Утверждаю

Председатель

Госкомиссии по химическим средствам

борьбы с вредителями, болезнями

растений и сорняками при МСХ СССР

А.А.КРАВЦОВ

11 октября 1979 года

 

ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ

ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ

И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

 

Настоящие Методические указания распространяются на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, воде, почве, кормах, биологическом материале, воздухе.

Указания устанавливают единые требования к построению, содержанию, изложению нормативных документов (аттестатов, технических условий, методических указаний) на методики определения содержания пестицидов в продуктах питания, кормах и объектах внешней среды, требования к приборам, реактивам, подготовке и проведению определения, обработке результатов, метрологическому обеспечению.

 

1. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ

 

1.1. Нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей природной среды должны соответствовать требованиям НТД и требованиям к методикам определения остаточных количеств пестицидов, утвержденных специалистами стран - членов СЭВ.

1.2. Нормативные документы должны разрабатываться на методики определения содержания пестицидов, включенных в список пестицидов, разрешенных к применению в СССР, а также пестицидов, рекомендованных к государственным производственным испытаниям и опытно-производственному применению.

1.3. В нормативные документы должны включаться современные физико-химические методы, включающие фотометрию, хроматографию и др., проверенные в экспериментальных и производственных условиях, имеющих метрологическое обеспечение.

1.4. В нормативных документах следует предусматривать приборы, прошедшие государственные испытания, внесенные в Государственный реестр и выпускаемые серийно, а также приборы, требования к которым установлены в государственных стандартах и нормативно-технической документации (НТД).

1.5. В нормативных документах целесообразно предусматривать приборы с регистрацией показаний в форме, пригодной для статистической обработки, в том числе с выходом на вычислительные устройства.

1.6. В нормативные документы на методики определения содержания пестицидов в пищевых продуктах, кормах и объектах окружающей среды необходимо включать аналогичные по точности дублирующие методики для повышения достоверности идентификации и для обеспечения возможности использования имеющихся в обращении приборов.

1.7. В нормативные документы должны включаться требования по обеспечению безопасности труда и производственной санитарии.

1.8. Срок действия нормативных документов - 5 лет, срок действия временных нормативных документов устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

 

2. ЕДИНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К МЕТОДИКАМ

 

2.1. Нормативный документ должен содержать вводную часть и разделы: методика (или методики) определения со следующими разделами: основные положения; реактивы и материалы; приборы, аппаратура, посуда; отбор пробы; подготовка к определению; проведение определения; обработка результатов; требования безопасности; авторы.

2.2. В заглавии нормативного документа должны найти отражение наименование пестицида, объекты анализа и принцип метода определения. Например: "Методические указания по определению хлорорганических пестицидов в почве хроматографическим методом".

2.3. Вводная часть нормативного документа должна отражать назначение и область применения методики (или методик) и излагаться в следующей формулировке: "Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций, научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других Министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде".

2.3.1. Вводная часть должна содержать характеристику действующего вещества или действующих веществ;

название по номенклатуре СЭВ, ИСО и по государственному стандарту СССР;

химическое название;

структурную формулу, эмпирическую формулу, молекулярную массу;

синонимы или торговые названия;

физические и химические свойства - цвет, запах, точка кипения, упругость паров, стабильность, растворимость в воде (г/100 мл) и основных органических растворителях, коэффициенты распределения (если они известны);

    токсикологическую   характеристику:   острую  токсичность  действующего

вещества для крыс (ЛД   через рот);

                     50

допустимые остаточные количества и ПДК, утвержденные МЗ СССР;

особые токсикологические свойства (возможность образования метаболитов с большей токсичностью и их характеристика);

область применения пестицида;

группу пестицида и культуры (например, послевсходовый гербицид на посевах картофеля).

2.3.2. Первый раздел нормативного документа должен называться "Методика определения (название пестицида)... (объект)... методом". Например, "Методика определения ДДТ в почве методом газожидкостной хроматографии", "Методика определения ДДТ в почве методом тонкослойной хроматографии", "Методика определения ДДТ в почве фотометрическим методом".

2.3.3. Подраздел "Основные положения" должен отражать:

- Принцип, на котором основана методика, с указанием основных параметров определения и возможности определения основных токсических метаболитов. Например: "Методика основана на хроматографировании ДДТ и его метаболитов ДДД и ДДЕ в тонком слое силикагеля в системе гексан - ацетон после экстракции из увлажненной почвы смесью растворителей н-гексан - ацетон и очистки экстракта концентрированной серной кислотой";

"Методика основана на газохроматографическом определении ДДТ и его метаболитов ДДД и ДДЕ с детектором постоянной скорости рекомбинации на неподвижной фазе Е-30 после экстракции смесью н-гексан - ацетон и очистки экстракта на колонке с силикагелем";

"Методика основана на измерении оптической плотности раствора, содержащего продукт нитрования ДДТ, при длине волны ... нм. ДДД и ДДЕ-метаболиты ДДТ не определяются".

