Утверждены
Минздравом СССР
14 июля 1988 г. N 4660-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТИЛТА В ПОЧВЕ И ЗЕРНЕ
МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*>
Разработаны Ф.И. Патрашку (ВНИИБМЗР); Е.Ю. Светкиной,
А.И. Шарипжановой (ИХ АН МССР).
Краткая характеристика препарата дана в
Методических указаниях N 3190-85.
Принцип метода. Метод основан на
извлечении тилта органическим растворителем, очистке
экстракта на колонке с оксидом алюминия, активированным углем и оксидом магния
или сублимацией в вакууме с последующим количественным определением методом ГЖХ
с ДПР.
Метрологическая характеристика метода.
Пределы определения тилта в почве и зерне 0,05 мг/кг.
Предел обнаружения в хроматографируемом объеме 1 нг. В таблице 140 представлена метрологическая
характеристика метода.
Таблица 140
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
┌────────────────────────┬────────┬────────────┬───────────┬──────────────┐
│Метод
очистки экстракта │Внесено,│
Среднее │Стандартное│Доверительный │
│ │ мг/кг │
значение │отклонение,│ предел
│
│ │ │определения,│ %
│ среднего │
│ │ │ %
│ │ при n = 5,
│
│ │ │ │ │ p = 0,95, % │
├────────────────────────┴────────┴────────────┴───────────┴──────────────┤
│ Почва │
│
│
│Хроматография
на колонке│0,05 │91,8 │+/- 0,60 │91,8 +/- 1,9 │
│То
же │0,10 │95,8 │+/- 1,17 │95,8 +/- 3,7 │
│-"- │1,00 │95,9 │+/- 0,50 │95,9 +/- 1,9 │
│Сублимация │0,05 │91,4 │+/- 0,54 │91,4 +/- 1,7 │
│-"- │0,10 │93,7 │+/- 1,02 │93,7 +/- 3,2 │
│-"- │1,00 │95,6 │+/- 0,80 │95,6 +/- 2,5 │
│
│
│ Зерно │
│
│
│Хроматография
на колонке│0,95 │90,7 │+/- 0,55 │90,7 +/- 1,7 │
│То
же │0,10 │93,8 │+/- 0,52 │93,8 +/- 1,7 │
│-"- │1,00 │96,1 │+/- 0,38 │96,1 +/- 1,2 │
└────────────────────────┴────────┴────────────┴───────────┴──────────────┘
Избирательность метода. Определению тилта не мешают хлорорганические пестициды.
Реактивы, растворы, материалы. Тилт х.ч. Ацетон особой чистоты. Хлористый метилен ч.д.а. Петролейный эфир ч. н-Гексан х.ч. Метанол х.ч. Сульфат натрия
безводный ч.д.а. Хлорид кальция х.ч.
Хлорид натрия. Хроматон N-AW, силанизированный HMDS, с 5% XE-60. Азот газообразный особой
чистоты в баллонах с редуктором. Азот газообразный ч. в баллонах с редуктором,
регулятором давления и дросселем. Стандартные растворы тилта
в ацетоне с содержанием 0,25; 1 и 10 мкг/мл, приготовленные из химически чистых
веществ. Оксид алюминия для хроматографии ч. Оксид магния особой чистоты.
Активированный уголь ОУ, марка "Б", технический.
Приборы и посуда. Хроматограф
"Цвет-106", снабженный ДПР колонки для газовой хроматографии,
внутренний диаметр 3,5 мм, длина 2 м. Ротационный вакуумный испаритель с
набором колб. Колбы: мерные на 50; 100 и 250 мл; круглодонные или грушевидные
на 50; 100 и 250 мл. Стаканы химические на 300 мл. Пипетки на 0,1; 1,5 и 2,0 мл
с делениями. Хроматографическая колонка стеклянная
диаметром 1,5 см, длиной 30 см. Аппарат для встряхивания. Вакуумный насос. Сублиматор стеклянный для
сублимации в вакууме. Масляная баня с регулируемой температурой. Микрошприц на 10 мкл. Делительные
воронки на 1 л.
Подготовка хроматографических
колонок. Стеклянную колонку моют хромовой смесью, ополаскивают водой, промывают
ацетоном, высушивают, заполняют сорбентом, используя водоструйный насос. Заполненную
колонку кондиционируют в течение 10 ч при 1270 °C. Для очистки экстрактов хроматографическую колонку промывают хромовой смесью,
ополаскивают водой и высушивают. Затем помещают ватный тампон, последовательно
7 см оксида алюминия, 1 см смеси активированного угля и оксида магния (1:3),
сверху 2 см безводного сульфата натрия.
