Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6154-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ИМИДОКЛОПРИДА В ВОДЕ, ПОЧВЕ,
САХАРНОЙ СВЕКЛЕ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
1. Краткая
характеристика препарата
Действующее вещество имидоклоприда
- 1-[6-хлоро-3-пиридинил/метил]-4,дигидро-N-нитро-Iн-имидазол-2-амин.
Структурная формула:
____ ┌────┐
Cl-// \\CH -N│ │NH
\____/
2 \ /
N---- \/
||
N - NO
2
Эмпирическая формула: C H ClN O .
9 10 5 2
Молекулярная масса - 255,6.
Химически чистое соединение - белое
кристаллическое вещество без запаха.
Препарат растворим (20 °С) в воде - 0,58
г/л, гексане - 0,1 г/л, дихлорметане
- 81 г/л, 2-пропаноле - 1,6 г/л, толуоле - 0,94 г/л.
ПДК в воде - 0,005 мг/л, ОДК в почве -
0,04 мг/кг, МДУ в сахарной свекле - не допускается.
2. Методика
определения имидоклоприда в воде, почве,
сахарной свекле
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Методика основана на определении имидоклоприда в воде, почве, сахарной свекле тонкослойной
хроматографией после экстракции препарата из проб хлороформом и очистки
экстракта.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Предел обнаружения - 0,5 мкг.
Нижний предел определения:
вода - 0,001 мг/л
почва - 0,005 мг/кг
сахарная свекла - 0,01 мг/кг.
Среднее значение определения:
вода - 99,5%
почва - 90%
сахарная свекла - 95,0%.
Суммарная погрешность определения - +/-
11 - 12%.
2.2. Реактивы и
материалы
Имидоклоприд, 99,5% препарат, фирма "Bayer".
Хлороформ, ч., ГОСТ 20015-74.
с-Толидин, ТУ
6-09-2232-75.
Ацетон, ч.д.а.,
ГОСТ 2603-79.
Гексан, х.ч., ТУ-6-09-3375-78.
Бензол, х.ч., ГОСТ
5965-75.
Натрий сернокислый безводный, ч.д.а., ГОСТ 4266-76.
Вода дистиллированная, ГОСТ 7602-72.
Пластины "Силуфол"
(ЧССР).
Фильтры бумажные, "красная
лента", ТУ 6-09-1678-77, диаметр 6,0 - 9,0 мм.
Вата гигроскопическая.
Уксусная кислота, ч.д.а.,
ГОСТ 61-75.
Калий йодистый, ч.д.а.,
ГОСТ 4232-74.
2.3. Приборы,
посуда
Весы аналитические, ВЛА-200, ГОСТ
19491-74.
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ
25-11-917-74.
Холодильник бытовой.
Шкаф электрический сушильный, ТУ
64-1-1411-72.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Вакуумный водоструйный насос, ГОСТ
25336-82.
Колбы грушевидные, вместимостью 50 - 100
мл (для отгонки растворителя), ГОСТ 25336-82.
Холодильник, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные, цилиндры мерные, пробирки,
ГОСТ 1770-74.
Колбы конические плоскодонные, ГОСТ
25336-82.
Воронки лабораторные, диаметр 56 мл, ГОСТ
25336-82.
Пипетки на 1,5; 10,0 мл, ГОСТ 20292-74.
Воронки делительные на 250 мл, ГОСТ
25336-82.
Микропипетки на 0,1; 0,2 мл, ГОСТ 20292-74.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 25336-82.
Скальпель.
Камера для хроматографирования,
ГОСТ 25336-82.
Камера для опрыскивания пластинок, ГОСТ
25336-82.
Секундомер, ГОСТ 5072-79.
Лампа ртутно-кварцевая ПРК-4, ТУ
536-280-74.
2.4. Подготовка к
определению
2.4.1. Отбор и подготовка проб
Отбор проб проводят в соответствии с
"Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции,
пищевых продуктов и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем
Главного Государственного санитарного врача СССР 21.08.79 N 2051-79.
2.4.2. Приготовление стандартного,
рабочих растворов имидоклоприда
Стандартный раствор имидоклоприда
с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением соответствующей навески
препарата (10,0 мг) в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранят в
холодильнике. Годен к употреблению в течение 30 дней.