Если действующее начало определяется в сумме с его токсическими метаболитами, следует их перечислить.

- Метрологическую характеристику метода.

Диапазон определяемых концентраций.

Предел обнаружения в мкг.

Предел обнаружения в мг/кг, мг/л или мг/м, пределы обнаружения, кроме оговоренных специально случаев, не должны превышать ДОК или ПДК.

    Среднее  значение  определения стандартных количеств пестицидов в пробе

 _

(с) в %.

Для установления процента определения на различных культурах следует проводить анализ типичных представителей (таблица), а в случае узкой области применения пестицида на тех культурах, для которых предназначен пестицид. Число параллельных определений (n) - не менее 5.

 

Таблица

 

ТИПИЧНЫЕ ПРЕДСТАВИТЕЛИ АНАЛИЗИРУЕМЫХ СУБСТРАТОВ

 

┌───────────────────────────┬────────────────────────────────────┐

│        Субстраты          │       Типичные представители       │

├───────────────────────────┼────────────────────────────────────┤

│1. Вода                    │Питьевая и открытых водоемов        │

│2. Почва                   │Суглинистая с малым и большим содер-│

│                           │жанием гумуса                       │

│3. Воздух                  │Рабочей зоны и атмосферный          │

│4. Продукты животного      │Мышечная ткань (мясо), жир, печень, │

│происхождения              │яйца, молоко                        │

│5. Полевые культуры:       │                                    │

│  - зерновые               │Пшеница, рожь, кукуруза, ячмень     │

│  - бобовые                │Горох, соя                          │

│  - масличные              │Подсолнечник, хлопчатник            │

│  - технические прядильные │Хлопок, лен                         │

│  - технические            │Сахарная свекла                     │

│  - кормовые               │Многолетние злаковые травы, люцерна,│

│                           │кукуруза                            │

│6. Картофель               │Картофель                           │

│7. Корнеплоды              │Морковь, свекла                     │

│8. Многолетние плодовые    │                                    │

│культуры:                  │                                    │

│  - семечковые             │Яблоня, груша                       │

│  - косточковые            │Олива, вишня, абрикос               │

│  - цитрусовые             │Мандарины, лимоны                   │

│9. Виноград                │Виноград                            │

│10. Ягодники               │Черная и красная смородина, малина, │

│                           │клубника                            │

│11. Овощные культуры:      │                                    │

│  - огурцы                 │Огурцы                              │

│  - помидоры               │Помидоры                            │

│  - капуста                │Белокочанная капуста                │

│  - зеленные               │Укроп, петрушка, сельдерей, салат,  │

│                           │шпинат                              │

│14. Овощи закрытого грунта │Помидоры, огурцы, зеленные культуры │

│15. Бахчевые культуры      │Арбуз, дыня, тыква                  │

│16. Специальные культуры   │Определяются согласно области при-  │

│                           │менения препаратов                  │

└───────────────────────────┴────────────────────────────────────┘

 

Стандартное отклонение S.

Относительное стандартное отклонение ДЕЛЬТА S.

Доверительный интервал среднего при р = 0,95 и n = 5. Среднее значение определения стандартных количеств и доверительный интервал среднего проводится для трех концентраций:

равной ДОК;

равной удвоенному пределу обнаружения;

равной половине ДОК (ПДК), если она выше предела обнаружения или, если ДОК (ПДК) не установлены, на 3-х концентрациях в определенном диапазоне концентраций.

- Избирательность метода в присутствии пестицидов, близких по химическому строению и области применения.

Если имеются мешающие определению примеси, дать, по возможности, их описание и указать концентрацию, с которой начинает сказываться их влияние.

2.4. Подраздел "Реактивы и материалы" должен содержать перечень применяемых для определения остаточных количеств пестицидов реактивов и материалов с указанием степени их чистоты в соответствии с существующими на них стандартами, НТД, а также растворов с указанием сроков хранения и необходимого количества на проведение одного исследования, измерения или на какое количество исследований можно использовать приготовленные по методике объемы тех или иных растворов, в т.ч. и стандартных.

В методиках газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должен быть указан тип хроматографа, тип детектора и его селективность; материал, длина, диаметр хроматографической колонки.

В методиках по определению остатков пестицидов методом тонкослойной хроматографии должны быть указаны размер пластинок, толщина слоя, марка сорбента и его зернение.

В методиках по определению остатков пестицидов оптическими методами должны быть указаны тип прибора, тип и размеры кювет и тип катодной лампы (атомно-абсорбционная спектрофотомерия).

2.6. Подраздел "Подготовка к определению" должен содержать требования ко всем подготовительным работам, предшествующим определению остаточного количества пестицидов: приготовлению стандартных, градуировочных и других растворов с указанием сроков их хранения, очистке растворителей, приготовлению хроматографических пластинок, приготовлению насадок и кондиционированию хроматографических колонок, построению градуировочных графиков.

При использовании способов очистки растворителей, отличных от общепринятых, должно быть дано подробное их описание.

