Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6167-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ХЛОРСУЛЬФУРОНА И ЕГО
КАЛИЕВОЙ СОЛИ В ВОДЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах окружающей среды.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
Торговые наименования: препарат-1, хардин, ленок.
Производитель: Россия.
Действующее вещество: калиевая соль хлорсульфурона.
Калиевая соль N-[(4-метил-6-метокси-1,3,5-триазинил-2)аминокарбонил]-2-хлорбензол-сульфонамида.
Структурная формула:
// \
Cl
//
\ /
│
││
___ OCH
│
││ N---
/ 3
\\ / \SO -NHCON- / \
\\ / 2 +\\
//N
K N---CH
3
Эмпирическая формула: C H N O SClK.
12 11 5 4
Молекулярная масса: 395,50.
Калиевая соль хлорсульфурона
представляет собой тонкодисперсный порошок светло-серого цвета.
Растворимость при 295,5
°К (22,5 °С) в 100 г растворителя:
1. Вода - 14
2. Ацетон - 0,28
3. Этиловый спирт - 1,65
4. Бензол - 1,28
При pH 2 - 3
калиевая соль хлорсульфурона переходит в хлорсульфурон, в результате чего растворимость в воде
уменьшается, а в органических растворителях резко возрастает.
ЛД
для крыс - 9220,5 мг/кг.
50
ПДК калиевой соли хлорсульфурона
в воде - 0,01 мг/л.
Область применения препарата хардин 12,5% в.р. - селективный
гербицид для до- и
послевсходовой обработки посевов злаковых.
2. Методика
определения калиевой соли хлорсульфурона в воде
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Определение основано на переводе калиевой
соли анализируемого вещества при pH 2 - 3 в
неионизированную форму хлорсульфурона, экстракции
последнего из воды хлороформом, концентрировании экстракта упариванием и
последующем определении методом газожидкостной хроматографии с использованием
электронозахватного детектора (ДПР) на колонке с 3% ПФМС-4 на сферохроме-1,
пропитанного 2% ортофосфорной кислоты.
2.1.2. Избирательность метода
Метод обеспечивает полную селективность.
Определению не мешают полупродукты получения препарата.
2.1.3. Метрологическая характеристика
метода
Диапазон измеряемых концентраций калиевой
соли хлорсульфурона (КСХС) в воде от 0,01 до 0,1
мг/л.
Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме - 0,005 мкг.
Нижний предел измерения в воде - 0,01
мг/л.
Среднее значение определения стандартных
количеств КСХС при n = 15 равно 91%.
Стандартное максимальное отклонение
случайной ошибки при n = 15 равно 2,5%.
Доверительный интервал определения при n
= 5 и P = 0,95 равен 6,8%.
Суммарная погрешность не превышает
11,40%.
Время выполнения определения (включая
отбор образца) КСХС в одной пробе при одновременной подготовке двух
параллельных образцов - 1 - 1,5 часа.
2.2. Реактивы и
материалы
Ацетон осч, ТУ
6-09-3513-82.
Хлороформ хч,
ТУ 6-09-4263-76.
Твердый носитель - сферохром-1 зернением
0,15 - 0,30 мм.
Жидкая фаза - жидкость кремнеорганическая ПФМС-4, ГОСТ 15866-70.
Азот осч, ГОСТ
9293-73, из баллона с редуктором.
Этанол, абсолютированный,
ГОСТ 17299-78.
Дистиллированная вода, ГОСТ 6709-72.
Кислота хлористоводородная ч, ГОСТ 3118-77, 15% раствор.
Кислота ортофосфорная ч,
ГОСТ 6552-68.
Калиевая соль хлорсульфурона
(КСХС) с содержанием основного вещества не менее 98%.
2.3. Приборы,
аппаратура, посуда
Газовый
хроматограф типа "Цвет-100", ТУ
1.550.127, снабженный
детектором по
захвату электронов, порог
чувствительности детектора по
-10
линдану - 2,5 x 10
мг/с.
Колонка стеклянная длиной 200 см с
внутренним диаметром 3 мм.
Аспиратор с объемным расходом воздуха от
1 до 20 дм/мин.
Цилиндр 4-50, ГОСТ 1770-74.
Мерные колбы, ГОСТ 1770-74, вместимостью
100 мл и 50 мл.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 10,
5, 2 мл с делениями.
Делительные воронки вместимостью 100 мл,
ГОСТ 25336-82.
Микрошприц МШ-10М, ТУ 2-833-106.
Колбы грушевидные вместимостью 50 мл,
ГОСТ 9737-70.
