Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N 5007-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СУМИ-АЛЬФА В ВОДЕ, ПЛОДОВЫХ
И ОВОЩНЫХ КУЛЬТУРАХ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны Д.Б. Гиренко, Л.Е. Морару (ВНИИГИНТОКС).
Дополнение к N 2473-81 от 22.10.81.
Краткая характеристика препарата. Суми-альфа -
фенвалерат-RS-альфа-циано-3-феноксибензил-(RS)-2-(4-хлорфенил)-3-метилбутират.
Активный изомер рацемического фенвалерата
(см. с. 297). Жидкость светло-желтого цвета. Растворим в ксилоле, ацетоне, циклогексаноне, этилацетате, спирте, хлороформе.
Принцип метода. Метод основан на
определении суми-альфа газожидкостной и тонкослойной
хроматографией после извлечения его из исследуемой пробы органическим
растворителем, очистки от коэкстрактивных веществ в
системе жидкость-жидкость.
Метрологическая характеристика методов.
Диапазон определяемых концентраций 0,005 - 0,1 мг/кг (мг/л). Остальные
параметры приведены в таблице 81.
Таблица 81
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ
ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУМИ-АЛЬФА
┌─────────────┬────────────────┬─────────────┬────────────────────┐
│Анализируемый│Среднее
значение│ Стандартное │
Доверительный │
│ объект
│ определения, % │отклонение, %│интервал среднего, %│
├─────────────┴────────────────┴─────────────┴────────────────────┤
│ ГЖХ │
│
│
│Вода │95,7 │+/- 4,3 │+/- 5,4 │
│Яблоки │80,0 │+/- 5,2 │+/- 6,0 │
│Картофель │85,6 │+/- 3,2 │+/- 4,9 │
│
│
│ ТСХ │
│
│
│Вода │80,0 │+/- 5,0 │+/- 7,1 │
│Яблоки │65,0 │+/- 6,0 │+/- 9,0 │
│Картофель │65,0 │+/- 5,0 │+/- 7,1 │
└─────────────┴────────────────┴─────────────┴────────────────────┘
Избирательность метода. При определении
методом ГЖХ могут мешать препараты из группы синтетических
пиретроидов; при использовании метода ТСХ могут
мешать препараты, обнаруживаемые с помощью аммиаката серебра.
Реактивы и растворы. Для экстракции.
Ацетон х.ч. Гексан ч.
Сульфат натрия ч.
Для ГЖХ. 5% SE-30 на хроматоне
N-AW (0,16 - 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты. Стандартный раствор суми-альфа (2 мкг/мл). Хранят в холодильнике не более 5
дней.
Для
ТСХ. Нитрат серебра.
Пластинки "Силуфол".
Подвижная фаза
гексан-ацетон (4:1). Проявляющий реагент
- раствор аммиаката серебра (0,5 г
AgNO
растворяют в 5
мл дистиллированной воды,
прибавляют 7 - 10 мл
3
22,5-процентного
аммиака и доводят
объем раствора до 200 мл
ацетоном).
Основной стандартный
раствор суми-альфа
(200 мкг/мл) в ацетоне. Хранят в
холодильнике не более 2 мес.
Приборы и посуда. Посуда мерная (колбы
конические, пипетки, цилиндры и др.). Воронки делительные и конические. Колбы
грушевидные, круглодонные на 25; 50 и 250 мл. Аппарат для встряхивания. Лампа
ртутно-кварцевая. Камера хроматографическая.
Пульверизаторы стеклянные. Испаритель ротационный ИР-1М. Хроматограф
"Цвет" или другой марки, снабженный ДПР. Микрошприц
МШ-10М на 10 мкл. Колонка стеклянная длиной 1 м с
внутренним диаметром 3 мм (заполненная носителем на 0,5 - 0,6 м).
Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов.
Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку и дважды экстрагируют суми-альфа гексаном порциями по
30 мл. Объединенный гексановый экстракт сушат
безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при
температуре бани 40 °C до объема 0,3 - 0,5 мл. Досуха отгоняют на воздухе.
Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют.
Навеску растительного материала (яблоки,
картофель) массой 25 г помещают в коническую колбу, приливают 50 мл смеси
ацетон-вода (7:3), встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют дважды, объединяют
ацетоновые экстракты, фильтруют и переносят в делительную воронку. Прибавляют
300 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают и реэкстрагируют
суми-альфа гексаном дважды
порциями по 30 мл. Объединяют гексан, сушат безводным
сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе. Сухой остаток в
колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее хроматографируют.
Газожидкостная хроматография. Применяют
носитель хроматон N-AW
(0,16 - 0,20
мм). Неподвижная фаза 5% SE-30. Колонка стеклянная длиной 1 м,
заполненная носителем
на 0,5 - 0,6 м. Скорость
газа-носителя (азота)
-12
50 мл/мин. Шкала
электрометра 20 x 10 А. Температура
(°C): колонки -
220, испарителя - 240, детектора - 250. Вводимый
объем 5 мкл. Время
удерживания 15 мин.
18 с, линейный диапазон
детектирования 2 - 50 нг.
Минимально
детектируемое количество 2 нг.
Тонкослойная хроматография. Пробу,
сконцентрированную до объема 0,1 - 0,2 мл, количественно наносят на пластинки
"Силуфол". Параллельно наносят серию
стандартных растворов с содержанием суми-альфа 3; 5 и
10 мкг.
Хроматографируют в
смеси растворителей гексан-ацетон (4:1).
После
высушивания
пластинку обрабатывают раствором аммиаката серебра и облучают
УФ-светом 30 мин. Суми-альфа
обнаруживается в виде пятна серо-черного
цвета. Величина
R 0,4 +/- 0,05.
f
Обработка результатов анализа. При
использовании метода ГЖХ для количественного определения измеряют площадь
основного пика в пробе в стандартном растворе (при условии, что пики близки по
величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора). Содержание суми-альфа в пробе (X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по
формуле:
C V S
ст 2 пр
X = --------,
S V P
ст 1
где:
C -
количество препарата во введенном в хроматограф
стандартном
ст
растворе, мкг;
S -
площадь пика исследуемого раствора, кв. мм;
пр
S -
площадь пика стандартного
раствора препарата, введенного
в
ст
хроматограф, кв.
мм;
V -
объем экстракта, введенный в хроматограф, мл;
1
V -
общий объем экстракта после упаривания, мл;
2
P - масса анализируемой пробы, г.
При использовании метода ТСХ содержание суми-альфа в пробе вычисляют по
формуле:
A
X = -,
P
где:
A - количество препарата, найденное на
пластинке, в пробе, мкг;
P - навеска пробы, г
или мл.
Требования безопасности. Необходимо
соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими
растворителями и токсичными веществами.