Подраздел должен содержать требования к установке и подготовке всех средств определения в соответствии со стандартами и НТД, с учетом требований безопасности.

Установление зависимости аналитического сигнала от содержания определяемого вещества, построение градуировочного графика необходимо проводить в соответствии со стандартами и НТД на приборы.

2.7. Подраздел "Отбор пробы" должен содержать требования к срокам и условиям хранения пробы и подготовке ее к анализу (гомогенизация, фильтрование и т.п.).

Отбор проб должен проводиться в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 N 2051-79.

2.8. Подраздел "Проведение определения" должен содержать конкретные подробные сведения о порядке выполнения всех операций определения содержания остаточных количеств пестицидов в отобранных пробах пищевых продуктов, кормах, воде, почве.

Подраздел должен содержать пункты:

озоление, гидролиз пробы (в случае необходимости);

экстракция и очистка экстрактов;

проведение определения.

В методиках определения микроколичеств пестицидов методом газовой хроматографии должны приводиться условия хроматографирования, а именно:

- необходимые газы и скорости их потоков (мл/мин.);

- температура термостата колонки, детектора, испарителя (°С);

- вводимые в испаритель объемы упаренных экстрактов;

- время удерживания: абсолютное и относительное (среднее из трех определений);

- способ построения градуировочного графика;

- число теоретических тарелок;

- линейный динамический диапазон детектирования;

- способ количественного определения.

В методиках определения остаточных количеств пестицидов хроматографией в тонком слое должны приводиться способы приготовления хроматографических пластинок:

- условия нанесения пробы на пластинку;

- условия хроматографирования;

- вид хроматографической камеры;

- подвижная фаза;

- способ и степень насыщения парами подвижного растворителя;

- длина пробега растворителя;

- проявляющий реактив;

- способ обработки хроматограмм (нагревание, облучение УФ-светом и т.п.);

- величина n (среднее из 5 определений);

- способ количественного определения. При использовании денситометра в разделе 2.5 приводятся его основные параметры.

При фотоколориметрическом и спектрофотометрическом определениях способ приготовления градуировочных растворов должен быть представлен в виде таблицы и указана длина волны, при которой измеряется оптическая плотность градуировочных растворов.

Например:

 

Таблица

 

┌────────────────────────────────────┬───────────────────────────┐

│Компоненты градуировочных растворов,│N градуировочных растворов │

│               их объем             ├───┬───┬───┬───┬───┬───┬───┤

│                                    │ 1 │ 2 │ 3 │ 4 │ 5 │ 6 │ 7 │

├────────────────────────────────────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┤

│Стандартный раствор ДДТ, мл         │   │0,1│0,2│0,4│0,6│0,8│1,0│

│Нитрующая смесь, мл                 │1,0│0,9│0,8│0,6│0,4│0,2│   │

├────────────────────────────────────┼───┼───┼───┼───┼───┼───┼───┤

│Содержание ДДТ, мкг/мл              │0  │10 │20 │40 │60 │80 │100│

└────────────────────────────────────┴───┴───┴───┴───┴───┴───┴───┘

 

Для повышения надежности идентификации пестицидов методика должна включать:

- альтернативные способы очистки экстракта;

- методика газохроматографического определения остаточных количеств пестицидов должна включать анализ не менее чем на двух хроматографических колонках, заполненных неподвижными фазами различной полярности;

- методика определения остаточных количеств пестицидов методом хроматографии в тонком слое должна включать, как правило, альтернативные условия хроматографирования (разные сорбенты, проявляющие реактивы, не менее двух подвижных растворителей).

2.9. Подраздел "Обработка результатов" должен содержать сведения по обработке полученных данных и формулы расчета анализа.

Содержание остатков пестицидов в анализируемой пробе вычисляют как среднее из двух-трех параллельных определений.

Результаты определения остаточных количеств пестицидов по действующему началу суммируют с результатом определения токсических метаболитов в пересчете на исходное действующее вещество.

Содержание токсических метаболитов в анализируемом субстрате определяют раздельно от исходного действующего вещества в том случае, если для них утверждены максимально допустимые уровни остаточных количеств.

2.10. Раздел нормативного документа "Требования безопасности" должен содержать специальные требования по технике безопасности при выполнении операций определения содержания остаточных количеств и соответствовать "Правилам устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР", N 2455-81 от 20.10.81.

2.11. Раздел "Разработчики" должен содержать сведения об авторе или авторских коллективах, принимавших участие в разработке методики - фамилия, И.О., место работы, город.

Если в разработке методики принимало участие несколько авторских коллективов, то приводится их нумерация в тексте методики в соответствующих разделах арабскими цифрами, а ссылки даются в скобках.

2.12. Раздел должен содержать сведения о методиках, утвержденных Минздравом СССР и теряющих свою правомочность в связи с введением настоящих методических указаний.

Если какая-либо часть методики утверждалась Минздравом СССР ранее, то следует указать N утверждения и дату.