Утверждены
Минздравом СССР
27 апреля 1984 г. N 3011-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДЕВРИНОЛА В ПОЧВЕ, РАСТЕНИЯХ И
ЭФИРНЫХ МАСЛАХ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ
ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны
Ю.С. Барановым, Л.А. Хилик (ВНИИЭМК).
Краткая
характеристика препарата. Действующее
начало девринола
-
альфа(нафтил-1-окси)пропионовой кислоты
диэтиламид. Брутто-формула
C H NO
. Молекулярная масса 271,4.
Общепринятое название - напропамид,
17 21 2
торговое
название - дэпра.
В чистом виде розовый кристаллический порошок с
т. пл. 69 °C.
Растворимость в воде 70 мг/л при 20 °C, хорошо растворяется в
-3
ацетоне,
этаноле, хлороформе. Давление
насыщенного пара 1,2 x 10
-
-4
5,3 x 10 Па. Выпускается в виде смачивающегося
порошка.
Принцип метода. Метод основан на
извлечении девринола из растений, почвы ацетоном,
очистке экстрактов - перераспределением в системе двух несмешивающихся
жидкостей, дополнительной очистке растительных экстрактов на колонке с оксидом
алюминия и газохроматографическом определении с помощью ТИД. Из эфирных масел препарат
извлекают диметилсульфоксидом, промывают н-гексаном и определяют газожидкостной хроматографией.
Метрологическая характеристика метода.
Минимально детектируемое количество 1,0 нг. Остальные
параметры приведены в таблице 67.
Таблица 67
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ
ДЕВРИНОЛА
┌────────────────────────────────────────┬────────────────────────────────┐
│ Параметры │ Анализируемый объект │
│ ├────────┬──────────────┬────────┤
│ │
почва │эфиромасличные│эфирные │
│ │ │ растения
│ масла │
│ │ │ │ │
├────────────────────────────────────────┼────────┼──────────────┼────────┤
│Нижний
предел определения, мг/кг │0,02 │0,04 │0,2 │
│Среднее
значение определения, % │88,8 │88,7 │83,8 │
│Относительное
стандартное отклонение │5,3 │3,8 │5,0 │
│Доверительный
интервал среднего │+/- 14,7│+/-
10,6 │+/- 13,8│
│(p
= 0,95, n = 5), % │ │ │ │
└────────────────────────────────────────┴────────┴──────────────┴────────┘
Избирательность метода. Метод селективен. Прочие пестициды,
используемые на плантациях лаванды и мяты, определению не мешают.
Реактивы и растворы. Диметилсульфоксид
х.ч. Ацетон особой чистоты. н-Гексан ч., свежеперегнанный. Ацетонитрил ч. Оксид алюминия для хроматографии, ч., II
степени активности. Сульфат натрия безводный х.ч. Диэтиловый эфир (для наркоза). Хроматон
N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм) с 5% XE-60. Хроматон
N-AW-DMCS (0,20 - 0,25 мм) с 5% SE-30.
Стандартные растворы девринола
в ацетоне с содержанием 100 (раствор N 1), 10 мкг/мл (раствор N 2). Растворы
стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 мес.
Приборы и посуда. Хроматограф с ТИД.
Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель. Делительные воронки
на 250 и 500 мл. Колбы: плоскодонные, конические на 250 мл; круглодонные на 100
мл; мерные на 100 мл. Цилиндры мерные на 100 мл. Микрошприцы
на 1 и 10 мкл. Пипетки на 1 и 10 мл. Колонки для
хроматографии размером 100 x 15 мм.
Подготовка к определению. Органические
растворители (ацетон, н-гексан) перед началом работы
необходимо перегнать, сульфат натрия прокалить при температуре 300 - 400 °C. Хроматографическую колонку и детектор кондиционируют в
режимных условиях в течение 2 ч.
Отбор проб. Для анализа отбирают среднюю
пробу почвы массой 100 г, растений эфиромасличных культур - 50 г, эфирного
масла - 10 г.
Ход анализа. Экстракция. Пробу
измельченной и просеянной через сито почвы (100 г) помещают в плоскодонную
колбу на 250 мл, заливают 150 мл ацетона и экстрагируют в течение 1 ч с помощью
механического встряхивателя, оставляют на ночь.
Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в плоскодонную колбу на 250 мл.
