Утверждены
Минздравом СССР
3 января 1985 г. N 3195-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ РЕЛДАНА И ПРОДУКТА
ЕГО ГИДРОЛИЗА 3,5,6-ТРИХЛОР-2-ПИРИДИНОЛА В ВОЗДУХЕ
РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Краткая
характеристика препаратов. Релдан - O,O-диметил-O-
(3,5,6-трихлорпиридил-2-)тиофосфат.
Брутто-формула C H Cl NPSO .
7 7 3 3
Молекулярная
масса 322,6. Синонимы - хлорпирифосметил, даурелдан,
петрал.
Релдан - белый кристаллический порошок со слабым запахом меркаптана. Т. пл.
45,5 - 46,5 °C. Растворимость в воде 4 мг/л. Хорошо растворим в ацетоне, ацетонитриле, бензоле, сероуглероде, хлороформе, метиленхлориде, диэтиловом эфире,
плохо растворим в алифатических углеводородах и спиртах.
Во влажной атмосфере и воде под действием
УФ-света релдан гидролизуется до 3,5,6-трихлор-2-пиридинола и O,O-диметилфосфата.
Летучесть 0,014 мг/куб. м при 0 °C, 0,75
мг/куб. м при 25 °C, 3,1 мг/куб. м при 35 °C. В воздухе может находиться в виде
аэрозоля и паров. ОБУВ релдана в воздухе рабочей зоны
0,3 мг/куб. м.
Принцип метода. Методика основана на
определении релдана методом газожидкостной и
тонкослойной хроматографии. Определение релдана
методом ГЖХ проводят на газовом хроматографе, снабженном ТИД. Определение релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола методом ТСХ основано
на хроматографировании препаратов в тонком слое
силикагеля и обнаружении обоих соединений по реакции с нитратом серебра или
обнаружении только релдана по реакции с бромфеноловым реагентом.
Пробы отбирают с концентрированием.
Метрологическая характеристика. Метод
ГЖХ. Нижний предел измерения в хроматографируемом
объеме 0,5 нг, в воздухе - 0,02 мг/куб. м (при отборе
25 л воздуха). Диапазон линейной зависимости величины хроматографируемого
сигнала от величины количества введенного в хроматограф релдана
0,5 - 10 нг. Диапазон измеряемых концентраций 0,02 -
0,5 мг/куб. м. Граница суммарной погрешности измерения +/- 15,8%.
Метод ТСХ. При применении реагента на
основе нитрата серебра нижний предел измерения релдана
и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола 0,3 мкг (0,06 мг/куб. м); при применении реагента
на основе бромфенолового синего нижний предел
измерения релдана 0,5 мкг (0,1 мг/куб. м). Граница
суммарной погрешности измерения релдана +/- 19,7%,
3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 20,6%.
Избирательность метода. При определении релдана методом ГЖХ с ТИД на колонке с фазой 5% SE-30
определению может мешать метафос. Для идентификации релдана в присутствии метафоса
используется альтернативная колонка (фаза 5% OV-1), на которой время
удерживания релдана по отношению ко времени
удерживания метафоса равно 0,76.
Сочетание методов ГЖХ и ТСХ также
позволяет идентифицировать релдан в присутствии метафоса и других ФОП и ХОП.
Реактивы и растворы.
н-Гексан ч. Ацетон ч. Диэтиловый эфир х.ч. Фильтры
бумажные "синяя лента". Пенополиуретан
(порезанный ножницами до размера частиц 3 - 5 мм), отмытый ацетоном в течение
12 ч в аппарате Сокслета. Нитрат
серебра х.ч. Аммиак водный ч.д.а.
Бромфеноловый синий (индикатор) ч.д.а.
Уксусная кислота х.ч. Лимонная кислота особой
чистоты. Безводный сульфат натрия ч.д.а.
Пластинки "Силуфол". Неподвижные фазы: 5%
SE-30 на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм), 5%
OV-1 на диатомите CLQ (80 - 100 меш). Азот особой чистоты. Водород из баллона
или получаемый из генератора водорода. Воздух из баллона или нагнетаемый
компрессором.