Колба 2-25-2, ГОСТ 1770-74.
Колба 2-50-2, ГОСТ 1770-74.
Воронка В-36-50 ХС, ГОСТ 25336-82.
Чашка фарфоровая вместимостью 250 мл,
ГОСТ 9147-73.
Пробирка П-2-10-14/23 ХС, ГОСТ 1770-74.
Пробирка П-2-15-14/23 ХС, ГОСТ 1770-74.
Холодильник Х111-1-200-14/23 ХС, ГОСТ
25336-82.
Линейка измерительная, цена деления 1 мм,
ГОСТ 4272-75.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Регулятор температуры УКТ-4 У-2, ТУ
25-111378-77.
Термометр контактный типа ТПК, ГОСТ
9871-61.
Термометр, ГОСТ 215-73, ТЛ-2, цена
деления 1 °C.
Секундомер механический СОП-пр. 2а3-000,
ГОСТ 5072-79.
Барометр ВК-75, ТУ 35-04-223-75, цена
деления 0,1 кПа.
Весы аналитические, лабораторные, общего
назначения, тип ВЛА-200М, ТУ 25-06-1049-72.
Весы лабораторные, технические ВЛКТ-500М,
4-ый класс, ГОСТ 24104-80.
Набор разновесов Г-2-210, ГОСТ 7328-82.
Насос водоструйный, ГОСТ 25336-82.
Бюксы СН-60/14 или СН-85/15, ГОСТ
7148-70.
Шкаф сушильный электрический 2В-151, ТУ
64-1-1411-76.
2.4. Отбор пробы
Отбор пробы производится в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств", утвержденными Зам. Главного
государственного санитарного врача СССР 21.08.79 N 2051-79.
2.5. Подготовка к
определению
2.5.1. Приготовление стандартных и градуировочных растворов
Стандартные растворы калиевой соли хлорсульфурона: 0,01 мг/мл - раствор N 1. 50 мкг КСХС
взвешивают в мерной колбе вместимостью 50 мл на аналитических весах, записывая
результат до четвертого знака. Приливают 1 мл дистиллированной воды, после
растворения навески добавляют ацетон до метки, тщательно перемешивая содержимое
колбы, и рассчитывают концентрацию вспомогательного раствора с учетом чистоты
стандартного вещества.
Из вспомогательного раствора методом
разбавления готовят стандартный раствор КСХС в ацетоне с концентрациями 0,001
мг/мл (N 1). Затем, используя стандартный раствор, готовят градуировочные
растворы с массовыми концентрациями:
N 2 - 0,00001 мг/мл,
N 3 - 0,00004 мг/мл,
N 4 - 0,00006 мг/мл,
N 5 - 0,00008 мг/мл,
N 6 - 0,00010 мг/мл.
Способ приготовления градуировочных
растворов из стандартного раствора N 1 представлен в таблице 1.
Таблица 1
|
Номер
градуиров.
раствора
|
Стандартный
раствор N 1
(0,001 мг/мл), мл
|
Растворит.
ацетон
|
Концентрация
градуиров. раствора,
мг/мл
|
|
2
|
1
|
99,00
|
0,00001
|
|
3
|
4
|
96,00
|
0,00004
|
|
4
|
6
|
94,00
|
0,00006
|
|
5
|
8
|
92,00
|
0,00008
|
|
6
|
10
|
90,00
|
0,00010
|
Градуировочные растворы с содержанием калиевой соли хлорсульфурона
от 0,00001 мг/мл до 0,0001 мг/мл готовят соответствующим разбавлением
стандартного раствора N 1 ацетоном.
Стандартные растворы стабильны при
хранении в холодильнике в течение 10 суток при условиях, исключающих испарение
раствора.
2.5.2. Подготовка колонки
Для приготовления насадки для колонки на
технических весах взвешивают 20 г сорбента "Сферохром-1" в бюксе и
помещают в сушильный шкаф для просушивания при температуре 150 °C на 5 часов.
После охлаждения с закрытой крышкой до 20 - 30 °C сорбент помещают в фарфоровую
чашку вместимостью 250 мл со спиртовым раствором (60 - 70 мл) ортофосфорной
кислоты с массой 2% от веса сорбента.
Для испарения спирта чашку с содержимым
нагревают на водяной бане при температуре 70 - 80 °C, осторожно помешивая.
Спирт упаривают почти досуха. Затем таким же способом наносят кремнеорганическую жидкость ПФМС-4 с массой 4% от веса
носителя. Для растворения ПФМС-4 используют хлороформ, который упаривают при
температуре 50 - 89 °C досуха.
