Утверждены
Минздравом СССР
8 июня 1989 г. N 5003
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ АППЛАУДА В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ
(ТОМАТЫ, ОГУРЦЫ, ПЛОДЫ И ЗЕЛЕНАЯ МАССА), ПОЧВЕ, ВОДЕ
МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Краткая
характеристика препарата. Действующее вещество - 2-
трет-бутилимино-(тетрагидро)-3-изопропил-5-фенил-1,3,5-тиадиазинон
-4. Брутто-формула C
H N OS. Молекулярная масса
305,5.
16 16 3
Общепринятое название
- бупрофезин. Технический
продукт -
кристаллическое вещество белого или желтого цвета, т. пл.
104,5 -
105,5 °C. Медленно разлагается при pH 3 - 5 и стабилен при pH 7 -
10. Растворимость при 25 °C в хлороформе 52%;
ацетоне 25; этаноле
-2
8%. Давление
паров при 25 °C
1,25 x 10 Па. Выпускается в виде
25-процентного с.п. Препарат используют
на овощных культурах
закрытого грунта против белокрылки,
дельфацидов, цикадок,
щитовок
и клеща. Для
крыс ЛД 2198 - 2355 мг/кг.
50
Принцип метода. Метод основан на
извлечении апплауда из растительных проб (томата,
огурца) 50-процентным водным ацетоном; из почв - смесью ацетона с 0,05 н
раствором хлорида кальция (1:1); из воды - хлороформом, - очистке переэкстракцией в н-гексане и
количественном определении методом ГЖХ с ДЭЗ, ДПР или ТИД.
Метрологическая характеристика метода
приведена в таблице 143.
Таблица 143
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
┌─────────────┬──────────────┬──────────────┬───────────┬─────────────────┐
│Анализируемый│ Предел
│ Среднее │Стандартное│ Доверительный
│
│ объект
│ определения, │
значение │отклонение,│интервал среднего│
│ │мг/л или мг/кг│определения, %│ %
│ при p = 0,95; │
│ │ │ │ │ n = 5, %
│
├─────────────┼──────────────┼──────────────┼───────────┼─────────────────┤
│Вода │0,0002 │92 │+/- 2,0 │+/- 1,8 │
│Почва │0,008 │78 │+/- 2,5 │+/- 3,7 │
│Растения │0,02 │77 │+/- 2,3 │+/- 2,1 │
└─────────────┴──────────────┴──────────────┴───────────┴─────────────────┘
Примечание. Диапазон линейного
детектирования 0,2 - 10,0 нг.
Избирательность метода. При данных
условиях хроматографирования пестициды типа
ювенильных гормонов не мешают определению. Избирательность метода
обеспечивается сочетанием селективных детекторов и неподвижных фаз различной
полярности.
Реактивы и растворы. Ацетон
х.ч. Гексан х.ч. Сульфат натрия безводный ч.д.а.
Хлорид натрия ч.д.а. Этиловый спирт-ректиф. Хлороформ х.ч. Петролейный эфир х.ч. Неподвижная
жидкая фаза: 5% SE-30 или 5% XE-60 на хроматоне
N-AW-DMCS (0,125 - 0,160 мм). Азот особой чистоты. Стандартный раствор апплауда в н-гексане - 5 мкг/мл.
Раствор стабилен в течение 3 мес. при хранении его в холодильнике.
Посуда и приборы. Колбы конические со
шлифами; круглодонные на 50 мл. Воронки: делительные на 250; химические.
Аппарат для встряхивания колб АВУ-1. Газовый хроматограф с ДЭЗ, ДПР или ДТИ. Микрошприц на 10 мкл. Хроматографические стеклянные колонки размером 1 м x 3 мм.
Подготовка к определению хроматографической колонки. Стеклянную колонку (1 м x 3 мм)
промывают смесью органических растворителей ацетон - этиловый спирт - петролейный эфир (1:1:1). Для этого сначала заливают на 1
часть смесь растворителей, а затем промывают 300 мл ацетона. Колонку сушат в
токе азота и заполняют сорбентом с нанесенной на него фазой с помощью
вакуумного насоса. Колонку кондиционируют при 270 °C в течение 8 ч. Скорость
потока азота 30 - 40 мл/мин.
