Утверждены
Минздравом СССР
12 мая 1983 г. N 2807-83
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДЕФОЛИАНТА ДРОППА В ВОЛОКНАХ, ЛИСТЬЯХ
И ПОЧВЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны Ш. Сирожиддиновым, С. Мусамухамедовым
(ТашМИ).
Краткая
характеристика пестицида. Дропп -
N-(1,2,3-тиадиазолил-5)-
N'-фенилмочевина.
Брутто-формула C H ON S. Молекулярная масса
212,1.
9 8 4
Общепринятое
название - тидиазурон. ДСД 0,006 мг/кг.
Содержание в семенах
хлопчатника, хлопковом
масле
не допускается. Препарат - светло-желтый
порошок со
слабым специфическим запахом. Т.
пл. 213 °C. Растворимость в
воде до
20, ацетоне - 8000, метаноле - 4500 мг/л при 20
°C. Препарат
применяется в
качестве дефолианта в хлопководстве.
Принцип метода. Метод основан на
извлечении дроппа из исследуемой пробы органическим
растворителем и хроматографировании в тонком слое
силикагеля с последующей термической обработкой. Препарат проявляется в виде
светло-коричневых пятен на белом фоне. Метрологическая характеристика метода
приведена в таблице 125.
Таблица 125
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
┌─────────────────────────────────────┬───────────────────────────────────┐
│ Параметры │ Анализируемая проба │
│ ├────────┬────────┬────────┬────────┤
│ │
почва │ листья │волокна │
семена │
├─────────────────────────────────────┼────────┼────────┼────────┼────────┤
│Предел
определения, мг/кг │0,025 │0,05 │0,1 │0,05 │
│Число
параллельных определений │8 │10 │9 │8 │
│Среднее
значение определения, % │87 │88,7 │90,2 │87,3 │
│Стандартное
отклонение, % │+/- 6,82│+/-
8,93│+/- 3,86│+/- 5,66│
│Доверительный
интервал среднего, % │+/- 8,13│+/-
9,87│+/- 4,12│+/- 6,08│
└─────────────────────────────────────┴────────┴────────┴────────┴────────┘
Избирательность метода. Метод избирателен
для дроппа, присутствие пестицидов, близких по
химическому строению, определению не мешает.
Реактивы и растворы. Дропп х.ч.
Ацетон ч. Гексан х.ч.
Хлороформ ч. Концентрированная серная кислота х.ч.
Едкий натр х.ч. Сульфат натрия безводный ч.д.а. Оксид алюминия дли хроматографии II степени
активности. Едкий натр, 50-процентный раствор. Стандартный раствор А (навеску 10 мг химически чистого дроппа
растворяют в мерной колбе в 100 мл ацетона; в 1 мл данного раствора содержится
0,1 мг препарата). Стандартный раствор Б (раствор А
разводят ацетоном в 100 раз).
Приборы и посуда. Хроматографическая
камера. Ротационный вакуумный испаритель. Сушильный шкаф. Аппарат для
встряхивания. Колонки для адсорбционной хроматографии (300 x 15 мм). Фильтры
бумажные. Бумага универсальная индикаторная. Денситометр "БИАН-170".
Пластинки "Силуфол" размером 150 x 150 мм.
Колбы: конические на 50 и 250 мл; мерные на 50 и 100 мл. Пипетки на 0,1; 1 и 10
мл. Микрошприцы на 10 и 100 мкл.
Пробирки центрифужные на 10 мл. Делительная воронка
на 250 мл. Стаканы химические.
Приготовление хроматографической
колонки. В хромагографическую колонку помещают ватный
тампон, последовательно 3 г сульфата натрия, 5 г оксида алюминия, сверху снова
3 г безводного сульфата натрия.
Ход анализа. Экстракция. Пробу
измельченных листьев хлопчатника (20 г) помещают в коническую колбу на 250 мл и
заливают 7,5 мл концентрированной серной кислоты. Осторожно взбалтывают в
течение 10 - 15 мин. и оставляют на 10 - 12 ч. После выдержки в колбу по стенке
наливают 50 мл дистиллированной воды, затем при помощи 50-процентного раствора
едкого натра доводят pH до 8 (по индикаторной
бумаге). Все содержимое колбы переносят в делительную воронку
и препарат трижды экстрагируют гексаном по 15 мин.
путем встряхивания порциями по 30 мл. Экстракты объединяют, сушат над безводным
сернокислым натрием (5 - 7 г) и фильтруют через бумажный фильтр. Затем экстракт
упаривают на водяной бане до объема 2 - 3 мл.
Пробу хлопкового волокна (10 г) заливают
50 мл ацетона на 2 ч. Встряхивают в течение 10 мин. Фильтруют и еще 2 раза
экстрагируют препарат ацетоном по 20 мл. Фильтраты объединяют в колбу и
упаривают растворитель до объема 2 - 3 мл.
Пробу почвы (40 г) 20-процентной
влажности заливают на 10 - 12 ч 50 мл хлороформа. Далее встряхивают в течение
30 мин. и отфильтровывают растворитель. Экстракцию повторяют трижды.
Объединенные экстракты сушат безводным сернокислым натрием (5 - 7 г).
Растворитель упаривают до объема 2 - 3 мл.
Примечание. Если экстракты недостаточно
чистые, то проводят дополнительную очистку экстракта путем пропускания его
через хроматографическую колонку. Сначала колонку
дважды промывают по 25 мл хлороформа, элюат
отбрасывают. После этого экстракт вносят и колонку и
препарат элюируют 50 мл гексана.
Элюат собирают в колбу, упаривают до объема 2 - 3 мл.
Хроматографирование. Все экстракты исследуемой
пробы (листья, волокна,
почва) объемом
2 - 3
мл количественно переносят в
конические пробирки
растворителем-экстрагентом. Растворитель упаривают до объема 0,1 - 0,2 мл
и
оставшиеся экстракты
количественно переносят на пластинку. Параллельно,
рядом с пробами, микрошприцем
или пипеткой наносят стандартный раствор Б с
содержанием препарата
1; 3; 5 и
10 мкг. Пластинку
помещают в
хроматографическую
камеру, в которую заранее, за 30
мин., налита смесь
растворителей гексан-ацетон (3:2). После
поднятия фронта растворителей на
10 -
12 см пластинку
вынимают из камеры и высушивают на воздухе. Затем
пластинку помещают
в сушильный шкаф,
нагретый до 200
+/- 5 °C, на
5 - 7 мин.
Препарат проявляется в виде
светло-коричневых пятен. Величина
R 0,33 +/- 0,02 на белом фоне.
f
Обработка результатов анализа.
Количественно дропп в анализируемой пробе определяют
путем денситометрирования пятен проб и стандартов на
денситометре "БИАН-170" или же путем визуального сравнения
интенсивности окрашивания и площадей пятен проб и стандартов. При денситометрировании содержание препарата (X, мг/кг) рассчитывают
по формуле:
A
X = -,
P
где:
A - количество препарата, найденное путем
денситометрирования, мкг;
P - масса пробы, г.
При визуальной оценке концентрацию дроппа (X, мг/кг) вычисляют по формуле:
AV
X = ---,
V P
1
где:
A
- количество вещества, найденное в анализируемом объеме
экстракта,
мкг;
V - объем экстракта, взятый для анализа,
мл;
V -
объем экстракта всей пробы, мл;
1
P - масса пробы почвы, листьев, волокон и
семян, г.
Требования безопасности. Соблюдаются
общие правила по технике безопасности, необходимые при работе с пестицидами и
химическими реактивами.