Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
6 августа 1981 г. N 2420-81
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ РОЗАЛИНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при
МСХ.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
Cl
\ // \ ___NH М.м. 166,5.
│
││ │
\\ / \ //\
N CH
3
Розалин (действующее начало -
5-хлор-2-метилбензимидазол) - порошок светло-желтого цвета, Т. пл. 204 - 206
°С. Хорошо растворяется в спирте, ацетоне; плохо в воде, хлороформе, бензоле.
Применяется в виде 50-процентного смачивающего порошка. Агрегатное состояние в
воздухе - пары + аэрозоль.
I. Характеристика
метода
1. Определение основано на хроматографировании розалина в
тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зоны локализации розалина: 1) путем обработки смесью растворов бромфенолового синего и азотнокислого серебра (с
обесцвечиванием фона раствором лимонной кислоты); 2) с помощью паров йода и
измерения оптической плотности растворов розалина при
длине волны 246 нм.
2. Отбор проб проводится с
концентрированием (силикагель).
3. Предел измерения в анализируемом объеме
пробы - 1 мкг.
4. Предел измерения в воздухе - 0,25
мг/куб. м (при отборе 4 литров воздуха).
5. Диапазон измеряемых концентраций -
0,25 - 5,0 мг/куб. м.
6. Определению не мешают ГХЦГ, ДДТ, антио, рогор.
7. Граница суммарной погрешности
измерения - +/- 17,2%.
8. Ориентировочно безопасный уровень
воздействия розалина - 0,5 мг/куб. м (расчетный).
II. Реактивы,
растворы, материалы
Розалин, х.ч.
Ацетон, ч.д.а.,
ГОСТ 2603-79.
Бензол, х.ч.,
ГОСТ 5955-75.
Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
Спирт этиловый 96-процентный, ТУ
6-09-17-10-77.
Бромфеноловый синий, ч.д.а., ТУ
6-09-1058-76.
Серебро азотнокислое, х.ч.,
ГОСТ 1277-75.
Лимонная кислота, х.ч.,
ГОСТ 3652-69, 2-процентный раствор.
Йод, ч., ГОСТ 4159-79.
Вата обезжиренная.
Силикагель марки АСМ.
Подвижная фаза: 1) бензол - ацетон (1:1);
2) этанол - гексан (1:1).
Проявляющий реактив N 1: 0,05 г бромфенолового синего растворить в 10 мл ацетона и
полученный раствор разбавить до объема 100 мл 0,5-процентным водно-ацетоновым
(1 ч. воды и 3 ч. ацетона) раствором азотнокислого серебра. Реактив хранится
длительное время.
Проявляющий реактив N 2: пары йода (10 г
йода насыпают в чашку Петри, слегка увлажняют и чашку помещают в эксикатор).
Стандартный раствор розалина
в ацетоне концентрации 100 мкг/мл: готовят растворением 10 мг розалина, х.ч., в ацетоне в
мерной колбе на 100 мл. Раствор устойчив в течение 2-х месяцев при хранении на
холоде.
III. Приборы и
посуда
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
Гофрированные трубки стеклянные с рабочей
длиной 55 мм (для наполнения их силикагелем).
Посуда стеклянная химическая, ГОСТ
1770-74.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1, 2, 5, 10
мл.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74.
Туберкулиновые шприцы.
Баня водяная.
Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-75.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.
Пластинки для хроматографии "Силуфол" (ЧССР) размером 150 х 160 мм.
Спектрофотометр.
IV. Условия отбора
проб воздуха
Исследуемый воздух со скоростью 1 л/мин. аспирируют через гофрированную трубку с силикагелем. Для определения
1/2 ПДК достаточно отобрать 4 л воздуха.
V. Условия анализа
Гофрированные трубки с силикагелем
промывают ацетоном (20 - 30 мл) против потока поглощения, экстракт упаривают на
водяной бане до небольшого объема 0,2 - 0,3 мл, остаток удаляют на воздухе.
Содержимое колбы после упаривания
растворяют в 0,3 - 0,5 мл ацетона.
Последующую обработку пробы и
количественное определение можно проводить двумя способами:
А. Пробу при помощи туберкулинового
шприца количественно наносят на хроматографическую
пластинку так, чтобы размер пятна не превышал 0,5 см (по диаметру). Колбу
дважды промывают небольшими порциями (0,3 мл), которые также наносят в ту же
точку. Справа и слева параллельно наносят стандартный раствор розалина, содержащий 1, 5, 10, 20 мкг препарата.
Пластинку
помещают в камеру
для хроматографирования, в
которую
предварительно за
30 мин. налита
система растворителей бензол - ацетон
(1:1). Край
пластинки погружают в
растворитель не более чем на 0,5 см,
после поднятия
растворителя на высоту 10 см пластинку вынимают из камеры,
оставляют на
воздухе до полного испарения
растворителей. Затем пластинку
опрыскивают
проявляющим реактивом N 1. После того, как пластинка подсохнет,
пластинку обрабатывают
2-процентным раствором лимонной кислоты. На желтом
фоне проявляется синее пятно розалина
с R = 0,56 +/- 0,05.
f
Количественное определение содержания розалина в анализируемой пробе проводится визуально по
интенсивности окрашивания пятен на хроматограмме и
путем измерения площади пятен стандартных растворов и проб.
Б.
Содержимое колбы после
отгонки растворителя растворяют в
0,2 мл
ацетона. Пластинку
делят по длине на три параллельные полосы. На первую и
вторую полосы наносят в виде сплошной линии
ацетоновый раствор экстрактов.
Стенки колбы
ополаскивают небольшими порциями
ацетона (0,2 - 0,3 мл),
наносят туда
же. На третью полосу наносят стандартный раствор розалина.
Пластинку помещают
в камеру, куда за 20 - 30 мин. до
хроматографирования
налита смесь
растворителей этанол - гексан (1:1). Когда фронт
растворителей
достигает высоты
10 см, пластинку
вынимают из камеры и после
удаления
следов растворителя
первую и вторую полосы закрывают стеклом, и пластинку
помещают в
йодную камеру на 5 - 10 мин. Розалин обнаруживают на
третьей
полосе по
темно-коричневому пятну на желтом фоне с
R = 0,60 +/- 0,07. По
f
проявленной зоне
отмечают участки силикагеля на первой и второй полосах и
снимают участки
с розалином в
колбу емкостью 100 мл. Элюируют
10% мл
этилового спирта встряхиванием в течение 30 мин.
Соответственно элюируют и
зону чистого
силикагеля и измеряют оптическую плотность элюата при
246 нм.
Для количественного определения строят
калибровочный график по стандартам розалина
(приготовленным в ряде мерных колб) с концентрацией 1, 2, 5, 10, 15, 20 мкг/мл.
Затем измеряют оптическую плотность растворов при 246 нм
и строят калибровочный график Д = f(с), где с -
концентрация розалина. Количество розалина
определяют либо по калибровочному графику, либо сравнением оптических
плотностей стандартного и анализируемого раствора.
Концентрацию розалина
в воздухе (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:
G х V
1
Х = -------,
V х V
20
где:
G - количество препарата, найденное в хроматографируемом объеме
пробы,
мкг;
V -
общий объем пробы, мл;
1
V - объем пробы, взятый для хроматографирования, мл;
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям, л.
VI. Требования
безопасности
Соблюдаются общие правила по технике
безопасности, необходимые при работе с химическими реактивами и пестицидами.
VII. Разработчики
Узб. НИИ санитарии, гигиены и профзаболеваний.