Проявляющие реагенты:
1) реагент на основе AgNO
. 0,5
г AgNO растворяют
в 5 мл
3 3
дистиллированной воды,
после чего прибавляют
7 мл аммиака и
доводят объем
раствора до 100 мл ацетоном;
2)
реагент на основе бромфенолового
синего и AgNO . Готовят
3
два раствора. Раствор а - 0,5-процентный водно-ацетоновый раствор
AgNO (1 часть воды и
3 части
ацетона), раствор б
- 0,05 г
3
бромфенолового
синего растворяют в
10 мл ацетона.
Раствор б
разбавляют раствором а
до объема 100
мл. Хранят в темном
прохладном месте. Для осветления фона пластинки после опрыскивания
проявляющей смесью
б используют 5-процентный раствор
уксусной
кислоты или
2-процентный раствор лимонной
кислоты. Релдан
проявляется в
виде сине-лилового пятна.
Основные стандартные растворы релдана (N 1) и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола (N 2) в ацетоне
с содержанием 100 мкг/мл. Хранят в холодильнике в течение 3 мес.
Рабочие стандартные растворы релдана и 3,5,6-трихлор-2-пиридинола в ацетоне (1, 2, 5
мкг/мл) готовят соответствующим разбавлением из основных стандартных растворов.
Хранят в холодильнике 6 дней.
Приборы и посуда. Хроматограф с ТИД.
Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5% SE-30
на хроматоне N-AW-HMDS (0,16 - 0,20 мм).
Альтернативная стеклянная колонка длиной 1,8 м с внутренним диаметром 3 мм,
заполненная 5% OV-1 на диатомите CLQ (80 - 100 меш). Аспирационное устройство.
Аппарат для встряхивания. Ротационный вакуумный испаритель с набором колб.
Колбы: мерные вместимостью 25, 50, 100 мл; грушевидные вместимостью 50 мл.
Стаканы химические вместимостью 50, 100 мл. Пробирки мерные на шлифах
вместимостью 5 - 10 мл. Пипетки вместимостью 1, 5, 10 мл. Микропипетки
вместимостью 0,1 мл. Микрошприцы МШ-10М. Фильтродержатели. Аллонжи, плотно заполненные
пенополиуретановой крошкой.
Отбор проб. Воздух, содержащий релдан в виде паров и аэрозоля, протягивают со скоростью 1
л/мин. через бумажный фильтр "синяя лента", помещенный в фильтродержатель, и последовательно соединенный с фильтродержателем аллонж с пенополиуретановой крошкой. Для
определения 1/2 ПДК следует отобрать 4 л воздуха. Закрытые пробы могут
сохраняться в холодильнике до 10 дней.
Ход анализа. Подготовка проб к анализу.
Бумажные фильтры, содержащие аэрозоль, вынимают из фильтродержателя,
измельчают ножницами (до размера частиц 1 см), помещают в коническую колбу и
заливают 25 мл ацетона, закрывают колбу и встряхивают ее на аппарате для
встряхивания 30 мин. Сливают растворитель, экстракцию повторяют. Объединенные
экстракты переносят в колбу для отгонки растворителей и упаривают на вакуумном
ротационном испарителе при температуре бани не более 40 °C до 2 мл. В эту же
колбу переносят экстракт, полученный от промывки аллонжа. Аллонж с
пенополиуретановой крошкой промывают смесью н-гексана
с ацетоном (3:1). Для этого конец аллонжа, который был присоединен со стороны фильтродержателя, опускают в колбу для отгонки
растворителей, а к противоположному концу присоединяют встык воронку и
промывают сорбент 40 - 50 мл смеси, собирая экстракт в колбу. Растворитель
отгоняют, как описано выше, до 2 - 3 мл. Остаток растворителя отгоняют под
вакуумом при комнатной температуре до 0,5 мл и переносят в мерную пробирку со
шлифом, ополаскивая колбу н-гексаном. Доводят объем в
пробирке до 1 мл.
Условия газохроматографического анализа.
