Утверждены
Минздравом СССР
22 мая 1985 г. N 3884-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИЛОРА В МЕДЕ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая
характеристика
препарата. Дилор (3а,4,7,7а-
тетрагидро-4,7-метано-2,4,5,6,7,8,8-гептахлориндан) имеет брутто-
формулу C H Cl .
Молекулярная масса 375,34.
Общепринятое
10 7
7
название - дигидрогептахлор. Кристаллическое вещество кремового
цвета со
слабым запахом, т. пл. 135 - 137 °C. Плохо растворим
в воде
(при 21 °C 0,014 мг/л), но хорошо растворяется почти во
всех
органических растворителях.
Разрешен для применения против колорадского жука на картофеле, свекловичного
долгоносика на сахарной свекле, листовой филлоксеры на виноградной лозе, а
также против других вредителей растений.
Допустимая суточная доза (ДСД) 0,02
мг/кг.
Принцип
метода. Метод основан на извлечении дилора из водного
раствора меда ацетоном с последующим
перераспределением в гексан,
упаривании экстракта,
очистке на колонке
с оксидом алюминия и
определении
хроматографией на пластинках "Силуфол" УФ .
254
Количество препарата определяют,
сравнивая интенсивность окраски и площадь пятен пробы и стандарта.
Метрологическая характеристика метода.
Диапазон определяемых концентраций 0,5 - 20 мкг пестицида в анализируемой
пробе. Предел обнаружения 0,5 мкг или 0,05 мг/кг. Среднее значение определения
стандартных количеств дилора 94,1%. Стандартное
отклонение 3,54%. Относительное стандартное отклонение 0,037. Доверительный
интервал среднего при p = 0,95 и n = 9 +/- 2,7%.
Избирательность метода. Метод специфичен.
Другие хлорорганические пестициды определению не мешают.
Реактивы и растворы. Оксид алюминия II
степени активности, просеянный сквозь сито 250 меш и задержанный на сите 100
меш. Ацетон ч.д.а. Гексан х.ч. Сульфат натрия
безводный ч.д.а. Ацетат свинца. Нитрат серебра
ч.д.а. Спирт этиловый 96-процентный. Эфир диэтиловый х.ч. Дилор х.ч.
Приборы
и посуда. Аппарат
для встряхивания АВУ-1
или
аналогичный. Баня
водяная. Весы торсионные
ВТ. Воронки
делительные. Камеры
хроматографические. Камера для опрыскивания
хроматограмм.
Колонки хроматографические
стеклянные с внутренним
диаметром 8
- 9 мм.
Пипетки на 5
мл. Пластинки для
хроматографирования
"Силуфол" УФ . Посуда химическая (колбы на
254
200 мл,
микропипетки, пипетки, цилиндры
мерные, стаканы
химические,
пробирки). Пульверизаторы стеклянные. Чашки фарфоровые
для выпаривания.
Шкаф сушильный.
Подготовка к определению. Приготовление
стандартного раствора дилора: 10 мг препарата х.ч. или 12,5 мг 80-процентного смачивающегося порошка
растворяют в 100 мл гексана. Содержание пестицида
составляет 100 мкг в 1 мл. Хранят в холодильнике в герметично закрытой посуде.
Приготовление проявляющего реагента.
0,5-процентный раствор нитрата серебра в этаноле: 0,5 г нитрата серебра
растворяют в 2 - 3 мл дистиллированной воды и доводят 96-процентным этиловым
спиртом до 100 мл. Хранят в герметично закрытой посуде в защищенном от света
месте. Пригоден для анализа в течение 1 мес.
Приготовление хроматографических
колонок. В качестве хроматографических колонок
используют пипетки на 5 мл с внутренним диаметром 8 - 9 мм. Для этого в узкой
градуированной части отрезают кусочек пипетки (отрезок 5 - 6 см), а в узкий
конец оставшейся пипетки вставляют ватный тампон и через воронку насыпают
последовательно слой безводного сульфата натрия, оксида алюминия II степени
активности и опять сульфата натрия. Высота слоя оксида алюминия - 2 см,
сульфата натрия - по 1 см. Колонку фиксируют в штативе. Готовят ее обычно перед
использованием.
