Утверждены
Минздравом СССР
14 июля 1988 г. N 4656-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ БРОМОКСИНИЛА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТИТЕЛЬНОМ
МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны А.Ф. Скурьятом, Л.В. Зубкевичем (БелНИИЗР).
Краткая
характеристика препарата. Бромоксинил -
3,5-дибромо-4-
гидроксибензонитрил.
Брутто-формула C H Br NO.
Молекулярная масса 277.
7 3 2
Химически чистый бромоксинил -
белое кристаллическое вещество с
т. пл.
194 - 195 °C.
Растворимость в воде 0,13 мг/л. Растворимость в органических
растворителях (г/л):
метаноле - 90, этаноле - 70, ацетоне - 140, ксилоле -
700. Эфиры бромоксинила в биологических
средах быстро гидролизуются до
исходного
фенола. ЛД для крыс 190 мг/кг. Бромоксинил применяют в качестве
50
контактного гербицида
на зерновых культурах
для борьбы с двудольными
сорняками,
устойчивыми к 2,4-Д.
Принцип метода. Методика основана на
извлечении гербицида из анализируемой пробы, очистке экстрактов с последующим ацетилированием бромоксинила
уксусным ангидридом и количественном определении на хроматографе с ДПР.
Метрологическая характеристика метода.
Минимально детектируемое количество 0,5 нг,
линейность детектирования сохраняется до 4 нг. Предел
определения: в воде - 0,002 мг/л, почве - 0,01 мг/кг, растительном материале -
0,01 мг/кг. Среднее значение определения стандартных добавок гербицида (%): в воде - 94 +/- 2,3, почве - 82 +/- 2,8, растительном
материале - 74 +/- 5,8. Доверительный интервал среднего (p = 0,95, n = 15): в
воде - +/- 2,4%, почве - +/- 2,6, растительном материале - +/- 4,8%.
Избирательность метода. Определению не
мешают другие пестициды, применяемые при интенсивных технологиях возделывания
зерновых культур.
Реактивы и растворы. Серная кислота х.ч., 10-процентный раствор. н-Гексан х.ч.
Гидроксид натрия х.ч., 0,1 и 0,01 н раствор. Ацетон
ч. Сульфат натрия безводный х.ч. Хлороформ
медицинский. Оксид алюминия нейтральный, L 5/40 мю. Хемапол.
Уксусный ангидрид х.ч. Азот газообразный особой
чистоты. Стандартный раствор бромоксинила
(99,8-процентной чистоты) в ацетоне с содержанием 5 мкг/мл (хранят в холодильнике
не дольше 2 недель).
Приборы и посуда. Хроматограф
"Цвет-164" с ДЭЗ. Микроизмельчитель тканей.
Ротационный испаритель. Центрифуга. Воронки делительные. Колбы остродонные на 50 мл. Колбы на 200 мл. Пипетки на 0,1 и 1,0
мл. Воронки химические. Пробирки КШ 14/23. Встряхиватель.
Микрошприц на 10 мкл.
Водоструйный насос. Стеклянные бюксы. Колонки для хроматографии стеклянные
высотой 20 см с внутренним диаметром 2 см.
Подготовка к определению. Экстракция и
очистка экстрактов. Анализируемую пробу воды (100 мл) в делительной воронке
подкисляют 10-процентным раствором серной кислоты до pH
1 - 2 и экстрагируют хлороформом трижды порциями по 50 мл. Объединенные и
осушенные безводным сульфатом натрия экстракты упаривают почти досуха на
ротационном испарителе при температуре не выше 40 °C. Остаток хлороформа
удаляют током воздуха.
Пробу воздушно-сухой почвы (10 г)
гомогенизируют в микроизмельчителе тканей с 50 мл
0,01 н NaOH в течение 2 мин. при скорости 5000 об./мин. Затем к суспензии добавляют
10 - 15 мл насыщенного раствора NaCl и центрифугируют
10 мин. со скоростью 4000 об./мин. Жидкость фильтруют в делительную воронку, а
почву повторно гомогенизируют и центрифугируют. Объединенный водно-щелочной
экстракт подкисляют и экстрагируют этилацетатом дважды порциями по 100 мл.
