| Íà ãëàâíóþ | Êîíòàêòû | Ïîèñê íà òåêóùåé ñòðàíèöå: "Ctr+F" |


       Ñîäåðæàíèå áèáëèîòåêè:

 

Óòâåðæäåíû

Ìèíçäðàâîì ÑÑÑÐ

3 ÿíâàðÿ 1985 ã. N 3194-85

 

ÌÅÒÎÄÈ×ÅÑÊÈÅ ÓÊÀÇÀÍÈß

ÏÎ ÈÄÅÍÒÈÔÈÊÀÖÈÈ ÃÀÌÌÀ-ÃÕÖÃ, ÅÃÎ ÈÇÎÌÅÐÎÂ (ÀËÜÔÀ-, ÁÅÒÀ

È ÄÅËÜÒÀ-ÃÕÖÃ) È ÌÅÒÀÁÎËÈÒÎÂ (ÏÎËÈÕËÎÐÈÐÎÂÀÍÍÛÕ ÔÅÍÎËÎÂ)

 ÁÈÎËÎÃÈ×ÅÑÊÈÕ ÆÈÄÊÎÑÒßÕ (ÊÐÎÂÈ), ÎÐÃÀÍÀÕ, ÒÊÀÍßÕ È

ÑÓÁÊËÅÒÎ×ÍÛÕ ÔÐÀÊÖÈßÕ ÏÅ×ÅÍÈ ÒÅÏËÎÊÐÎÂÍÛÕ ÆÈÂÎÒÍÛÕ

ÌÅÒÎÄÎÌ ÒÎÍÊÎÑËÎÉÍÎÉ ÕÐÎÌÀÒÎÃÐÀÔÈÈ

 

Êðàòêàÿ õàðàêòåðèñòèêà ïðåïàðàòîâ ïðèâåäåíà â òàáëèöå 9.

 

Òàáëèöà 9

 

ÕÀÐÀÊÒÅÐÈÑÒÈÊÀ ÏÐÅÏÀÐÀÒÎÂ

 

┌──────────────────────────┬────────────┬───────────────────────┬──────────────┐

        Ïåñòèöèä          │Ìîëåêóëÿðíàÿ│    Òåìïåðàòóðà, °C    │Äàâëåíèå ïàðîâ│

                             ìàññà    ├─────────────┬─────────┤ïðè 20 °C, Ïà │

                                        ïëàâëåíèÿ  │ êèïåíèÿ │             

├──────────────────────────┼────────────┼─────────────┼─────────┼──────────────┤

│1,2,3,4,5,6-              │291         │112,8                 │4,0          

│Ãåêñàõëîðöèêëîãåêñàí,                                                    

│ãàììà-èçîìåð (ëèíäàí,                                                    

│ãàììà-ÃÕÖÃ)                                                              

│1,2,3,4,5,6-              │291         │157,5 - 158,5│         │2,67         

│Ãåêñàõëîðöèêëîãåêñàí,                                                    

│àëüôà-èçîìåð ÃÕÖà                                                       

│1,2,3,4,5,6-              │291         │309                   │6,67         

│Ãåêñàõëîðöèêëîãåêñàí,                                                    

│áåòà-èçîìåð ÃÕÖà                                                        

│1,2,3,4,5,6-              │291         │138 - 139             │2,67         

│Ãåêñàõëîðöèêëîãåêñàí,                                                    

│äåëüòà-èçîìåð ÃÕÖà                                                      

│4-Õëîðôåíîë (4-ÕÔ)        │128,5       │49,9         │217      │-            

│2,4-Äèõëîðôåíîë (2,4-ÄÕÔ) │163         │45           │210      │-            

│2,4,5-Òðèõëîðôåíîë        │197,5       │-            │-        │-            

│(2,4,5-ÒÕÔ)                                                              

│2,4,6-Òðèõëîðôåíîë        │197,5       │60           │246      │-            

│(2,4,6-ÒÕÔ)                                                              

│2,3,4,6-Òåòðàõëîðôåíîë    │221,5       │-            │-        │-            

│(2,3,4,6-ÒåÕÔ)                                                           

│2,3,4,5,6-Ïåíòàõëîðôåíîë  │226         │191          │310      │0,01         

│(ÏÕÔ)                                                                    

│Ãåêñàõëîðáåíçîë (ÃÕÁ)     │284,8       │231          │322      │-            

└──────────────────────────┴────────────┴─────────────┴─────────┴──────────────┘

 

Ïðèíöèï ìåòîäà. Ìåòîäèêà îñíîâàíà íà òîíêîñëîéíîì õðîìàòîãðàôè÷åñêîì îïðåäåëåíèè ãàììà-ãåêñàõëîðöèêëîãåêñàíà, åãî àëüôà-, áåòà- è äåëüòà-èçîìåðîâ è ìåòàáîëèòîâ ïðè ñîâìåñòíîì ïðèñóòñòâèè â áèîëîãè÷åñêîì ìàòåðèàëå òåïëîêðîâíûõ.

