течение 10 - 15 мин., периодически перемешивая содержимое
емкости. Экстракцию повторяют дважды свежими порциями ацетона, экстракты
объединяют, отгоняют на ротационном испарителе досуха при температуре бани не
выше 55 °C. К сухому остатку пипеткой добавляют 1,5 мл ацетона.
8. Метод ТСХ
0,2 мл полученного раствора наносят
микропипеткой на очищенную пластинку "Силуфол".
Рядом с пробой наносят по 0,2 мл каждого рабочего раствора диметоморфа,
что соответствует содержанию в пятне 0,5; 1,0; 2,0 мкг препарата.
Пластинку помещают в хроматографическую
камеру, куда за 10 - 15 мин. до
хроматографирования
наливают смесь растворителей гексан - ацетон
(1:1) в
таком
количестве, чтобы глубина
погружения пластинки в
растворители
составляла 0,5
см. После подъема фронта
растворителей от линии старта на
высоту 10
см хроматографирование прекращают.
Пластинку выдерживают в
вытяжном шкафу
до испарения растворителей
и обрабатывают одним из
проявляющих реагентов.
При
обработке азотнокислым серебром
(проявляющий
реагент 2) пластинку орошают до влажного состояния,
выдерживают в вытяжном
шкафу 15
- 20 мин.
(до исчезновения запаха
аммиака) и подвергают
УФ-облучению в течение 10 - 15 мин. (нефильтрованные
УФ-лучи, лампа ПРК-4).
Пластинку помещают
на расстоянии 20 см от
источника света. При наличии
диметоморфа на хроматограмме проявляются пятна серо-черного цвета. После
обработки пластинки
бромфеноловым
реагентом (проявляющий реагент
2)
пластинку опрыскивают раствором лимонной (или уксусной)
кислоты. О наличии
диметоморфа в пробе свидетельствует появление в этом случае
синего пятна на
желтом фоне. Величина R =
0,5 +/- 0,2.
f
9. Метод ГЖХ
Детектор постоянной скорости
рекомбинации.
Колонка стеклянная - 1000 x 3 мм.
Твердый носитель - Хромосорб-750.
Жидкая фаза - 3% OV-17.
Температура термостата колонки - 185 °C,
детектора - 250 °C,
испарителя - 200 °C.
Газ-носитель - азот особой чистоты.
Скорость движения диаграммной ленты - 60
мм/мин.
Скорость потока азота через колонку - 60
мл/мин.
Скорость потока через детектор - 150
мл/мин.
-12
Рабочая шкала электрометра - 20 x 10 .
Время удерживания - 7 мин. 30 сек.
Объем вводимой пробы - 3 - 5 мкл.
Линейность детектирования 0,5 - 20,0 мкг.
10. Расчет
концентрации
Концентрацию диметоморфа
в мг/куб. м в воздухе вычисляют по формуле:
Тонкослойная хроматография:
G x V
X = ---------,
0,2 x V
20
где:
G -
количество диметоморфа в пятне пробы, найденное путем
сравнения со
стандартами,
мкг;
V - окончательный объем экстракта пробы,
мл;
0,2 - объем экстракта пробы, нанесенный на
пластинку, мл;
V
- объем пробы воздуха, отобранный
для анализа и приведенный к
20
нормальным
условиям, л.
Газожидкостное хроматографирование:
C x S
x V x V
ст пр 1 ст
X = --------------------,
S x V
x V
ст пр 20
где:
S -
площадь пика анализируемой пробы, кв. мм;
пр
S -
площадь пика стандарта, кв. мм;
ст
C - содержание диметоморфа
в стандарте, мкг/мл;
V -
объем стандартного раствора, введенного в хроматограф, мкл;
ст
V -
объем хроматографируемой пробы, введенной в
хроматограф, мкл;
пр
V -
общий объем пробы, мл;
1
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям, л.
11. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях (отделах, отделениях)
санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР, N 2455-81 от 20.10.81.