Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1987 г. N 4346-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ РЕЙСЕРА В ВОДЕ, ПОЧВЕ И РАСТИТЕЛЬНЫХ
ОБЪЕКТАХ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны Н.В. Бажановой,
М.Г. Алтунян, Ж.Л. Арутюнян (АрмНИИЗР).
Краткая
характеристика препарата. Рейсер - 1-(3-трифторметилфенил)-3-
хлор-4-хлорметил-2-пирролидон.
Состоит из цис- и транс-изомеров, обладающих
различными физико-химическими свойствами.
Брутто-формула C H OF ClN.
12 10 3
Молекулярная
масса 312,12. Общепринятое название - флюорохлоридон.
Рейсер -
белое
кристаллическое вещество, т. пл.
технического препарата 61 - 73 °C;
транс-изомера - 79 - 82 °C;
цис-изомера - 50 - 55 °C. Т. кип.
212,5 °C.
Хорошо растворяется
в ацетоне, хлороформе,
толуоле. В воде при 20 °C
растворяется,
мкг: технического препарата - 28, цис-изомера -
27, транс-
изомера -
12. Транс-изомер активнее
цис-изомера в 2,5 раза. Рейсер как
довсходовый
почвенный гербицид применяется
в посевах подсолнечника,
хлопчатника, картофеля,
моркови, томата, озимой пшеницы и
садово-ягодных
насаждениях.
Уничтожает многие виды
однолетних сорняков, устойчивых к
трифлуралину, метрибузину. Рейсер
ингибирует синтез каротиноидов. При
действии
солнечного света каротиноиды защищают
хлорофилл от окисления,
поэтому у
пораженных рейсером сорняков листья обесцвечиваются.
Принцип метода. Метод основан на
извлечении рейсера из воды, почвы и растительных
образцов органическим растворителем (толуол, ацетон), очистке экстракта,
обезвоживании экстракта и последующем хроматографировании
в тонком слое стандартных пластинок "Силуфол"
в системе гексан-ацетон (75:25).
Метрологическая характеристика метода
приведена в таблице 130.
Таблица 130
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
┌─────────┬───────────┬────────────┬────────────┬───────────┬─────────────┐
│Анализи- │Предел │
Число │ Среднее
│Стандартное│Доверительный│
│руемый │определе- │параллельных│ значение
│отклонение,│интервал при │
│объект │ния, мг/кг │определений
│определения,│ % │
p = 0,95, │
│ │или мг/л │ │ %
│ │ n = 5, %
│
├─────────┼───────────┼────────────┼────────────┼───────────┼─────────────┤
│Вода │0,01 │8 │92,5 │+/- 6,1 │+/- 7,8 │
│Почва │0,05 │10 │85,0 │+/- 7,7 │+/- 9,8 │
│Картофель│0,12 │6 │87,5 │+/- 7,2 │+/- 9,2 │
│Томат │0,20 │10 │82,5 │+/- 5,1 │+/- 6,5 │
│Морковь │0,15 │6 │87,5 │+/- 4,0 │+/- 5,2 │
└─────────┴───────────┴────────────┴────────────┴───────────┴─────────────┘
Избирательность метода. Метод специфичен
и другие соединения при данных условиях хроматографирования
определению не мешают.
Реактивы и растворы. Аммиак ч.д.а. Активированный уголь любой марки. Ацетон х.ч. Вода дистиллированная. н-Гексан ч. Сульфат натрия
безводный, ч. Нитрат серебра х.ч. Толуол ч.д.а. Стандартный раствор рейсера
в толуоле или этаноле (с содержанием 200 мкг/мл препарата). Хранится в
холодильнике до 3 мес. Проявляющий реагент - аммиакат серебра (к 0,5 г нитрата
серебра прибавляют 5 мл воды, 10 - 15 мл 25-процентного водного аммиака и
доводят ацетоном до 100 мл). Органические растворители перед началом работы
высушивают (обезвоживают).
Приборы,
посуда. Аппарат для встряхивания. Баня водяная любого типа.
Весы равноплечие.
Весы аналитические. Воронки химические и делительные.
Камера хроматографическая. Камера
для опрыскивания пластинок.
Колбы:
плоскодонные конические
со шлифом вместимостью
от 25 до 250 мл; мерные
вместимостью от
25 до 100
мл. Мензурки на 25;
50 и 100 мл. Мельница
зерновая МРТ-1
или другая аналогичная.
Микропипетки для нанесения проб
и стандартных
растворов на 0,1 - 0,2
мл. Палочки стеклянные.
Микроразмельчитель
тканей. Пульверизаторы стеклянные.
Воронки Бюхнера.
Ротационный вакуумный
испаритель. Сито с отверстиями 0,5 - 1,0 мм. Ступки
фарфоровые. Сушильный
шкаф. Фильтры бумажные.