Остаток на фильтрате дважды промывают ацетоном порциями по 30 мл. Фильтрат упаривают
на ротационном вакуумном испарителе при температуре водяной бани 50 °C до
объема 10 мл. Остаток количественно переносят в делительную воронку на 500 мл,
прибавляют 200 мл дистиллированной воды и реэкстрагируют
девринол н-гексаном трижды
порциями по 30 мл. Объединенный гексановый экстракт
сушат, пропуская через 35 г безводного сульфата натрия, и концентрируют на
ротационном испарителе досуха. К сухому остатку по стенкам колбы прибавляют 1
мл ацетона, закрывают и вращают колбу. В испаритель хроматографа вводят 2 мкл раствора.
Свежесрезанные эфиромасличные растения
(массой 50 г) гомогенизируют со 150 мл ацетона в течение 15 - 20 мин. со
скоростью 8000 об./мин.,
встряхивают 30 - 40 мин. Экстракты фильтруют через бумажный фильтр в колбу
вместимостью 250 мл. Стакан гомогенизатора трижды промывают ацетоном порциями
по 20 мл и через фильтр присоединяют смыв к основному фильтрату. Упаривают
ацетон на ротационном вакуумном испарителе до 10 мл при температуре бани 50 °C.
Остаток количественно с 50 мл ацетонитрила переносят
в делительную воронку на 250 мл с 50 мл н-гексана.
Встряхивают 1 - 2 мин. и отделяют верхний слой. Операцию проводят еще дважды.
Нижний слой переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл с 250 мл
10-процентного сульфата натрия и трижды реэкстрагируют
девринол н-гексаном
порциями по 50 мл. Собирают верхний слой, объединяют, высушивают, пропуская
через безводный сульфат натрия, и упаривают до 5 мл на ротационном испарителе.
Остаток переносят на колонку с 6 г оксида алюминия, промытую 12 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1). После того как раствор полностью
впитается в слой сорбента, отгонную колбу смывают 5 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1) и переносят на колонку. Операцию
повторяют 3 раза. Девринол элюируют
100 мл смеси н-гексана с ацетоном (9:1). Элюат упаривают на ротационном испарителе досуха. Остаток
растворяют в 1 мл ацетона и 2 мкл вводят в испаритель
хроматографа.
Навеску эфирного масла мяты, лаванды,
шалфея (10 г) помещают в делительную воронку на 250 мл с 50 мл диметилсульфоксида и выдерживают 20 мин. для растворения.
Прибавляют 50 мл н-гексана, встряхивают 2 мин. и
отделяют верхний слой. Операцию повторяют еще дважды. Оставшийся раствор
переносят в делительную воронку вместимостью 500 мл с 200 мл 10-процентного
сульфата натрия, предварительно насыщенного 15 мл серного эфира, и реэкстрагируют девринол серным
эфиром трижды порциями по 30 мл. Объединенные экстракты собирают, сушат,
пропуская через безводный сульфат натрия, и концентрируют досуха на ротационном
испарителе при температуре водяной бани 30 °C. К сухому остатку прибавляют 1 мл
ацетона, встряхивают и 2 мкл вводят в испаритель
хроматографа.
Условия
хроматографирования. Используют стеклянные
колонки спиральной
формы длиной
1 м с внутренним
диаметром 3 мм.
Расход газа-носителя
40 мл/мин.;
водорода - 16; воздуха -
400 мл/мин. Температура
(°C):
испарителя -
230, термостата колонок - 190. Хроматографируемый
объем 2 мкл.
Линейный динамический
диапазон 1 - 1000 нг. Рабочая
шкала электрометра
-12
100 x 10 А.
Время удерживания девринола на SE-30 8 мин., на XE-60 -
11 мин.
Обработка результатов анализа. Содержание
препарата в анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:
HV
1
X = ----,
KV P
2
где:
H - высота пика препарата и анализируемой
пробе, мм;
V -
объем анализируемой пробы, мл;
1
V -
объем инъектируемой пробы, мкл;
2
P - масса навески, г;
K - калибровочный коэффициент, определяемый
по формуле:
H H H
1 1
2 n
K = - (--- + --- + ... +
---),
n CV
CV
CV
1 2
n
где:
H , H , H
- высоты пиков стандартного раствора девринола,
мм;
1
2 n
V , V , V
- объемы стандартного
раствора девринола, вводимые
в
1
2 n
хроматограф, мкл;
C - концентрация стандартного раствора (10
мкг/мл).
Содержание микроколичеств
девринола в пробах вычисляют как среднее из трех
параллельных определений.
Требования безопасности. Следует
руководствоваться правилами безопасности при работе с соединениями третьего
класса опасности (девринол), а также с легколетучими
растворителями.