Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6111-91
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЛЕНТАГРАНА В ЭФИРНЫХ МАСЛАХ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
(В дополнение к N 3253-85)
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и
лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств
пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания,
кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии
по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая
характеристика препарата
1.1. Химическое название: S-октил-O-(6-хлоро-3-фенилпиридазинил-4)тиокарбонат.
Структурная формула:
N_____N Брутто-формула:
Cl_//
\\__C H
C H ClN O S.
\ ___ / 6 5 19 23 2 2
\
OCOSC H М.м. 378,9.
8 17
1.2. Синонимы: пиридат,
СЛ 11344.
1.3. В чистом виде белое кристаллическое
вещество, температура
плавления 27 °C,
растворимость в воде 90 мл/л, хорошо растворим во
многих органических
растворителях. При нагревании со
щелочами и
сильными
окислителями разлагается. ЛД для крыс
2000 мг/кг.
50
Рекомендуется для борьбы с сорняками на
мяте, шалфее.
2. Методика
определения лентаграна в эфирных
маслах тонкослойной хроматографией
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении лентаграна из растворов эфирных масел в н-гексане ацетонитрилом, промывке
экстракта смесью растворителей н-гександиэтиловый
эфир, реэкстракции препарата из разбавленного
ацетонитрильного раствора в диэтиловый эфир и
определении методом тонкослойной хроматографии на пластинках "Силуфол" или для ВЭТСХ.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Минимально определяемое количество лентаграна: 2 мкг.
Среднее значение определения при п = 5, а = 0,95 69,5%.
Стандартное отклонение - 2,7%.
Доверительный интервал среднего при п = 5, а = 0,95 +/- 7,1%.
Размах варьирования 57,4 - 86,3%.
2.1.3. Избирательность метода
Метод селектирован
в присутствии хлор- и фосфорорганических пестицидов, определению не мешают фенилзамещенные мочевины, нитродифениловые
эфиры.
2.2. Реактивы и
растворы
Гексан, ТУ 6-09-3375-78, ч.
Ацетонитрил, МРТУ 6-09-3534-74, ч.
Натрий сернокислый безводный, ГОСТ
4166-76, хч.
Диэтиловый эфир, ГОСТ 6262-79, ч.
Серебро азотнокислое, ГОСТ 1277-75, ч.
Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-1058-76, ч.
Лимонная кислота, ГОСТ 3652-69, чда.
Ацетон, ГОСТ 2603-79, хч.
Пластинки "Силуфол",
150 x 150 мм, ЧССР.
Пластины для ТСХ
(фракции 5 - 20 мкм), силикагель КСКГ, 200 x 200 мм (экспер. ИВС АН СССР, г. Ленинград).
Стандартный раствор лентаграна
в ацетоне с концентрацией 10 мкг/мл и 100 мкг/мл.
Для приготовления стандартного раствора
взвешивают на аналитических весах навеску лентаграна
10 мг +/- 0,2 мг, помещают ее в мерную колбу емкостью 100 мл и растворяют в 10
- 15 мл ацетона. Доводят до метки тем же растворителем, раствор содержит 100 млг/мл лентаграна. Из раствора
пипеткой в мерную колбу на 100 мл переносят 10 мл раствора и доводят до метки
ацетоном. Раствор содержит 10 мкг/мл лентаграна.
Растворы стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.
Проявляющие реактивы: водный раствор
азотнокислого серебра с массовой долей 2%, ацетоновый раствор бромфенолового синего с массовой долей 0,4% (в соотношении
1:1), водный раствор лимонной кислоты с массовой долей 2%.
2.3. Приборы и
посуда
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М,
ТУ 25-11-917-76.
Воронки делительные ВД 3-500-29132, хс, ГОСТ 25336-82.
Воронки химические В,
ГОСТ 25336-82.
Колбы плоскодонные КНКШ, ГОСТ 25336-86.
Колбы Кьельдаля
1-250-29132 ТС, ГОСТ 25336-82.