Приготовление хроматографических пластинок
"Силуфол" УФ .
254
Пластинку помещают в камеру с водой, после прохождения
воды через
всю пластинку
ее вынимают и 5 - 10 мин.
выдерживают в сушильном
шкафу при
температуре 65 - 70 °C.
Пластинки могут быть
использованы непосредственно после приготовления или через 1 - 2
сут.
Ход анализа. Экстракция и очистка
экстрактов. В колбу отвешивают 10 г меда, помешивая стеклянной палочкой,
растворяют в 10 мл дистиллированной воды. Из водного раствора меда препарат
экстрагируют 30 мл ацетона, встряхивая пробу в течение 15 мин. Затем содержимое
колбы переносят в делительную воронку. После разделения слоев нижний (водный раствор
меда) сливают в колбу и повторно экстрагируют 10 - 15 мл ацетона, встряхивая
колбу 10 мин. С помощью делительной воронки отделяют ацетоновый экстракт и
объединяют его с первой порцией ацетона. Затем объединенный ацетоновый экстракт
переносят в делительную воронку, добавляют 60 мл дистиллированной воды и 15 мл гексана и встряхивают в течение 2 мин. После разделения
слоев нижний (водно-ацетоновый экстракт) сливают в чистую колбу, а верхний (гексановый) - в чистый химический стакан. Водно-ацетоновый
экстракт переносят в ту же делительную воронку и дилор
повторно экстрагируют 10 мл гексана. Гексановые экстракты объединяют в делительной воронке,
промывают 1 - 2 раза дистиллированной водой порциями по 50 мл, затем сушат 5 -
10 г безводного сульфата натрия в течение 15 - 20 мин. и отгоняют в фарфоровой
чашке при температуре водяной бани 40 - 45 °C до объема 2 - 3 мл. Полученный
концентрат (2 - 3 мл) переносят в хроматографическую
колонку, предварительно промытую 3 мл смеси гексана с
эфиром (10:1), и дилор элюируют
еще 3 мл этой же смеси. Элюат концентрируют под
вытяжкой при комнатной температуре до объема 0,4 - 0,5 мл и переносят в мерную
пробирку.
Тонкослойная хроматография. Очищенный и упаренный гексановый
экстракт с
помощью микрошприца или
микропипетки наносят на
хроматографическую
пластинку "Силуфол" УФ на расстоянии 1,5 см
254
от ее нижнего
края в одну точку. Диаметр пятна не должен превышать
5 -
6 мм. Рядом с пробой наносят известные количества дилора в
гексане (стандарты). Затем пластинку помещают в хроматографическую
камеру с гексаном. При подъеме подвижного растворителя на высоту
10 см
от линии старта
ее вынимают из камеры. После
испарения
гексана
пластинку опрыскивают 0,5-процентным раствором нитрата
серебра в
этаноле и сразу же помещают под
лампу ПРК-4 на 5 - 10
мин. в
зависимости от концентрации препарата.
Для опрыскивания
одной пластинки
требуется 2 - 3 мл проявляющего реагента.
Дилор проявляется
в виде темно-серых
пятен на белом фоне.
Величина R дилора составляет
0,45 - 0,48.
f
Обработка результатов анализа. Количество
дилора в меде (X, мг/кг) определяют путем сравнения
интенсивности окраски и площадей пятен пробы и стандартных растворов препарата
и рассчитывают по формуле:
AS
2
X = ---,
S P
1
где:
A -
содержание препарата в стандартном растворе, наносимом на
пластинку, мкг;
S -
площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;
1
S -
площадь пятна пробы, кв. мм;
2
P - масса исследуемой пробы меда, г.
Для более точного определения количества дилора в меде проводят два параллельных исследования проб.
Рядом с опытной пробой первой повторности на пластинку наносят 2 и 8 мкг дилора в гексане. При определении
содержания дилора во второй повторности пробы рядом с
ней на пластинку наносят количества препарата в гексане,
наиболее близкие к выявленному в первой повторности.
Получив результаты, проводят расчет по той же формуле.
Требования безопасности. Соблюдают
обычные правила безопасности, рекомендуемые для работы с химическими
реактивами.