Ìåòðîëîãè÷åñêàÿ õàðàêòåðèñòèêà ìåòîäà ïðèâåäåíà â òàáëèöå 10. Ïðåäåëû îáíàðóæåíèÿ èçîìåðîâ è ìåòàáîëèòîâ ãåêñàõëîðöèêëîãåêñàíà óêàçàíû â òàáëèöå 11.

 

Òàáëèöà 10

 

ÌÅÒÐÎËÎÃÈ×ÅÑÊÀß ÕÀÐÀÊÒÅÐÈÑÒÈÊÀ

ÌÅÒÎÄÀ ÎÏÐÅÄÅËÅÍÈß ÈÇÎÌÅÐÎÂ ÃÕÖÃ È ÕËÎÐÔÅÍÎËÎÂ

ÒÎÍÊÎÑËÎÉÍÎÉ ÕÐÎÌÀÒÎÃÐÀÔÈÅÉ Â ÁÈÎÑÐÅÄÀÕ

 

┌─────────┬───────────────┬────────────┬───────────┬─────────────┬─────────────┐

Ïåñòèöèä │ Àíàëèçèðóåìûé │  Ñðåäíåå   │Ñòàíäàðòíîå│Îòíîñèòåëüíîå│Äîâåðèòåëüíûé│

             îáúåêò       çíà÷åíèå  │îòêëîíåíèå,│ ñòàíäàðòíîå │  èíòåðâàë, 

                        │îïðåäåëåíèÿ,│   +/- %   │îòêëîíåíèå, %│    +/- %   

                             %                                          

├─────────┼───────────────┼────────────┼───────────┼─────────────┼─────────────┤

│ÃÕÁ      │Êðîâü          │44,00       │5,47       │0,12         │6,78        

         │Ïî÷êè          │59,40       │16,79      │0,28         │20,81       

         │Ïå÷åíü         │53,40       │14,52      │0,27         │17,99       

         │Ñåðäöå         │63,00       │7,42       │0,12         │9,20        

         │Ìîçã           │93,00       │15,65      │0,17         │19,39       

         │Æèð            │53,50       │19,64      │0,37         │24,34       

         │Ìèòîõîíäðèè    │83,33       │10,79      │0,13         │26,84       

         │ßäðà           │90,00       │7,07       │0,08         │17,59       

         │Ïîñòìèêðîñî-   │85,00       │11,18      │0,13         │27,81       

         │ìàëüíàÿ ôðàêöèÿ│                                                

│àëüôà-   │Êðîâü          │50,00       │0          │0            │0           

│ÃÕÖà    │Ïî÷êè          │59,03       │6,01       │0,10         │14,95       

         │Ïå÷åíü         │27,77       │11,82      │0,42         │29,40       

         │Ñåðäöå         │79,37       │12,62      │0,17         │31,39       

         │Ìîçã           │55,56       │11,82      │0,21         │29,40       

         │Æèð            │41,67       │0          │0            │0           

         │ßäðà           │86,67       │15,99      │0,18         │39,77       

         │Ìèòîõîíäðèè    │86,67       │24,04      │0,28         │59,79       

         │Ìèêðîñîìàëüíàÿ │66,67       │12,47      │0,19         │31,02       

         │ôðàêöèÿ                                                        

         │Ïîñòìèêðîñî-   │70,00       │10,00      │0,14         │24,87       

         │ìàëüíàÿ ôðàêöèÿ│                                                

│ãàììà-   │Êðîâü          │50,00       │0          │0            │0           

│ÃÕÖà    │Ïî÷êè          │86,81       │6,01       │0,07         │14,95       

         │Ïå÷åíü         │27,77       │11,82      │0,42         │29,40       

         │Ñåðäöå         │62,50       │0          │0            │0           

         │Ìîçã           │69,45       │12,02      │0,17         │29,90       

         │Æèð            │41,67       │0          │0            │0           

         │ßäðà           │86,67       │5,76       │0,07         │14,33       

         │Ìèòîõîíäðèè    │90,00       │0          │0            │0           

         │Ìèêðîñîìàëüíàÿ │70,00       │10,00      │0,14         │24,87       

         │ôðàêöèÿ                                                        

         │Ïîñòìèêðîñî-   │80,00       │20,00      │0,25         │49,75       

         │ìàëüíàÿ ôðàêöèÿ│                                                

│áåòà-ÃÕÖÃ│Êðîâü          │80,00       │0          │0            │0           

         │Ïî÷êè          │83,34       │0          │0            │0           

         │Ïå÷åíü         │31,25       │10,01      │0,32         │24,90       

         │Ñåðäöå         │79,87       │6,94       │0,09         │17,26       

         │Ìîçã           │76,39       │12,02      │0,16         │29,90       