Рабочие растворы имидоклоприда
с концентрацией 2,5; 5,0; 10,0; 20,0 мкг/мл готовят в градуированных пробирках
вместимостью 10 мл соответствующим разбавлением ацетоном стандартного раствора.
Хранят рабочие растворы имидоклоприда в холодильнике. Годен
к употреблению в течение 3 - 5 дней.
2.4.3. Проявляющий реактив
Готовят раствор о-толидина
(16 г) в 30 мл уксусной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной водой и
прибавляют 1 г йодида калия. После опрыскивания пластинку следует облучать УФ-светом.
2.4.4. Приготовление пластин "Силуфол"
Пластинку "Силуфол"
помещают в хроматографическую камеру, содержащую
смесь растворителей: ацетон, 25-процентный аммиак в соотношении 7:3 (об./об.). Глубина погружения
пластинки в растворитель составляет 0,5 см. После подъема фронта растворителя
до верхнего края пластинки ее вынимают из камеры и выдерживают на воздухе до
испарения растворителей. После этого пластинка готова к употреблению. Хранят
подготовленные пластинки в эксикаторе.
2.5. Проведение
определения
2.5.1. Экстракция и очистка
Вода. Пробу воды (500 мл) фильтруют от
механических примесей. Имидоклоприд экстрагируют
хлороформом по 15 - 20 мл три раза.
Объединенный хлороформный экстракт
пропускают через слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном
испарителе при t = 55 °C досуха.
Почва. Пробу воздушно-сухой почвы
просеивают через сито. Для анализа берут 100 г почвы. Экстракцию проводят
хлороформом 3 раза по 50 мл. Объединенный хлороформный экстракт фильтруют через
плотный двойной бумажный фильтр, пропускают через безводный сульфат натрия и
упаривают на ротационном испарителе при t = 55 °С
досуха.
Сахарная свекла. 50 - 100 г навески
измельчают. Экстрагируют хлороформом 3 раза по 30 - 50 мл. Объединенный
хлороформный экстракт фильтруют через плотный бумажный фильтр, пропускают через
слой безводного сульфата натрия и упаривают на ротационном испарителе при t =
55,6 °C досуха.
2.5.2. Хроматографирование
Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл
ацетона, закрывают колбу герметичной пробкой, перемешивают содержимое и 0,2 мл
полученного раствора наносят микропипеткой на подготовленную пластинку "Силуфол". Рядом с пробой наносят по 0,2 мл каждого
рабочего раствора имидоклоприда, что соответствует
содержанию в пятне 0,5; 1,0; 2,0 мкг препарата.
Пластинку помещают в хроматографическую
камеру, куда за 10 - 15 мин. до
хроматографирования
наливают смесь растворителей
бензол-ацетон (1:1) -
смесь N
1 либо гексан-ацетон
(1:1) - смесь N 2 в таком количестве, чтобы
глубина
погружения пластинки в растворитель составила 0,5 см. После подъема
фронта растворителя
от линии старта на высоту 10 см хроматографирование
прекращают. Пластинку
выдерживают в вытяжном
шкафу до испарения
растворителей,
обрабатывают проявляющим реагентом и подвергают УФ-облучению
в течение
1 - 5 мин. Пластинку помещают на
расстояние 20 см от источника
света. При наличии имидоклоприда
на хроматограмме проявляются пятна синего
цвета. Величина
R имидоклоприда в
указанных подвижных растворителях
1
следующая:
бензол-ацетон (1:1) - 0,6 +/- 0,02;
гексан-ацетон (1:1) - 0,5 +/- 0,02.
Минимально детектируемое количество имидоклоприда - 0,5 мкг.
2.5.3. Обработка результатов анализа
Количественное определение проводят путем
сравнения площади и интенсивности пятен пробы и стандартных растворов.
Концентрацию имидоклоприда
(X) в воде (мг/л), почве, сахарной свекле (мг/кг) вычисляют по формуле:
А x V
Х = ------,
P x V
1
где:
А - количество имидоклоприда,
найденное путем сравнения со стандартами,
мкг;
Р - навеска
(объем) исследуемой пробы, г, л;
V - конечный объем экстракта пробы, мл;
V - хроматографируемый объем пробы, мл.
1
3. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях. При работе с ядовитыми и
взрывчатыми веществами реакции следует проводить только в вытяжном шкафу,
строго соблюдая правила производственной санитарии и личной гигиены.