Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
21 ноября 1985 г. N 4016-85
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ И ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ
КОНЦЕНТРАЦИИ ЛОНТРЕЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
// \
Cl
//
\/
│ ││
│
││
М.м. 192,1.
/\\
/\
Cl \\ /
C-OH
N
││
O
Лонтрел, 3,6-дихлорпиколиновая кислота (синонимы - ДХПК, Дауков
290).
Белое кристаллическое вещество без запаха. Растворимость в г/кг: в воде -
1, ацетоне -
250, ксилоле - 250, метаноле - 250 при 20 °С. Температура
-5
плавления 151
- 152 °С,
давление пара 1,2 х 10 мм рт. ст.
при 25
°С.
В обычных
условиях устойчиво, с органическими и неорганическими основаниями
образует хорошо
растворимые в воде соли.
Выпускается в виде водного раствора соли
с этиламином с содержанием кислоты 100 и 300 г/л, а
также в виде смесей с некоторыми пестицидами. Применяется в качестве
послевсходового гербицида в посевах зерновых злаков, сахарной свеклы и др.
Расчетная предельно допустимая
концентрация в воздухе рабочей зоны - 12 мг/куб. м (для 34% техн.
р-ра) или 3,5 мг/куб. м по д.в.
По экспериментальным данным предлагается - 2 мг/куб. м (по действ. вещ.). Агрегатное состояние
технического препарата в воздухе - пары и аэрозоль.
I. Характеристика
метода
1. Определение основано на: 1)
газохроматографическом определении метилового эфира 3,6-ДХПК с детектором
постоянной скорости рекомбинации на неподвижной фазе SE-30 (5/%) после
аспирационного отбора пробы воздуха и переведении сухого остатка 3,6-ДХПК в ее
метиловый эфир; 2) хроматографировании в тонком слое
силикагеля с помощью подвижной фазы: гексан - бензол
- уксусная кислота (10:2:3) с последующим обнаружением зоны локализации смесью
растворов бромфенолового синего и азотнокислого
серебра.
2. Отбор проб проводится с
концентрированием (фильтр "синяя лента", ацетон).
3. Предел обнаружения:
ГЖХ - 1 нг при метилировании диметилсульфатом;
0,03 нг при
метилировании диазометаном
в 3 мкл;
ТСХ - 2 мкг.
4. Предел измерения в воздухе:
ГЖХ - 0,0006 мг/куб. м (проба воздуха 3
л);
ТСХ - 0,07 мг/куб. м (проба воздуха 30
л).
5. Диапазон измеряемых концентраций:
ГЖХ - 0,0006 - 1,0 мг/куб. м;
ТСХ - 0,14 - 1,4 мг/куб. м.
6. Определению не мешает наполнитель
технического препарата. Методы избирательны в присутствии пиклорама,
ХОП (гамма-ГХЦГ), 2,4-Д; 2М-4Х и других гербицидов класса феноксиалканкарбоновых
кислот.
7. Граница суммарной погрешности измерения:
ГЖХ - +/- 18,7%;
ТСХ - +/- 20%.
II. Реактивы,
растворы, материалы
3,6-Дихлорпиколиновая кислота, х.ч.
Бумажный беззольный фильтр "синяя
лента", ТУ-6-09-1678-77.
К методу ГЖХ:
Ацетон, ч., ГОСТ 2603-79.
Диэтиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6262-79.
Метанол, х.ч.,
ГОСТ 6995-77.
Метиламин хлоргидрата,
ТУ 6-09-3755-74.
Мочевина, ч.д.а.,
ГОСТ 6691-77.
Натрий хлористый, ч.д.а.,
ГОСТ 4233-77.
Гидроокись калия (таблетированная).
Серная кислота, х.ч.,
ГОСТ 4204-77.
Натрий азотистокислый,
ч.д.а., ГОСТ 4197-74-75.
Натрий углекислый, х.ч.,
ГОСТ 83-79.
Натрий сернокислый безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76.
Диметилсульфат, ч.
Метиловый эфир 3,6-ДХПК.
Нитрозометилмочевина, готовится по прописи, изложенной далее.
Носитель-хроматон
N-АW-НМД, 0,200 - 0,250 мм, с 5% SE-30.
К методу ТСХ:
Бензол, ГОСТ 5955-75.
Спирт этиловый 96-процентный, ТУ
6-09-1710-77.
Гексан, ТУ 6-09-3375-78.
Уксусная к-та ледяная, ГОСТ 18290-72.
Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-1058-76.
Азотнокислое серебро, ГОСТ 1277-75.
Аскорбиновая кислота, ГОСТ 4815-76.
