Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6105-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОФТАНОЛА-Т (ПО ИЗОФЕНФОСУ) В ВОДЕ,
ПОЧВЕ, ЗЕРНЕ И СЕМЕНАХ САХАРНОЙ СВЕКЛЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
Офтанол-Т -
смесевой препарат: изофенфос с добавкой 10% ТМТД.
C H O
2 5 S ----
││ //
\\
P --O-- \ ____ /
(CH ) CHNH \----/ М.м. 345,2.
3 2 /
CO CH(CH
) C H NO
SP.
2 3 2 15 24 4
Изофенфос (амаз, офтанол) -
бесцветное масло, не перегоняющееся в вакууме без
разложения. Растворимость в воде 23,8 г/л, в циклогексане, метиленхлориде
- 60%. В щелочной среде гидролизуется.
ЛД
для крыс 28 - 38,7 мг/кг, МДУ в зерне
в настоящее время
50
еще не установлены.
2. Методика
определения офтанола-Т в зерне
и семенах сахарной
свеклы
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Методика определения офтанола-Т
основана на определении изофенфоса, являющегося
основным и более токсичным компонентом препарата. Определение ТМТД проводится в
соответствии с Методическими указаниями, утвержденными за N 4334-87.
Определение изофенфоса
основано на извлечении его из зерна ацетоном и последующем определении методом
газожидкостной (ГЖХ) хроматографии с термоионным детектором (ТИД).
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода приведена в таблице 1.
Таблица 1
┌─────────────┬────────────────┬────────────────┬───────────┬─────────────┐
│
Исследуемый │Предел обнаруж.,│Среднее значение│Стандартное│Доверительный│
│ объект
│ мг/кг, мг/л │ определения, % │отклонение,│ интервал,
│
│ │ │ │ %, +/-
│ %, +/- │
├─────────────┼────────────────┼────────────────┼───────────┼─────────────┤
│Вода │0,0004 │83 │9,3 │11,7 │
│Почва │0,002 │77 │11,5 │14,3 │
│Зерно,
семена│0,004 │79 │12,7 │15,6 │
│сах. свеклы │ │ │ │ │
└─────────────┴────────────────┴────────────────┴───────────┴─────────────┘
2.1.3. Избирательность метода
Определению не мешают ТМТД и
фосфорорганические пестициды, применяемые на зерновых (хлорофос, ДДВФ, релдан, метилнитрофос и др.).
Относительное время удерживания по метафосу 2,5.
2.2. Реактивы,
растворы и материалы
Изофенфос хч.
Ацетон хч, ГОСТ
2603-79.
Хлороформ чда,
ГОСТ 20015-74.
Натрия хлорид чда,
ГОСТ 4233-77.
Натрия сульфат безводный чда, ГОСТ 4166-76.
Стандартная фаза 5% SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS.
Азот в баллоне, ГОСТ 9293-74.
Водород в баллоне.
Воздух из баллона или нагнетаемый
компрессором.
Фильтры беззольные "красная
лента".
Основной стандартный раствор изофенфоса (N 1), содержащий 100 мкг/мл.
Готовят растворением 10 мг изофенфоса в ацетоне в мерной колбе емкостью 100 мл.
Рабочие стандартные растворы изофенфоса (N 2, 3, 4), содержащие соответственно 10; 1;
0,5 мкг/мл изофенфоса, готовят разведением ацетоном
раствора N 1.
2.3. Приборы и
посуда
Газовый хроматограф с термоионным
детектором.
Хроматографическая колонка стеклянная, длина 1 м, внутренний диаметр 3 мм.
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М,
ТУ 25-11-917-76, с набором колб для отгонки емкостью 50, 100 мл.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Водоструйный вакуумный насос или
установка компрессорная, ТУ 64-1-2985-78.
Весы аналитические ВЛА-200 1М, 2 кл., ГОСТ 19491-74.
Аппарат для встряхивания АВУ-60, ТУ
64-1-2451-78.
Мерные колбы емкостью 100, 50 мл, ГОСТ
1770-74.
Пробирки мерные емкостью 10 мл, ГОСТ
1770-74.
Пипетки на 0,1 - 5 мл, ГОСТ 20292-74.
Колбы конические емкостью 250 мл, ГОСТ
25336-82.
Микрошприц емкостью 10 мкл МШ-10, ТУ 2-833-106.
Секундомер.
2.4. Отбор проб
2.4.1. Отбор, хранение и доставка проб
производятся в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб
сельскохозяйственной продукции, пищевых продуктов и объектов окружающей среды
для определения микроколичеств пестицидов",
утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, N
2051-79 от 21.08.79.
2.5. Основные
определения
2.5.1. Экстракция
Зерно, почва. К 25 мл зерна, семян
сахарной свеклы (50 г почвы) прибавить 40 (80 мл) ацетона и экстрагировать в
течение 30 минут на аппарате для встряхивания. Экстракт слить, фильтруя через
фильтр ("красная лента") с насыпанным на фильтр безводным сульфатом
натрия (7 - 10 г). Повторить экстракцию. Экстракты объединить и
сконцентрировать до ~ 1 мл под вакуумом на ротационном испарителе при
температуре бани не более 45 °C. Перенести остаток пробы в мерную пробирку,
довести ацетоном точно до 1 - 2 мл и анализировать ГЖХ.
Вода. 200 мл анализируемой пробы
поместить в делительную воронку, подкислить 0,1 н раствором HCl
до pH 5, хорошо перемешать, добавить 10 мл
10-процентного раствора хлористого натрия и экстрагировать из водной фазы
хлороформ 3 x 50 мл. Хлороформные экстракты объединить, просушить безводным
сульфатом натрия и отогнать растворитель до ~ 1 мл под вакуумом досуха при
комнатной температуре. Сухой остаток растворить в 2 мл ацетона и анализировать
ГЖХ.
Анализ методом ГЖХ
Детектор термоионный.
Длина колонки 1 м, внутренний диаметр 3
мм.
Неподвижная фаза - 5% SE-30 на хроматоне N-AW-DMCS.
Температура колонки 190 °C.
Температура испарителя 260 °C.
Газ-носитель - азот.
Скорость газа-носителя 22 мл/мин.
Скорость потока водорода 14 - 17 мл/мин.
Скорость потока воздуха 400 мл/мин.
-10
Рабочая шкала электрометра 2 x 10 А.
Скорость диаграммной ленты 240 мм/час.
Объем вводимой пробы 3 - 5 мкл.
Время удерживания изофенфоса
4,8 мин.
Линейный диапазон определения 0,2 - 2,5 нг.
Количественное определение проводят
методом соотношения со стандартом по высоте хроматографического
пика. Содержание пестицида в пробе (по изофенфосу)
рассчитывают по формуле:
C x V
x H x V
ст ст пр пр
X = --------------------- мг/кг,
H x V x
P
ст а
где:
C
- концентрация пестицида в стандартном растворе, вводимом
ст
в хроматограф,
мкг/мл;
V
- объем стандартного раствора,
введенного в хроматограф,
ст
мкл;
H
- высота пика
стандартного раствора, введенного
в
ст
хроматограф, мм;
H -
высота пика исследуемого раствора, мм;
пр
V -
объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;
a
V -
конечный объем анализируемого экстракта, мл;
пр
P - масса образца, взятого для анализа, г, мл.
3. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования для
работы в химических лабораториях с органическими растворителями и токсическими
веществами.