Используют ТИД. Пробы
вводят через
самоуплотняющуюся мембрану. Скорость потока, мл/мин.:
газа-носителя -
23, водорода - 14 - 17, воздуха -
400. Скорость
-10
движения диаграммной ленты 240 мм/ч. Шкала
электрометра 2 x 10
А. Объем
вводимой пробы 5 мкл.
При использовании в
качестве неподвижной фазы 5% SE-30 температура колонки 190 °C, испарителя - 210
°C, линейный диапазон детектирования 0,5 - 10 нг,
время удерживания 4 мин. 30 с. При использовании в качестве неподвижной фазы 5%
OV-1 температура колонки 225 °C, испарителя - 240 °C, линейный диапазон
детектирования 1 - 15 нг, время удерживания 5 мин. 48
с.
Условия анализа методом тонкослойной
хроматографии. Экстракт после определения методом ГЖХ упаривают до 0,2 - 0,3 мл
и количественно наносят при помощи микропипетки на хроматографическую
пластинку "Силуфол" так, чтобы диаметр
пятна не превышал 0,5 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от
нижнего края пластинки. Пробирку с экстрактом 2 - 3 раза ополаскивают
небольшими порциями (по 0,2 - 0,3 мл) эфира, который также наносят в центр
первого пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см от нее наносят
стандартные растворы, содержащие 1, 3, 5 или 10 мкг препарата. Пластинку с
нанесенными растворами помещают в хроматографическую
камеру, в которую налита смесь н-гексана с ацетоном
(9:1). Время насыщения камер 30 мин. Край пластинки должен быть погружен в
раствор не глубже чем на 0,5 см. После поднятия фронта подвижного растворителя
на 10 см пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут на воздухе
для испарения растворителя. Затем пластинку опрыскивают одним из проявляющих
реагентов.
После
обработки реагентом на
основе AgNO (N 1) пластинку
3
помещают под
источник УФ-света
на 5 мин. до появления пятен серо-
черного цвета.
Нижний предел обнаружения релдана и
3,5,6-трихлор-2-пиридинола
0,3 мкг. Величина R релдана
составляет
f
0,52,
3,5,6-трихлор-2-пиридинола - 0,29.
После обработки бромфеноловым
реагентом пластинку оставляют на
5 мин.
на воздухе, а
затем опрыскивают раствором 5-процентной
уксусной или
2-процентной лимонной кислоты для
осветления фона.
Релдан проявляется в виде синего пятна на желтом фоне.
Величина R
f
равна 0,52, нижний
предел обнаружения 0,5 мкг;
3,5,6-трихлор-2-пиридинол
этим реагентом не обнаруживается.
Обработка результатов анализа. При
использовании метода ГЖХ количественное определение проводят методом абсолютной
калибровки. Для этого до и после анализа проб вводят в хроматограф по 5 мкл рабочих стандартных растворов, измеряют высоту пиков и
вычисляют среднее арифметическое из пяти определений. Если при введении в
хроматограф аликвотной части (5 мкл) конечного
экстракта пробы получают слишком большие пики или происходит "зашкаливание", пробу разбавляют н-гексаном.
Количественное определение при
использовании метода ТСХ проводят путем сравнения интенсивности окраски и
измерения площади пятна пробы и того стандарта, площадь пятна которого наиболее
близка по величине к площади пятна пробы.
Концентрацию препарата в пробе (X,
мг/куб. м) рассчитывают по формуле:
GH V
1 2
X = -------,
H V V
2 1 20
где:
G
- количество препарата
в хроматографируемом объеме
стандарта, нг;
H -
высота пика (или площадь пятна) на хроматограмме пробы,
1
мм (кв. мм);
H
- высота пика
(или площадь пятна)
на хроматограмме
2
стандарта, мм (кв. мм);
V - хроматографируемый объем пробы, мкл;
1
V -
общий объем анализируемого раствора, мл;
2
V -
объем воздуха, отобранный для
анализа и приведенный к
20
стандартным
условиям, л.
Требования безопасности. Следует соблюдать
правила безопасности при работе в химических лабораториях.