Подвижная фаза: гексан
- бензол - уксусная к-та (10:2:3).
Стандартный р-р 3,6-дихлорпиколиновой
кислоты: 1, 10, 100 и 1000 мкг/мл. Срок хранения растворов - 10 суток (+4 °С).
К методу ГЖХ:
Стандартный раствор метилового эфира:
3,6-дихлорпиколиновой к-ты, содержащий 1, 10 мкг/мл.
Диазометан газообразный или диметилсульфат,
5-процентный р-р в абсолютном метиловом спирте.
Азот газообразный особой чистоты, ГОСТ
9293-74.
К методу ТСХ:
Проявляющий реагент N 1: смесь 0,4%
спиртного раствора бромфенолового синего и 2% водного
р-ра азотнокислого серебра (1:1). Реактив должен быть
свежеприготовленным.
Проявляющий реагент N 2: 2-процентный
водный раствор аскорбиновой кислоты.
Реактив устойчив 3-е суток.
III. Приборы и
посуда
Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77, модель 882.
Фильтродержатели.
Поглотительные приборы с пористой
пластинкой N 1 или прибор Рыхтера, ТУ 25-11-1081-75.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ
25-11-917-76.
Колбы мерные, цилиндры, ГОСТ 1770-74.
Колбы грушевидные на 50, 100 мл, ГОСТ
10394-72.
Пипетки на 1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Микрошприцы на 10 мкл МШ-10, ТУ 5Е-2.883.0.24.
К методу ГЖХ:
Хроматограф с детектором постоянной
скорости рекомбинации (ДПР) марки "Цвет", "Газохром"
и др.
Секундомер, ГОСТ 5072-79.
Колба Бунзена, ГОСТ 6514-75.
Нагреватель - электрическая плитка, ГОСТ
306-76.
Глицериновая баня.
Водоструйный насос стеклянный, ГОСТ
10696-75.
Холодильник шариковый, длина 300 мм.
Воронка Бюхнера
РФ 3 120 мл, ГОСТ 9147-73.
Баллоны газовые.
Редуктор, ГОСТ 2405-72.
Колонка стеклянная длиной 2 м, внутренний
диаметр 3 мм.
К методу ТСХ:
Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-75.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.
Хроматографические пластинки "Силуфол" (ЧССР), 150 x
150 мм.
IV. Условия отбора
проб воздуха
Отбор проб препарата в капельно-жидком
состоянии производится на фильтры "синяя лента" со скоростью
протягивания воздуха 5 - 10 л/мин. Отобрать 30 - 50 л воздуха.
В парообразном состоянии воздух
протягивается через 3 последовательно соединенных поглотителя, наполненных 10 -
15 мл свежеперегнанного ацетона, со скоростью 0,2 л/мин.
Для определения 1/2 ПДК 3,6-ДХПК методом
ГЖХ достаточно отобрать 0,2 л воздуха, а при анализе методом ТСХ объем пробы
воздуха - 30 л.
Длительность хранения сухого остатка проб
воздуха - 5 - 7 суток. Хранить в холодильнике при +4 °С.
V. Условия анализа
Из
фильтра "синяя лента" 3,6-дихлорпиколиновую к-ту извлекают
ацетоном
2 раза по 20 мл при периодическом встряхивании
в течение 10 мин., экстракт
ацетона объединяют
(N 1). Объединяют также экстракт и из поглотительных
приборов (N 2).
Экстракты сушат над б/в Na
SO и упаривают досуха.
2 4
При определении 3,6-ДХПК методом ГЖХ
сухой остаток метилируется диазометаном
или диметилсульфатом, при методе определения ТСХ -
сухие остатки растворяются в 0,1 мл этилового спирта.
1. Условия анализа
методом ГЖХ
Подготовка к метилированию
Нитрозометилмочевину получают следующим способом: в круглодонную стеклянную колбу помещают
1,5 моля хлоргидрата метиламина, 5 молей мочевины и
400 мл дистиллированной воды. Соединяют колбу с обратным холодильником и
нагревают на глицериновой бане при температуре 120 °С
в течение 3 часов. Колбу отсоединяют и переносят содержимое в химический стакан
емкостью 2000 мл. Добавляют 1,6 моля азотистокислого
натрия. Смесь охлаждают в емкости со льдом и поваренной солью до -10 °С.
Медленно при постоянном перемешивании приливают 100 г конц.
серной к-ты. Выпавшие в виде сметанообразной массы нитросоединения
помещают на бумажный фильтр воронки Бюхнера,
фильтруют с водоструйным насосом и промывают дистиллированной ледяной водой. Полученная нитрозометилмочевина
хорошо высушивается в эксикаторе над таблетированным
KOH до постоянного веса и используется для получения диазометана.