УФ-установка
с
ртутно-кварцевой
лампой. Пластинки "Силуфол" УФ .
254
Ход анализа. Экстракция препарата из
анализируемой пробы. К 100 мл анализируемой пробы воды прибавляют 25 - 30 мл
толуола и ставят на аппарат для встряхивания на 1 ч. Препарат экстрагируют
трижды толуолом по 20 мл, отделяя его от воды и проводя через безводный
сернокислый натрий. Полученные экстракты объединяют, упаривают на ротационном
испарителе досуха. Колбу споласкивают толуолом 2 - 3 раза по 0,2 - 0,3 мл и
наносят на хроматографическую пластинку.
Воздушно-сухую навеску почвы (100 г),
предварительно просеянной через сито, помещают в коническую колбу, заливают
70-процентным водным ацетоном (до покрытия пробы), оставляют на ночь или ставят
на аппарат для встряхивания на 1 ч. Пробы отфильтровывают через воронку Бюхнера, обмывая ее 2 - 3 раза 70-процентным водным
ацетоном. Объединенные экстракты переносят в делительную воронку, небольшими
порциями добавляют толуол (3 - 4 раза) и, отделив экстракты толуола, высушивают
их, пропуская через безводный сульфат натрия. Пробу выпаривают на ротационном
испарителе до 0,1 - 0,3 мл. Препарат извлекают небольшими порциями толуола и
наносят на пластинки "Силуфол". Чтобы из
почв, богатых гумусом, меньше извлекалось коэкстрактивных
веществ, пробу почвы, уже просеянную и взвешенную предварительно, выдерживают в
сушильном шкафу при температуре 70 - 80 °C в течение суток. После остывания
почву заливают водным ацетоном и продолжают анализ, как описано выше, или же
экстракты пропускают через активированный уголь.
Пробу картофеля (25 г), растертого на микроразмельчителе или терке, заливают 50 мл толуола (до
покрытия пробы) и ставят на аппарат для встряхивания на 1 - 2 ч (можно оставить
на ночь). Пробу отфильтровывают через безводный сульфат натрия, промывают 3
раза по 10 - 15 мл толуола и выпаривают на ротационном испарителе до 0,1 - 0,3
мл.
Экстракцию из томатов проводят следующим
образом. Растертые в ступке томаты (25 г) заливают 70-процентным водным
ацетоном, ставят на аппарат для встряхивания на 1 ч или оставляют на ночь.
Пробу отфильтровывают, экстракты переносят в делительную воронку и добавляют
туда толуол, промывая несколькими порциями по 15 - 20 мл. Экстракты толуола
пропускают через стеклянную воронку, в которую поочередно насыпаны: безводный
сернокислый натрий (15 г), активированный уголь (15 - 20 г) и безводный
сернокислый натрий (20 г). Полученную вытяжку выпаривают и наносят на
пластинку.
Пробу мезги моркови (10 - 20 г) заливают
толуолом и ставят на аппарат для встряхивания на 60 мин. Толуол отфильтровывают
и мезгу промывают еще 2 - 3 раза по 15 мл. Объединенные экстракты толуола также
пропускают (как и в случае с томатами) через слои безводного сернокислого
натрия с активированным углем, выпаривают досуха и наносят на хроматографическую пластинку.
Хроматографирование. Всю
пробу количественно переносят на
пластинку,
рядом наносят стандартные растворы с различным
содержанием рейсера 5; 10 и
20 мкг.
После этого пластинку помещают в
камеру для хроматографирования,
предварительно наполненную свежеприготовленным растворителем. В качестве
подвижной фазы
для рейсера мы
предлагаем гексан-ацетон (75:25). В этой
системе R рейсера равен 0,48. В
качестве альтернативной подвижной фазы
f
предлагается также система петролейный
эфир-ацетон (75:25), при которой R
f
рейсера равен 0,45. После поднятия фронта до 12 - 13 см
пластинку из камеры
снимают, высушивают
на воздухе до полного удаления запаха растворителей
подвижной фазы.
Проявление зон локализации
рейсера
на хроматограмме
производят аммиакатом
серебра с последующим УФ-облучением
(4 - 5 мин.).
Рейсер проявляется в виде темно-коричневых пятен на светлом
фоне пластинки.
При извлечении рейсера
из воды пластинку трижды опускают в подвижную фазу,
каждый раз высушивая пластинку и удлиняя фронт разгонки.
Обработка результатов анализа. Содержание
рейсера в исследуемой пробе (X, мг/кг или мг/л)
вычисляют по формуле:
A
X = -,
P
где:
A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнивании со стандартом, мкг;
P - навеска пробы, г
или мл.
Техника безопасности. Необходимо
соблюдать все общепринятые правила по технике безопасности, обычно
рекомендуемые при работе с органическими растворителями и токсичными
веществами.