Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
А.И.ЗАИЧЕНКО
12 апреля 1985 г. N 3251-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ГИДРАЗИДА МАЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ В ТАБАКЕ
КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ
Настоящие Методические указания
предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и
научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных,
агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и
лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных
количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней
среде.
Срок действия временных методических
указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и
рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по
химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками
Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и
одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы
ИМПиТМ им. Марциновского
Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении
Минздрава СССР.
1. Краткая
характеристика препарата
Гидразид малеиновой кислоты (ГМК, малеингидразид,
МН-30, МГ, регулокс) - 3-Оксипиридазон-6 - белое
кристаллическое вещество.
//\
OH
//
\/
│
││
│
││
O=\
/N
\ /
N
│
H
3-Оксипиридазон-6
Эмпирическая формула C H O N .
4 4 2 2
Молекулярная масса - 112,03.
Температура плавления - 296 - 298 °С.
Растворимость в воде при 25 °С - 0,6%, в диметилформамиде -
2,4%, растворимость в 1 л воды: натриевой соли - 200 г, калиевой соли - 400 г, диэтиламиновой соли - 700 г.
В СССР МДУ в табаке - 8,0 мг/кг.
В зависимости от концентрации применяется
для борьбы с заразихой и для пасынкования табака.
Выпускается в виде натриевой, калиевой и диэтиламиновой
соли ГМК.
2. Методика
определения ГМК в табаке
колориметрическим методом
2.1. Основные
положения
2.1.1. Принцип метода
Методика основана
на измерении оптической плотности продукта взаимодействия сернокислого
гидразина с п-диметиламинобензальдегидом при длине
волны 455 нм после восстановления малеинового гидразида до янтарного гидразида,
который затем гидролизуется, отгонки освобожденного
гидразина в раствор серной кислоты, очистки дистиллята активированным углем и
концентрирования.
2.1.2. Метрологическая характеристика
метода
Метод характеризуется среднеквадратичной
ошибкой определения 3,18 - 5,14 мкг (Р = 0,95; n =
24).
Минимально определяемое количество ГМК с
вероятностью Р = 0,95 равно 3,48 мкг.
2.2. Реактивы и
материалы
Диметиламинобензальдегид-пара (п-ДМАБА), ТУ 6-09-3272-77, 1,5-процентный раствор в 1 Н серной
кислоте. Реактив устойчив в течение месяца при хранении в темноте, в противном
случае его необходимо готовить ежедневно.
Предварительно п-ДМАБА очищают по
следующей схеме: 20 г п-ДМАБА растворяют в 150 мл этанола, добавляют 4 г
активированного угля, перемешивают в течение 5 мин. и фильтруют под вакуумом
через воронку Бюхнера. К фильтрату постепенно при
перемешивании добавляют 200 мл холодной (0 °С) дистиллированной воды и выпавшие
белые кристаллы отфильтровывают под вакуумом, промывают 50 мл холодной воды и
сушат в вакуум-эксикаторе над концентрированной серной
кислотой. Хранят реактив в темной склянке в защищенном от света месте.
Железо двухлористое, х.ч.,
ГОСТ 4149-74.
Цинк металлический, х.ч.,
ГОСТ 989-72.
Натр едкий, х.ч.,
ГОСТ 4328-77, 50-процентный раствор.
Активированный уголь марки ОУ-А. Уголь
предварительно очищают следующим образом: к 200 г активированного угля
приливают 1 л водного раствора соляной кислоты (1:9), смесь нагревают до
кипения и фильтруют под вакуумом через бумажный фильтр. Уголь на фильтре
промывают дистиллированной водой до нейтральной реакции по индикаторной бумаге
и сушат в сушильном шкафу при 110 °С в течение 5 часов
при перемешивании.
Кристаллический гидразид малеиновой кислоты.
Для приготовления стандартных растворов
ГМК в мерной колбе на 500 мл растворяют 100 мг ГМК в 50 мл воды, содержащей 0,4
г едкого натра. Раствор доводят до метки дистиллированной водой. В мерные колбы
на 200 мл отбирают по 10, 20, 30, 40 мл этого раствора и доводят до метки
водой. Эти растворы содержат соответственно 10, 20, 30, 40 мкг ГМК в 1 мл
раствора.
Соляная кислота, х.ч.,
ГОСТ 7118-77.
Серная кислота, х.ч.,
ГОСТ 4204-77, 1 Н раствор.
Этиловый спирт ректификат, ТУ
6-09-1710-77.
Ацетон, х.ч.,
ТУ 6-09-3513-75.
Универсальная индикаторная бумага, ТУ
6-09-1181-71.
Калий азотнокислый, ч., ГОСТ 4217-77.
Натрий азотнокислый, ч., ГОСТ 4432-77.
Натрий азотистокислый,
ч., ГОСТ 4398-77.
Солевая баня приготавливается из 7%
нитрата натрия, 40% нитрита натрия, 53% нитрата калия (температура плавления
142 °С).
2.3. Приборы,
аппаратура и посуда
Спектрофотометр СФ-16 или другой марки,
позволяющий проводить измерения в видимой области спектра.
Установка для перегонки с водяным паром.