Вещество хранить в банке из темного стекла с притертым шлифом в холодильнике
(+4 °С).
Метилирование
Метилирование сухого остатка 3,6-ДХПК можно проводить диазометаном
и диметилсульфатом.
Методика метилирования
диметилсульфатом утверждена заместителем Главного
государственного санитарного врача СССР, N 1541-76 от 20.12.1976, и
опубликована в сборнике "Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и
внешней среде", часть VIII, М., 1977 г., с. 124.
Метилирование диазометаном: при реакции нитрозометилмочевины с гидроокисью калия полученный
диазометан сразу же участвует в процессе метилирования. Для этого в реакционную емкость прибора
помещают 0,5 г нитрозометилмочевины, 5 мл диэтилового эфира и 5 мл метанола. Выходную трубку
реакционного прибора погружают в приемник-концентратор, где сухой остаток
3,6-ДХПК растворен в 0,5 мл метанола и 4 мл диэтилового
эфира. Растворители свежеперегнанные. В реакционную емкость по каплям
приливается 10 - 15 мл 40% гидроокиси калия. При реакции образующийся диазометан пропускается через раствор в приемник за 15 мин.
Раствор, насыщенный диазометаном, приобретает желтый
цвет. Концентратор закрывается стеклянной пробкой со шлифом и выдерживается не
менее 30 мин.
Метилированную пробу испаряют досуха, растворяют сухой остаток в 1 мл ацетона или
этилового спирта (в зависимости от растворителя стандартов) и хроматографируют.
Условия хроматографирования
Ввод пробы в хроматограф - через
самоуплотняющуюся мембрану.
Объем вводимой пробы - 3 мкл.
-12
Шкала электрометра - 50 - 10 А.
Хроматографические параметры на неподвижной фазе SE-30:
кол-во жидкой фазы - 5%;
Т колонки - 180 °С;
Т испарения - 250 °С;
Т детектора - 260 °С;
скорость газа-носителя - 30 мл/мин.;
скорость диаграммной ленты - 200 мм/час;
время удерживания 3,6-ДХПК - 1,1 мин.
Количественное определение проводят
методом расчета по соотношению "площадь пика - концентрация" при
вводе до и после анализа проб стандартного раствора.
2. Условия анализа
методом ТСХ
Раствор
пробы (0,1 мл) с помощью
микропипетки или микрошприца наносят
на пластинку
"Силуфол". Рядом
с пробой наносятся стандартные
растворы.
Стенки колбы
смывают несколькими каплями
растворителя, который наносят в
центр пятна.
Пластинку помещают в хроматографическую камеру,
предварительно
заполненную
подвижной фазой. После
подъема фронта на 10 см
пластинку
вынимают из камеры, сушат на воздухе в вытяжном шкафу,
опрыскивают сначала
проявляющим р-ром
N 1, а затем раствором N 2.
3,6-ДХПК обнаруживается на
сером фоне в
виде желтого пятна, которое постепенно становится черным.
Значение R = 0,3. Черная окраска пятен устойчива.
f
Количественное определение 3,6-ДХПК в
анализируемой пробе проводится при сравнении площади пятен с пятнами стандарта
с помощью прозрачной миллиметровой бумаги.
Линейная зависимость соблюдается в
интервале от 2 до 20 мкг.
Концентрация препарата (Х) в мг/куб. м в
воздухе вычисляют по формуле:
для ГЖХ:
G х S х V
пр 1
Х = -------------;
S х V х V
ст 20
для ТСХ:
G
1
Х = ---,
V
20
где:
G
- количество препарата
в стандартном растворе,
введенном в
хроматограф,
мкг;
G -
количество препарата, найденное в хроматографическом
объеме пробы,
1
мкг;
S -
площадь пика на хроматограмме стандарта, кв. мм;
ст
S -
площадь пика на хроматограмме пробы, кв. мм;
пр
V -
общий объем пробы, мл;
1
V - хроматографируемый
объем пробы, мл;
V -
объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным
20
условиям, л.
VI. Требования
безопасности
Соблюдать все необходимые требования
безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических
учреждений системы Минздрава СССР (N 2455-81, 20.10.1981).
VII. Разработчики
Баркене М.Ю., Раманаускене В.В., Вайтекунене Д.Ю. (НИИЭМГ Минздрава Литовской ССР, г.
Вильнюс), Пиленкова И.И., Юркова
Р.Г., Фатьянова А.Д. (Всесоюзный НИ технологический институт гербицидов и
регуляторов роста растений - ВНИТИГ, г. Уфа).