Утверждены
Минздравом СССР
4 октября 1989 г. N 4698-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ПРОМЕТА В РАСТЕНИЯХ,
ПОЧВЕ
И ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны Л.И. Бублик, Н.В.
Федоренко (УкрНИИЗР). Рекомендованы
группой экспертов.
Краткая
характеристика препарата. Действующее вещество
промета -
N-(N-бутоксикарбонил-N-метиламиносульфенил)-O-(2,3-дигидро-2,2-
диметилбензофурил-7)-N-метилкарбамат. Брутто-формула C
H N O S.
18 26 2 5
Молекулярная масса
382,5. Общепринятое название
- фуратиокарб.
Растворимость в
воде при 20 °C - 10 мг/л.
Растворим в метаноле,
изопропаноле, н-октаноле, ацетоне,
циклогексане, метиленхлориде,
толуоле,
гексане, хлороформе.
Промет - экспериментальный системный почвенный инсектицид контактного и
кишечного действия против комплекса почвообитающих
вредителей кукурузы, картофеля и других культур. Обладает нематоцидными
свойствами. Промет разлагается в растениях и почве с
образованием карбофурана.
Принцип метода. Метод основан на
извлечении промета и его метаболитов из исследуемой
пробы хлороформом, гексаном или водой, подкисленной хлороводородной кислотой до pH 3;
очистке экстракта путем перераспределения в двух несмешивающихся растворителях
и определении препарата методом хроматографии в тонком слое.
Метрологическая характеристика метода.
Минимальное детектируемое количество фуратиокарба и карбофурана 0,1 мкг. Предел обнаружения в
воде 0,0004 мг/л, почве - 0,001 мг/кг, свекле, озимой пшенице (зеленая масса),
зерне - 0,03 мг/кг, картофеле (клубни) - 0,05 мг/кг, свекле (обработанные
семена) - 0,5 мг/кг. Среднее значение определения 82 - 95%.
Избирательность метода. Метод специфичен.
Реактивы
и растворы. Ацетон
х.ч. н-Гексан ч.
Этиловый спирт ректиф.
Хлороформ х.ч. Хлороводородная кислота.
Уксусная кислота. Вода
дистиллированная. Сульфат
натрия безводный ч.д.а. Гидроксид калия х.ч.
Йодид калия х.ч. Перманганат
калия ч.д.а. п-Нитроанилин ч.д.а. Нитрит
натрия х.ч. Соли диазония:
прочный синий Б,
прочный красный Б, прочный
голубой Б (бис-диазотированный о-дианизидин). о-Толидин х.ч.
2,6-Дибром-N-хлорхинонимин.
Пластинки "Силуфол" УФ . Бумага
254
фильтровальная. Фуратиокарб 99,8-процентный. Карбофуран
99,8-процентный.
Промет
40-процентный с.п.
Стандартные растворы для
приготовления
стандартных
растворов (0,1-процентный) 0,025 г 99,8-процентных препаратов
или 0,063 г 40-процентного с.п.
растворяют в 25 мл ацетона. В мерную колбу
на 100 мл
переносят 10 мл полученного раствора и ацетоном доводят до метки.
Хранят растворы
в темных склянках с притертыми пробками в холодильнике
2 мес.
Проявляющие реагенты: 15-процентный спиртово-водный раствор
гидроксида калия
(15 г KOH растворяют
в 60 мл этанола и 40 мл воды);
0,01-процентный раствор соли диазония в ацетоне
(0,01 г соли диазония
растворяют в
100 мл ацетона).
Хранят в темной
склянке 3 сут.;
0,5-процентный раствор 2,6-дибром-N-хлорхинонимина в гексане (0,5 г
2,6-дибром-N-хлорхинонимина
растворяют в 100 мл гексана);
0,1-процентный
раствор п-нитроанилина в 0,1
н хлороводородной кислоте
(0,1 г
п-нитроанилина
растворяют в 100
мл 0,1 н раствора
хлороводородной
кислоты); 4-процентный
водный раствор нитрита натрия (4 г NaNO растворяют
2
в 100 мл
дистиллированной воды); раствор для хлорирования (смешивают равные
объемы 3-процентного
раствора перманганата калия
и хлороводородной
кислоты). Хранят
в холодильнике; 0,2 г о-толидина растворяют
в 2 мл
уксусной кислоты,
0,8 г йодида калия - в
2 мл дистиллированной воды.
Растворы
смешивают и доводят водой до 200 мл.
Приборы
и посуда. Весы
аналитические и технические.
Аппарат для
встряхивания. Вакуумный
насос. Хроматоскоп.
Электроплитка. Водяная баня.
Колбы: мерные
на 100 мл; плоскодонные на 250
мл; круглодонные на 250 мл.
Мерные цилиндры
на 50 мл. Микропипетки на 0,1 мл.