Хранение проб. Пробы хранят в холодильнике
не более 2 недель.
Ход анализа. Экстракция и очистка
экстрактов. Навеску 10 г измельченных свежих зеленых листьев или 100 г плодов
огурца, томатов заливают 100 - 200 мл 50%-ного
водного ацетона, встряхивают в течение 1 ч и для лучшей экстракции оставляют на
ночь. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр, колбу ополаскивают дважды 30 мл
50%-ного водного ацетона. Объединенные фильтраты
помещают в делительную воронку, добавляют 50 - 70 мл дистиллированной воды и 1
- 3 г хлорида натрия. Очистку проводят переэкстракцией
апплауда в н-гексан тремя
порциями по 25 - 30 мл растворителя. Гексановые
фракции фильтруют через безводный сульфат натрия в круглодонную колбу и
концентрируют под вакуумом при температуре 40 °C до 10 мл. Аликвоту
в количестве 1 - 3 мкл вводят в хроматограф.
Навеску почвы (25 г) заливают 50 мл смеси
ацетон - 0,05 н раствор хлорида кальция (1:1), встряхивают в течение 1 ч и
оставляют на ночь. Далее анализ ведут так, как описано для растительных проб.
Пробу воды (1 л) помещают в делительную
воронку вместимостью 1,5 л, добавляют 5 - 7 г хлорида натрия и 100 мл
хлороформа. Смесь в течение 15 мин. энергично встряхивают. После разделения
слоев хлороформную фракцию сливают в плоскодонную колбу вместимостью 250 мл, а
водную фракцию вновь переносят в делительную воронку и проводят еще два раза
экстракцию апплауда хлороформом порциями по 75 мл.
Объединенные фракции хлороформа сушат безводным сульфатом натрия, добавляя в
колбу 10 - 12 г соли, или фильтруют через нее. Растворитель концентрируют под
вакуумом до 1 - 2 мл, затем полностью удаляют струей воздуха. К сухому остатку
добавляют 1 мл гексана. Аликвоту
1 - 3 мкл вводят в хроматограф.
Условия хроматографического
определения. Хроматограф с ДЭЗ, ДПР или ТИД. Условия хроматографирования
при работе на ДЭЗ, ДПР: температура, °C: колонки - 240; испарителя - 250;
детектора - 260. Скорость газа-носителя (азота) 45 мл/мин. Колонка стеклянная
(1 м x 3 мм), заполненная 5% SE-30 или 5% XE-60 на хроматоне
N-AW-DMCS (0,125 - 0,160 мм). Время удерживания на 5% SE-30 - 1 мин. 30 с, на
5% XE-60 - 2 мин. 20 с.
Условия хроматографирования
при работе на ТИД: температура, °C: колонки - 240; испарителя - 250. Скорость
газа-носителя (азота), мл/мин., - 50; водорода - 16 - 18; воздуха - 300. В этих
условиях минимально детектируемое количество апплауда
0,5 нг, диапазон линейности 0,5 - 15 нг. Время удерживания на 5% SE-30 - 1 мин. 15 с, на 5%
XE-60 - 2 мин. 20 с.
Обработка результатов анализа. Содержание
апплауда в анализируемой пробе определяют методом
соотношения пиков стандарта и проб. Количество апплауда
(X, мг/кг или мг/л) рассчитывают по формуле:
H CV
2
X = -----,
H V P
1 1
где:
C - количество препарата в стандарте,
введенном в хроматограф,
нг;
H ,
H - высоты
пиков соответственно стандарта
и
1
2
анализируемого
раствора, мм;
V -
объем анализируемого раствора, введенного в хроматограф,
1
мкл;
V - объем анализируемой пробы, мл;
P - навеска пробы, г.
Если при введении в хроматограф
получаются слишком большие пики или происходит "зашкаливание",
то готовят более разбавленные растворы.
Требования безопасности. Необходимо
соблюдать общепринятые правила предосторожности при работе с токсичными,
взрывоопасными и легковоспламеняющимися веществами.