Объединенные и осушенные экстракты упаривают на ротационном испарителе так же,
как пробу воды.
Анализируемую пробу растительного
материала (зеленая масса, солома, зерно) массой 10 г заливают 100 мл хлороформа
и экстрагируют на встряхивателе в течение 1 ч.
Хлороформ отфильтровывают, а пробу промывают хлороформом дважды порциями по 50
мл. Объединенные и осушенные экстракты концентрируют на испарителе до объема 1
- 2 мл и проводят очистку. Для этого хлороформный экстракт количественно
переносят в широкий бюкс. Растворитель с 10 г оксида
алюминия удаляют, помещая бюкс в термостат с температурой 50 °C. Затем сорбент
тщательно перемешивают и переносят в хроматографическую
колонку с ватным тампоном. Бромоксинил из колонки элюируют 300 мл 0,01 н NaOH под
небольшим разрежением с помощью водоструйного насоса. Скорость вытекания 60 -
70 капель в минуту. Водно-щелочный раствор подкисляют
серной кислотой до pH 1 - 2 и трижды экстрагируют
хлороформом порциями по 50 мл. Объединенные хлороформные экстракты упаривают на
ротационном испарителе.
Ход анализа. Ацетилирование
бромоксинила. Сухие остатки при
анализе проб воды, почвы и зерна, а также соломы и зеленой массы смывают 5 мл
(5 раз по 1 мл) 0,1 н раствора NaOH в пробирки,
добавляют по 0,2 мл уксусного ангидрида, раствор помещают на баню с
температурой 70 °C на 10 мин. Затем пробирки охлаждают под струей воды,
добавляют по 10 - 15 мл воды и 1 мл гексана,
закрывают пробками и энергично встряхивают в течение 1 мин. Хроматографируют
1 - 5 мкл гексанового
раствора. Стандартные растворы готовят следующим образом: в пробирки вносят
известные количества стандартных растворов бромоксинила,
ацетон удаляют током воздуха, добавляют по 5 мл 0,1 н NaOH
и далее поступают так же, как и при ацетилировании
рабочей пробы.
Условия
хроматографирования. Хроматограф "Цвет-164" с ДПР-2. Шкала
-12
электрометра 50
x 10 А. Скорость протяжки диаграммной ленты 600
мм/ч.
Хроматографическая
колонка стеклянная спиральная длиной 1,8 м с
внутренним
диаметром 3 мм,
заполненная 5% XE-60 на хроматоне N-AW-DMCS
(0,20 - 0,25
мм) или
колонка длиной 1
м с диаметром 3 мм, заполненная 5% OV-17 на
хроматоне N-супер
(0,125 - 0,160 мм). Температура (°C): термостата колонок
- 190
(XE-60) и 180 (OV-17), испарителя
- 220, детектора - 260. Скорость
потока азота
через колонку 60 мл/мин., на поддув детектора - 150 мл/мин.
Время
удерживания бромоксинила 4 мин. 45 с.
Обработка результатов анализа.
Количественное определение проводят методом соотношения со стандартом. Содержание
бромоксинила в пробе (X, мг/л, мг/кг) рассчитывают по
формуле:
C
S V
ст пр 1
X = --------,
S V P
ст 2
где:
C -
содержание гербицида в стандартном растворе, нг;
ст
S -
площадь пика пробы, кв. мм;
пр
V -
объем гексанового экстракта, мл;
1
S -
площадь пика стандартного раствора, кв. мм;
ст
V -
объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;
2
P - навеска пробы, г,
мл.
Требования безопасности. При анализе
необходимо соблюдать правила безопасности, рекомендуемые для работы с
органическими растворителями и кислотами.