Хроматографическую колонку заполняют насадкой с присоединением к слабому вакууму.
Достаточная плотность и равномерность набивки обеспечивается непрерывным
постукиванием по колонке. Колонку кондиционируют при скорости азота 50 мл/мин.
в режиме программирования температуры от 50 до 270 °C со скоростью нагрева 2
°C/мин., а затем в изотермическом режиме при 270 °C в течение 20 часов без
присоединения колонки к детектору. Общую подготовку прибора проводят согласно
инструкции.
После установки подготовленной колонки в
хроматограф следует убедиться, что падение напряжения, измеренное согласно
техническому описанию ДПР, составляет 30 - 40 В.
2.5.3. Построение градуировочного
графика
Для градуировки прибора вводят в
хроматограф по 2 мкл каждого градуировочного
раствора не менее 3-х раз, измеряют высоту пика линейкой и строят градуировочный график зависимости высоты пика от массовой
концентрации КСХС в градуировочном растворе.
При данной градуировке необходимо
провести измерение коэффициента экстракции КСХС из воды. Коэффициент экстракции
определяют по соотношению высоты пика КСХС при анализе экстракта из воды с
дозированным количеством КСХС к высоте пика КСХС при анализе градуировочных растворов тех же концентраций.
При использовании градуировочного
графика, построенного на основании данных, полученных после экстракции, вводить
коэффициент извлечения в расчетную формулу не требуется.
2.6. Описание
определения
2.6.1. Подготовка проб к анализу
250 мл воды помещают в делительную
воронку, воду подкисляют 15-процентным раствором хлористоводородной кислоты до pH 2 - 3, определяя pH по
индикаторной бумаге и энергично встряхивая в течение 1 - 2 мин. с 40 мл
хлороформа. После расслаивания фаз хлороформный слой фильтруют через бумажный
фильтр, смоченный хлороформом, в выпарительную грушевидную колбу. Экстракцию
повторяют с тем же объемом хлороформа и объединенный
экстракт упаривают под вакуумом водоструйного насоса при температуре 60 - 80 °C
досуха. В охлажденную колбу вносят 1 мл ацетона и тщательно обмывают стенки
колбы, при этом колба закрыта притертой пробкой.
2.6.2. Условия хроматографирования
градуировочных растворов и анализируемых проб
Длина колонки, см 200
Внутренний диаметр колонки, мм 3
Насадка колонки сферохром-1
зернением 0,15 - 0,30 мм
Жидкая фаза ПФМС-4 в
количестве
4% (мас.) + 2% ортофосфорной
кислоты
Температура, °C:
колонки 230
испарителя 300
детектора 250
Скорость потока газа-носителя, мл/мин.:
через колонку 50
через детектор 150
Скорость диаграммной ленты, мм/час 60
-10
Шкала электрометра, мА 1 x 64 x 10
Объем вводимой пробы, мкл 2
Абсолютное время удерживания, сек 220
Линейный диапазон определения, нг 1,50 -
30,00
Анализируемый экстракт в количестве 2 мкл вводят с помощью микрошприца
через испаритель хроматографа и записывают хроматограмму
не менее 3-х раз. Проводят определение высоты пика и фиксируют среднюю из трех определений.
2.7. Обработка
результатов анализа
Перед проведением измерений ежедневно по градуировочному раствору с массовой концентрацией 0,00006
мг/мл проводят коррекцию градуировочной прямой.
Расчет содержания анализируемого вещества
в пробе воды проводится по высоте пика методом сравнения со стандартом по
формуле:
C x h x v x K
X = -------------,
h x V
гр
где:
X - содержание КСХС, мг/л или ppm;
C - концентрация КСХС градуировочного
раствора, мкг/мл;
h
и h -
высоты пиков на хроматограммах градуировочного раствора и
гр
экстракта
соответственно, мм;
v - объем экстракта после растворения
остатка, мл;
V - объем пробы воды, взятой для анализа,
мл;
K -
коэффициент, учитывающий потери при экстракции и концентрировании,
который равен 1:1, что соответствует среднему обнаружению
91%.
Примечание:
Коэффициент K находят после
анализа проб воды, содержащих
определенные
количества анализируемого вещества, по формуле:
А внесено
K = ------------.
А обнаружено
3. Требования
безопасности
При проведении анализов необходимо
выполнять Правила техники безопасности при работе со стеклом,
электрооборудованием, ЛВЖ, кислотами, а также соблюдать правила
производственной санитарии и личной гигиены при работе в химической
лаборатории.