Ход анализа. Экстракция и очистка
экстрактов. Отбирают среднюю пробу почвы массой 20 г. Помещают в стеклянную
колбу, заливают 50 мл смеси ацетона с 0,05 н. водным раствором хлорида кальция
(1:1). Пробу в течение 1 ч встряхивают на аппарате для встряхивания. Колбу с
экстрактом помещают в морозильную камеру бытового холодильника на 1 ч. Затем
экстракт фильтруют. Тилт трижды экстрагируют н-гексаном порциями по 30 мл. Гексановые
фракции фильтруют через безводный сернокислый натрий в круглодонные колбы и
упаривают досуха на ротационном испарителе при 35 °C.
Среднюю пробу зерна (20 г) помещают в
стеклянную колбу, заливают 100 мл метанола и оставляют на ночь или интенсивно
встряхивают в течение 2 ч. Экстракт фильтруют через бумажный фильтр. Фильтрат
переносят в делительную воронку, добавляют 20 мл насыщенного раствора хлорида
натрия и 200 мл дистиллированной воды. Экстрагируют трижды хлористым метиленом
порциями по 50; 50 и 20 мл. Органическую фазу объединяют и сушат, фильтруя
через безводный сульфат натрия. Органическую фазу упаривают досуха на
ротационном испарителе при 35 °C. В связи с тем, что наибольшие потери
анализируемого препарата происходят на конечной стадии удаления растворителя,
удаление растворителя проводят до тех пор, пока в колбе останется ~ 0,2 мл
жидкости. Затем пробирку вынимают из бани и последние
капли растворителя удаляют вращением ее в руках.
Очистка на колонке. Подготовленную
колонку элюируют 40 мл элюента ацетон-петролейный эфир-хлористый метилен
(1:2:2), элюат отбрасывают. Остаток пробы после упаривании растворяют в 2 мл смеси ацетона и петролейного эфира (1:1) и вносят в колонку. Дают раствору
впитаться и элюируют 80 мл смеси ацетона, петролейного эфира и хлористого метилена (1:2:2). Для
ускорения элюирования можно применять микронасос
"Скалярий", а также водоструйный насос.
Скорость элюирования должна быть не более 2 мл/мин. Первые 10 мл элюата отбрасывают, а остальные 70 мл концентрируют досуха,
как описано выше. Затем растворяют в определенном количестве ацетона и вводят в
хроматограф.
Очистка экстракта путем сублимации.
Приготовленные экстракты количественно переносят в стеклянный "палец"
для сублимации. Упаривают растворитель, затем подключают к вакуумному насосу,
включают водяное охлаждение. Сублимацию проводит в течение 30 мин. при
температуре 130 °C и давлении 1333,2 Па (10 мм рт. ст.). Сублимированный
тилт количественно переносят в круглодонную колбу и
упаривают досуха, а затем разбавляют в определенном количестве ацетона и вводят
в хроматограф.
Условия
хроматографирования. Газохроматографическое определение
проводят на
газовом хроматографе с ДПР.
Колонка
стеклянная диаметром
3,5 мм, длиной
2 м, носитель - хроматон N-AW-HMDS
(0,16 - 0,20 мм) с 5%
XE-60. Скорость
потока продувочного газа - азот
особой чистоты -
160 мл/мин., газоносителя - азота особой чистоты - 50 мл/мин. Температура,
°C: детектора -
250, испарителя - 250, колонок - 235. Время
удерживания
препарата 8 мин.
23 с.
Скорость диаграммной ленты
потенциометра 240 мм/ч,
-12
Шкала электрометра
200 x 10 А. В
хроматограф вводят поочередно
стандартный и
анализируемый раствор в количестве 3 мкл. Соотношение
объемов
подбирают таким
образом, чтобы высоты
пиков были примерно одинаковыми.
Количественное определение проводят по высотам пиков.
Обработка
результатов анализа. Содержание
тилта
в почве и
зерне
(X, мг/кг)
определяют по формуле:
H C V
пр ст
X = -------,
H V P
ст 1
где:
H -
высота пика анализируемого экстракта, мм;
пр
C -
количество стандарта, введенного в хроматограф, нг;
ст
V - объем экстракта пробы, мл;
H -
высота пика стандартного раствора, мм;
ст
V -
объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;
1
P - навеска пробы, г.
Требования безопасности. Соблюдать все
необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а
также правила, принятые для работ с пестицидами.