Колбы мерные на 100 и 1000 мл, ГОСТ
1770-74.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, на 1 и 10 мл.
Микрошприц для хроматографии МШ-10М, ТУ 2-833-106.
Цилиндр 1-100, ГОСТ 1770-74.
Камера для хроматографирования,
ГОСТ 25336-82.
Камера для опрыскивания, ТУ 25-П-430-70.
Весы аналитические ВЛР-200, ГОСТ
24104-82, 2-ой класс.
Гири Г-2-210, ГОСТ 7328-82.
Весы технические ВЛР-200, ГОСТ 24104-82.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 25336-82.
Допускается применение аппаратуры и
химической посуды с аналогичными техническими и метрологическими
характеристиками не ниже указанных в стандарте.
2.4. Подготовка к
определению
2.4.1. Отбор, хранение и доставка проб
Отбор, хранение и доставку проб проводят
в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб
сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды
для определения микроколичеств пестицидов",
утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, N
2051-79 от 21.08.1979.
Для анализа отбирают среднюю пробу
эфирного масла 10 г, с записью результатов взвешивания до первого десятичного
знака.
2.4.2. Подготовка и очистка реактивов
Органические растворители перед началом
работы очистить по соответствующим методикам и перегнать (2), сульфат натрия
прокалить при 300 - 400 °C. Пластинки для ТСХ и пластинки "Силуфол" активировать в термостате при 100 °C в
течение 1 часа или под УФ-лампой в течение 10 мин.
2.5. Проведение
определения
Навеску эфирного масла помещают в
делительную воронку на 250 мл с 50 мл н-гексана,
выдерживают 10 мин. Прибавляют 50 мл ацетонитрила,
встряхивают и отбрасывают верхний слой. Оставшийся раствор промывают смесью
растворителей: н-гексан - диэтиловый
эфир (7:1) 3 x 50 мл, отбрасывая верхний слой. В делительную воронку на 500 мл
помещают 200 мл 10% водного раствора сульфата натрия и переносят оставшийся
после промывки раствор. Реэкстрагируют лентагран диэтиловым эфиром 3 x
50 мл, собирая верхний слой и пропуская его через 50 г безводного сульфата
натрия. Объединенные экстракты концентрируют досуха на ротационном испарителе
при температуре бани не выше 40 °C. К сухому остатку добавляют 0,5 мл ацетона и
микрошприцем переносят пробу на хроматограмму.
2.5.2. Хроматография в тонком слое
сорбента
Анализируемую пробу
количественно переносят на
хроматографические
пластинки "Силуфол" или для ТСХ,
рядом наносят
стандартные растворы лентаграна
(3 - 7 - 15 мкг). Затем пластинки
помещают в хроматографическую
камеру, предварительно насыщенную
подвижной фазой.
В качестве подвижной фазы используется смесь:
н-гексан - ацетон (4:1 по объему), R = 0,43. С целью увеличения
f
надежности идентификации лентаграна предлагается
использовать
альтернативную фазу
хлороформ, R = 0,64. После поднятия фронта
f
подвижной фазы
до 100 мм
пластинку извлекают из камеры током
воздуха до
полного удаления растворителей. Обрабатывают
проявляющим
раствором N 1, затем N 2. Лентагран проявляется в
виде
темно-синего
пятна овальной формы на светло-желтом фоне.
2.6. Обработка
результатов
Содержание лентаграна
в анализируемой пробе вычисляют по формуле:
A x K
X = -----,
P
где:
X - содержание лентаграна
в пробе эфирного масла, мг/л;
A - количество препарата, найденное на хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;
P - количество пробы, мл;
K - поправочный коэффициент, учитывающий
потери лентаграна в процессе анализа (K = 1,4).
Содержание микроколичеств
лентаграна в пробах вычисляли как среднее из трех
параллельных измерений.
3. Требования
безопасности
При выполнении операций по определению лентаграна в эфирных маслах следует руководствоваться
требованиями при работе с соединениями третьего класса токсичности и
легколетучими растворителями.