Воронки делительные на
200; 500
мл. Эксикатор. Камера
для хроматографирования.
Пульверизатор
стеклянный для обработки пластинок. Пластинки "Силуфол" УФ .
254
Ход анализа. Экстракция. В делительную
воронку помещают 250 мл воды. Экстрагируют промет и его метаболиты
хлороформом (2 раза порциями по 50 мл) или гексаном
(3 раза по 50 мл), встряхивая каждый раз по 5 мин. Растворитель сливают через
фильтр с 15 г безводного сульфата натрия в круглодонную колбу и отгоняют на
ротационном испарителе или водяной бане при температуре воды в ней 30 °C до
объема 0,2 - 0,5 мл.
Почва (чернозем). Навеску (50 г)
воздушно-сухой почвы (чернозема) растирают в фарфоровой ступке, переносят в
коническую колбу и заливают 100 мл воды, подкисленной хлороводородной
кислотой до pH 3. Встряхивают 20 мин. Экстракт
отфильтровывают через бумажный фильтр в делительную воронку и дважды проводят реэкстракцию хлороформом порциями по 50 мл или трижды гексаном порциями по 50 мл. Далее поступают так же, как и
при экстракции воды.
В коническую колбу помещают 20 г
измельченного образца сахарной или кормовой свеклы (зеленая масса, корнеплоды),
озимой пшеницы (зеленая масса, зерно урожая) и заливают 200 мл воды,
подкисленной до pH 3. Встряхивают 20 мин. Экстракт
отфильтровывают в делительную воронку. Проводят реэкстракцию,
как описано выше. Экстрагируемые примеси не мешают определению.
В коническую колбу помещают 0,2 г
обработанных семян сахарной или кормовой свеклы и заливают 20 мл хлороформа.
Встряхивают 20 мин. Экстракт переносят через воронку с бумажным фильтром с 10 г
безводного сернокислого натрия в круглодонную колбу и отгоняют хлороформ на
ротационном испарителе или на водяной бане до 0,2 - 0,5 мл. Остаток переносят
через воронку в мерную пробирку, промывают колбу хлороформом и доводят объем
экстракта до 5 мл. Аликвоту наносят капилляром (5 -
10 мкл) на пластинку.
В коническую колбу
переносят 50 г измельченного образца клубней картофеля, заливают 100 мл
хлороформа или гексана (2 x 100 мл), экстрагируют при
встряхивании 20 мин. Полученный экстракт переносят через воронку с бумажным
фильтром и 15 г безводного сернокислого натрия в круглодонную колбу, отгоняют
растворитель на водяной бане и остаток сушат досуха. Сухой остаток растворяют в 100 мл дистиллированной воды, переносят в
делительную воронку и проводят реэкстракцию дважды по
30 мл хлороформа. Дальнейшие операции проводят, как описано выше.
Хроматографирование. После
отгонки растворителя остаток
наносят
капилляром в
центр пластинки с силуфолом на расстоянии 1,5 см от
нижнего
края. Слева
и справа микрошприцем или
микропипеткой наносят стандартные
растворы промета с
содержанием 0,5 - 20 мкг. Затем
пластинку помещают в
хроматографическую камеру с подвижной фазой, которой служит
смесь н-гексана
с ацетоном
в соотношении 3:2
или хлороформ. Когда фронт растворителя
поднимается на
высоту 10 см,
пластинку вынимают и
сушат на воздухе.
Пластинку облучают УФ-светом 2
- 3 мин., после чего на белом фоне сорбента
проявляются желтые
пятна промета и
метаболитов, затем опрыскивают
проявляющим реагентом N 1, подсушивают на воздухе и опрыскивают
реагентом
N 2 (цвет
пятен малиновый) или N
3 (цвет
пятен синий) либо
смесью
реагентов N 4
и N 5 в соотношении 10:1 (цвет пятен бордовый).
Обработав
пластинку парами
хлора (реагент N 6), проветрив ее, опрыскивают реагентом
N 7. Промет и карбофуран при этом
проявляются в виде сине-фиолетовых пятен
на сером фоне.
В подвижной фазе гексан-ацетон (3:2)
для промета
R 0,65,
f
для карбофурана R 0,50.
В хлороформе R промета
0,50, а карбофурана 0,30.
f f
Обработка результатов анализа. Содержание
промета (X, мг/кг или мг/л)
определяют сравнением
площади пятен стандартов и проб и рассчитывают по
формуле:
AS
2
X = ---,
PS
1
где:
A - количество препарата в анализируемой
пробе, мкг;
P - масса анализируемой пробы, г;
S
и S -
площади пятен соответственно стандартного и
анализируемых
1
2
растворов, кв.
мм.
Требования безопасности. Необходимо
выполнять все требования безопасности работы с токсичными веществами, кислотами
и щелочами.