Колбы плоскодонные на 250, 500, 2000 мл,
ГОСТ 10394-72.
Стаканы химические на 250 мл, ГОСТ
10394-72.
Термометр ртутный на 200 °С, ГОСТ 16590-71.
Мензурки на 100 мл, ГОСТ 1770-73.
Цилиндр мерный на 100, 250, 1000 мл, ГОСТ
1770-74.
Колбы мерные на 25, 50, 100, 200 и 500
мл, ГОСТ 1770-74.
Пипетки на 10 мл, 1 мл, ГОСТ 20292-74.
Колба Бунзена, ГОСТ 6514-75.
Воронка Бюхнера,
ГОСТ 9147-73.
Воронки химические диам.
35, 75 мм, ГОСТ 8613-75.
Электроплитки ПЭК-800/3, ТУ 92-208-74.
Колбы длинногорлые круглодонные со шлифом
на 500 мл, ГОСТ 10394-72.
Насадка склянки для промывания газов
СН2-50, ГОСТ 10378-73.
Ротационный вакуум-испаритель ИР-1М, ТУ
25-11-917-74.
Фильтры бумажные с синей полосой, ТУ
6-60-1678-77.
Колбы круглодонные со шлифом на 100 мл,
ГОСТ 10394-72.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
2.4. Подготовка к
определению
2.4.1. Построение калибровочного графика
Способ
построения калибровочного графика
зависит от наличия
необработанного (контрольного) образца табака. При отсутствии
контрольного
образца
построение калибровочного графика проводится следующим образом: к 4
- 5
навескам табака, содержащего на основании предварительных определений
наименьшее количество
ГМК, приливают соответственно по 1
мл раствора,
содержащего 10,
20, 30, 40 мкг ГМК. Навески табака с добавками ГМК, а также
без добавки
анализируют по методике, описанной в п.
2.5. На основании
полученных
данных в координатах Y аХ строят экспериментальный
калибровочный
1
график. После
экстраполяции его до пересечения с продолжением оси абсцисс
получают рабочий
график в координатах Y 0Х. Отрезок 0а разбивают в том же
2
масштабе, что и
ось аХ. При
наличии контрольного образца
табака
калибровочный
график строят в координатах Y 0Х (рис. 1 - не приводится).
2
2.4.2. Отбор, хранение и доставка пробы
Отбор и хранение проб табака производят в
соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб...", утвержденными
заместителем Главного государственного санитарного врача СССР А.И. Заиченко за
N 2051-79 от 21 августа 1979 г.
2.5. Проведение
определения
2.5.1. 1 г
исследуемого образца помещают в дистилляционную колбу установки для перегонки с
водяным паром, добавляют 50 мл раствора щелочи и погружают колбу в солевую
баню, нагретую до 165 °С. Содержимое колбы кипятят в течение 10 - 15 мин.,
охлаждают 5 мин., добавляют 0,5 г хлорида железа, 15 г цинковой стружки и
присоединяют колбу к установке для перегонки с водяным паром. Отгонку ведут при температуре солевой бани 175 °С.
Приемником служит мензурка, содержащая 4 мл 1 Н серной кислоты. Подачу
пара регулируют так, чтобы за 20 минут в приемнике собралось 100 мл дистиллята.
К полученному дистилляту добавляют 2 г активированного угля, перемешивают одну
минуту и фильтруют через складчатый фильтр. Осадок на фильтре промывают водой
(5 - 10 мл), выпаривают фильтрат на ротационном вакуум-испарителе
или электроплитке до 6 мл. Охлажденный концентрат количественно переносят в 25
мл мерную колбу, добавляют 6 мл раствора п-ДМАБА, доводят водой до метки,
тщательно перемешивают и оставляют в темноте на 20 мин. Экстинцию
раствора измеряют на спектрофотометре при 455 нм по
отношению к раствору, содержащему 6 мл раствора п-ДМАБА, разбавленного водой до
25 мл. Количество ГМК определяют по калибровочному графику.
2.6. Обработка
результатов анализа
Содержание остаточных количеств ГМК в
анализируемой пробе вычисляют как среднее из трех параллельных определений.
Результаты анализа рассчитывают по
формуле:
а х 100
Х = -------------,
Н х (100 - В)
где:
Х - содержание остаточных количеств ГМК в
пробе, мг/кг;
а - количество ГМК, определенное по
калибровочному графику, мкг;
Н - навеска табака или вес сгоревшего
табака, г;
В - влажность табака, %.
3. Требования
безопасности
Необходимо соблюдать правила безопасности
при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.
Необходимо регулярно проверять
дистилляционные колбы, так как из-за использования концентрированного раствора
щелочи срок их использования ограничен.
Каждый раз после окончания дистилляции
необходимо выливать содержимое колбы с остатками цинковой стружки в отдельный
резервуар, а колбу промыть трижды 30-процентным раствором азотной кислоты для
полного удаления каустических и цинковых остатков, а затем трижды - водой.
4. Методические указания разработаны:
Пискловым В.П., Пережогиной Т.А., Тумасьян Г.И. -
Всесоюзный научно-исследовательский институт табака и махорки им. А.И. Микояна
(ВИТИМ), г. Краснодар.