Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N 5031-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ АЛАНАПА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ОГУРЦАХ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны
А.А. Красных, Л.Г. Булавиной (ВНИИЗР).
Краткая
характеристика препарата. Аланап - N-(нафтил-1)-фталаминовая
кислота. Брутто
формула C H NO . Молекулярная
масса 291,3. Синоним -
18 13 3
нафталам. Химически чистое вещество представляет собой кристаллы
с т. пл.
185 °C.
Растворимость в воде 200 мг/л при 20 °C, лучше растворим в бензоле,
ацетоне,
хлороформе и других органических
растворителях. Со щелочами дает
хорошо
растворимые соли. Растворимость натриевой соли при 20 °C - 300 мг/л.
При pH более
9 легко гидролизуется с
расщеплением амидной связи.
Выпускается в
виде водного раствора натриевой
соли. Применяют в качестве
предвсходового гербицида
для борьбы с однолетними и двудольными сорняками
на огурцах,
дыне, картофеле и
некоторых других культурах.
Препарат
малотоксичен для теплокровных животных, ЛД для крыс 8200 мг/кг.
50
Принцип метода. Метод основан на
извлечении препарата из анализируемой пробы органическим растворителем, очистке
экстракта путем перераспределения между двумя несмешивающимися жидкостями с
последующим определением тонкослойной хроматографией.
Избирательность метода. Другие гербициды
(пирамин, базагран,
производные сульфанилмочевины) определению не мешают.
Метрологическая характеристика метода.
Диапазон определяемых концентраций 0,5 - 10 мкг аланапа
в анализируемой пробе. Нижний предел обнаружения 0,5 мкг или 0,0025 - 0,025
мг/кг (мг/л). Среднее значение определения 79,8 +/- 4,8%. Доверительный
интервал среднего (при p - 0,95 и n = 10) +/- 5,7%.
Реактивы и растворы. Хлорид аммония х.ч. Ацетон ч.д.а. и водный
раствор ацетона (1:1). н-Гексан х.ч. Сульфат натрия
безводный ч.д.а. Гидроксид натрия х.ч.
Нитрит натрия х.ч. Сульфаниловая кислота х.ч. Хлороводородная кислота х.ч. Хлороформ х.ч. Уксусная
кислота ледяная. Ортофосфорная кислота ч. Стандартный раствор аланапа в ацетоне с содержанием препарата 100 мкг/мл. Готовят
растворением 10 мкг х.ч. аланапа
в мерной колбе на 100 мл. Раствор устойчив в течение 2 мес. при хранении в
холодильнике.
Приготовление проявляющего реагента.
Раствор а: 0,24 г нитрита натрия растворяют в 100 мл 0,01 н гидроксида натрия. Раствор б: 1 г сульфаниловой кислоты растворяют при
нагревании в 100 мл 30-процентной уксусной кислоты. Использовать нужно только
прозрачный раствор. За 5 мин. до использования растворы а и б
смешивают в соотношении 1:2 по объему. Смешанный реагент со временем медленно
желтеет. Если желтый цвет не появляется через 5 мин., значит
один из реактивов разложился. Исходные растворы можно хранить в течение
1 мес.
Приготовление коагулирующего раствора.
Хлорид аммония (5 г) растворяют в 10 мл дистиллированной воды, приливают 10 мл
85-процентной ортофосфорной кислоты и доводят объем раствора до 1 л
дистиллированной водой.
Приборы и посуда. Пластинки "Силуфол". Ротационный испаритель. Шкаф вытяжной. Шкаф
сушильный. Аппарат для встряхивания. Колбы конические с притертыми пробками на
100 и 250 мл. Воронки делительные и конические. Цилиндры мерные на 10; 50 и 100
мл. Пипетки. Микропипетки. Стаканы химические. Камеры хроматографические.
Пульверизаторы стеклянные.
Хранение проб. Пробы хранят в
холодильнике не дольше 2 недель.
Ход анализа. Экстракция. Пробу
анализируемой воды (200 мл) помещают в делительную воронку, подкисляют 2 н
раствором хлороводородной кислоты до pH 1. Аланап экстрагируют тремя
порциями хлороформа по 50 мл в течение 5 мин. Экстракты объединяют, сушат над
безводным сульфатом натрия и концентрируют на ротационном испарителе до объема
0,2 - 0,3 мл при температуре воды в бане около 50 °C. Остаток удаляют в токе
воздуха.
Пробу почвы (50 г) помещают в коническую
колбу на 250 мл. Аланап экстрагируют 150 мл водного
ацетона путем встряхивания в течение 1 ч 30 мин. Экстракт отфильтровывают через
складчатый бумажный фильтр. Колбу и фильтр промывают тремя порциями водного
ацетона, объединенный экстракт подкисляют 2 н хлороводородной
кислотой до pH 1. Из водно-ацетоновой смеси препарат
экстрагируют тремя порциями хлороформа по 50 мл в течение 5 мин. Экстракты
объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и концентрируют на ротационном
испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл при температуре воды в бане около 50 °C.
Остаток удаляют в токе воздуха.
Пробу измельченных огурцов (20 г)
помещают в коническую колбу, заливают 80 мл хлороформа, препарат экстрагируют
путем энергичного встряхивания в течение 1 ч 30 мин. Экстракт отфильтровывают
через бумажный фильтр со слоем безводного сульфата натрия (8 - 10 г). Колбу и
фильтр промывают двумя порциями хлороформа по 15 мл. Хлороформный экстракт
концентрируют до объема 0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.
Очистка экстракта. Сухой остаток
растворяют в 5 мл охлажденного ацетона и приливают 50 мл охлажденной в
холодильнике коагулирующей смеси. Колбу на 50 мин. ставят в морозильную камеру
холодильника. После этого водно-ацетоновую смесь фильтруют через плотный
бумажный фильтр. Аланап экстрагируют тремя порциями
хлороформа по 40 мл. Объединенный экстракт концентрируют под вакуумом до объема
0,2 - 0,3 мл. Остаток удаляют в токе воздуха.
Хроматографирование. Сухой
остаток растворяют в небольшом
количестве
хлороформа или
ацетона (0,1 - 0,2 мл) и наносят на
пластинку "Силуфол"
на
расстоянии 2 см
от ее нижнего
края. Стенки колбы
тщательно смывают
несколькими каплями
растворителя, который наносят в центр пятна. Справа
наносят серию
стандартных растворов. После
этого пластинку помещают в
камеру для хроматографирования
с системой подвижных
растворителей
гексан-ацетон (1:1).
После подъема фронта подвижного растворителя на 10 см
хроматограмму
вынимают из камеры,
подсушивают на воздухе и помещают
на
5 мин. в
сушильный шкаф, предварительно нагретый
до 150 °C. После
охлаждения пластинку опрыскивают проявляющим реагентом. Аланап проявляется
в виде
розовых пятен. Величина
R аланапа в
данных условиях
f
хроматографирования составляет 0,62 +/- 0,03.
Обработка результатов анализа.
Количественное определение проводят путем сравнения интенсивности окраски и
площади пятен проб и стандартных растворов. Содержание препарата в
анализируемой пробе (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:
A
X = -,
P
где:
A - количество препарата, найденное на хроматограмме путем сравнения со стандартом, мкг;
P - навеска или объем анализируемой
пробы, г или мл.
Требования безопасности. Следует
соблюдать правила безопасности, принятые при работе в химических лабораториях.