Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1987 г. N 4337-87
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО УСКОРЕННОМУ ОПРЕДЕЛЕНИЮ ФЕНУРОНА, КОТОРАНА, ДИКУРАНА
В ВОДЕ И ПОЧВЕ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны Г.С. Куликовой,
В.Е. Кириченко, К.И. Пашкевичем (Отдел ТОС ИХ БНЦ УрО
АН СССР, Свердловск).
Краткая характеристика препаратов указана
в Методических указаниях N 2365-81, N 2839-83, N 3187-85, N 4710-88.
Принцип метода. Метод основан на экстракции
препаратов из анализируемых проб органическим растворителем, очистке экстракта
перераспределением и количественном определении методом ГЖХ с ДЭЗ в виде
соответствующих N-гептафторбутирильных производных
после обработки гептафтормасляным ангидридом.
Метрологическая характеристика метода.
Метрологические данные приведены в таблице 110.
Таблица 110
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ФЕНУРОНА, КОТОРАНА, ДИКУРАНА (n = 5, p = 0,95)
┌────────┬─────────────┬────────────┬──────────────┬─────────────┐
│Пестицид│Анализируемый│ Предел
│ Среднее │ Стандартное │
│ │ объект
│определения,│
значение │ отклонение, │
│ │ │мг/л, мг/кг │определения,
%│ % │
├────────┼─────────────┼────────────┼──────────────┼─────────────┤
│Фенурон │Вода
│0,004 │103 │+/- 5,6 │
│ │Почва │0,04 │83 │+/- 2,3 │
│Которан │Вода
│0,002 │98 │+/- 3,6 │
│ │Почва │0,04 │85 │+/- 1,4 │
│Дикуран │Вода
│0,006 │103 │+/- 2,1 │
│ │Почва │0,06 │92 │+/- 2,3 │
└────────┴─────────────┴────────────┴──────────────┴─────────────┘
Избирательность метода. Метод специфичен.
Другие фенилмочевины определению не мешают.
Реактивы и растворы. Хлороформ х.ч., перегнанный. Ацетон ч. Бензол х.ч.
Гептафтормасляный
ангидрид (C F CO) O ч. Сульфат
натрия безводный, ч.
3 7 2
Хлорид кальция
ч., 1-процентный в.р.
Серная кислота ч. Азот особой чистоты
или аргон ч. Хроматон N-AW-DMCS (0,16 - 0,20 мм) с 5%
XE-60. Стандартные
растворы фенурона, которана, дикурана в бензоле концентрацией 100 мкг/мл.
Стандартные
растворы фенурона, которана,
дикурана в бензоле
концентрациями
0,25; 0,50; 0,75
и 1,00 мкг/мл (готовят
из раствора концентрацией
100 мкг/мл).
Приборы и посуда. Хроматограф
"Цвет-164" или аналогичный с ДЭЗ. Колонка стеклянная размером 1 м x 3
мм. Встряхиватель любого типа. Ротационный испаритель
вакуумный любого типа. Баня глицериновая. Термометры электроконтактные
до 100 °C. Воронки: химические; делительные на 100 мл; фильтрующие. Колбы:
круглодонные на 100 мл; плоскодонные конические на 25 и 100 мл; мерные на 50
мл. Пробирки градуированные на 10 мл. Пипетки на 1; 5
и 10 мл. Микрошприцы на 10 мкл
МШ-10. Фильтры бумажные.
Ход анализа. Экстракция. Пробу воды 50 мл
помещают в делительную воронку, добавляют 1 мл концентрированной серной кислоты
и трижды экстрагируют хлороформом по 10; 5 и 5 мл. Хлороформные экстракты
осушают, пропуская через фильтрующую воронку с сантиметровым слоем безводного
сульфата натрия, собирают в круглодонной колбе, смывают сульфат натрия 2 мл
хлороформа и отгоняют растворитель на ротационном испарителе при 40 - 50 °C до
нескольких капель, которые затем выдувают в токе воздуха.
Пробу почвы 5 г помещают в плоскодонную
колбу, добавляют 10 мл экстрагента - смесь равных
объемов ацетона и 1-процентного водного раствора хлорида кальция. Колбу встряхивают
на аппарате для встряхивания 30 мин. и отфильтровывают экстракт через бумажный
фильтр. Операцию повторяют дважды и смывают колбу и
фильтр 5 мл смеси. Из объединенного экстракта на ротационном испарителе
отгоняют ацетон при 50 °C. Водный остаток переносят в делительную воронку,
добавляют 0,5 мл концентрированной серной кислоты. Колбу для отгонки
споласкивают 10 мл хлороформа, переносят его в делительную воронку и
экстрагируют гербициды хлороформом. Разделяют слои. Экстракцию хлороформом
повторяют еще 2 раза порциями по 5 мл при встряхивании в течение 2 мин.
Хлороформные экстракты осушают, пропуская через фильтрующую воронку с
сантиметровым слоем безводного сульфата натрия, который затем промывают 2 мл
хлороформа. Экстракты собирают в круглодонную колбу, отгоняют растворитель на
ротационном испарителе при 40 - 50 °C до нескольких капель, которые затем
выдувают в токе воздуха.
Получение производных для ГЖХ. В колбу для отгонки растворителя приливают 2 мл бензола, тщательно
встряхивают, прибавляют микрошприцем 20 мкл гептафтормасляного ангидрида,
переносят реакционную смесь в градуированную пробирку, закрывают притертой
пробкой и выдерживают на глицериновой бане при 50 - 60 °C в течение 15 мин.
Затем в пробирку приливают 5 мл дистиллированной воды, встряхивают 30 с, сразу
после расслоения отбирают из верхнего слоя микрошприцем
5 мкл раствора и вводят в хроматограф.
Условия
хроматографирования. Хроматограф
типа "Цвет" с ДЭЗ.
Колонка
стеклянная
длиной 1 м, диаметром 3 мм,
заполненная хроматоном N-AW-DMCS с
5% XE-60.
Температура, °C: испарителя - 200, детектора - 250, колонки - 140
или 160.
Расход газа-носителя через
колонку 45 мл/мин.,
на продувку
-11
детектора 150
мл/мин. Рабочая шкала
электрометра 2 x 10 А. Скорость
диаграммной ленты
200 мм/ч. Время
удерживания производных: фенурона -
6 мин. 4 с, которана - 4 мин.
48 с при 140 °C, дикурана - 10 мин. 26 с при
160 °C, гексанхлорбензола -
4 мин. 45 с
при 140 °C и 3
мин. 24 с при
160 °C. Линейность детектирования: для фенурона - 0,2 - 2,5 нг, которана -
0,1 - 2,5 нг, дикурана - 0,4 - 4,0 нг.
Обработка результатов анализа.
Количественное определение проводят по градуировочному
графику. Для построения градуировочного графика в
градуированные пробирки вносят по 1 мл стандартного раствора гербицидов в
бензоле, содержащего 0,25; 0,50; 0,75 и 1,00 мкг гербицида, приливают микрошприцем по 20 мкл гептафтормасляного ангидрида и проводят ацилирование
и анализ ГЖХ так, как описано выше. Строят график зависимости высоты пика от
количества гербицида, введенного в хроматограф.
Содержание гербицида в анализируемой
пробе (X, мг/л или мг/кг) рассчитывают по формуле:
AV
1
X = ----,
V P
2
где:
A - количество гербицида, найденное по градуировочному графику, нг;
V -
общий объем бензольного раствора, мл;
1
V -
объем аликвоты, взятой для хроматографирования, мкл;
2
P - масса анализируемой пробы, г или мл.