         │Æèð            │34,39       │12,04      │0,35         │29,95       

         │ßäðà           │96,67       │5,76       │0,06         │14,33       

         │Ìèòîõîíäðèè    │96,67       │5,57       │0,06         │13,85       

         │Ìèêðîñîìàëüíàÿ │70,00       │10,00      │0,14         │24,87       

         │ôðàêöèÿ                                                        

         │Ïîñòìèêðîñî-   │80,00       │20,00      │0,25         │49,75        

         │ìàëüíàÿ ôðàêöèÿ│                                                

│äåëüòà-  │Êðîâü          │56,67       │5,77       │0,10         │17,61       

│ÃÕÖà    │Ïî÷êè          │86,81       │6,01       │0,07         │14,95       

         │Ïå÷åíü         │41,67       │0          │0            │0           

         │Ñåðäöå         │55,56       │12,03      │0,22         │29,92       

         │Ìîçã           │48,61       │12,02      │0,25         │29,90       

         │Æèð            │52,09       │10,41      │0,20         │25,89       

         │ßäðà           │100,00      │0          │0            │0           

         │Ìèòîõîíäðèè    │93,33       │13,03      │0,14         │32,41       

         │Ìèêðîñîìàëüíàÿ │66,67       │12,47      │0,19         │31,02       

         │ôðàêöèÿ                                                        

         │Ïîñòìèêðîñî-   │80,00       │0          │0            │0           

         │ìàëüíàÿ ôðàêöèÿ│                                                

│ÏÕÔ      │Êðîâü          │36,67       │5,76       │0,16         │17,61       

         │Ïî÷êè          │26,48       │9,01       │0,35         │14,43       

         │Ïå÷åíü         │21,08       │2,83       │0,07         │2,93        

         │Ñåðäöå         │41,19       │5,35       │0,13         │5,61        

         │Ìîçã           │51,28       │10,00      │0,20         │24,87       

         │Æèð            │49,52       │5,12       │0,10         │6,35         

         │ßäðà           │16,00       │7,07       │0,44         │17,56       

         │Ìèòîõîíäðèè    │80,00       │20,00      │0,25         │49,75       

         │Ìèêðîñîìàëüíàÿ │32,00       │8,00       │0,25         │19,90       

         │ôðàêöèÿ                                                        

         │Ïîñòìèêðîñî-   │53,33       │24,04      │0,28         │59,79       

         │ìàëüíàÿ ôðàêöèÿ│                                                

│2,3,4,6- │Êðîâü          │41,67       │2,88       │0,07         │8,80        

│ÒåÕÔ     │Ïî÷êè          │71,43       │0          │0            │0           

         │Ïå÷åíü         │61,09       │9,08       │0,15         │22,58       

         │Ñåðäöå         │79,89       │13,06      │0,16         │13,71       

         │Ìîçã           │85,00       │18,71      │0,22         │23,19       

         │Æèð            │86,00       │21,91      │0,25         │27,15       

         │ßäðà           │36,67       │5,76       │0,16         │14,33       

         │Ìèòîõîíäðèè    │60,00       │20,00      │0,33         │49,75       

         │Ìèêðîñîìàëüíàÿ │17,33       │4,62       │0,27         │11,49       

         │ôðàêöèÿ                                                       

         │Ïîñòìèêðîñî-   │80,00       │34,64      │0,43         │86,16       

         │ìàëüíàÿ ôðàêöèÿ│                                                

│2,4,5-ÒÕÔ│Êðîâü          │40,00       │0          │0            │0           

         │Ïî÷êè          │78,17       │11,11      │0,14         │27,63       

         │Ïå÷åíü         │32,78       │10,46      │0,32         │16,64       

         │Ñåðäöå         │71,90       │7,45       │0,10         │9,23        

         │Ìîçã           │62,22       │7,97       │0,13         │19,82       

         │Æèð            │56,07       │7,92       │0,14         │12,60       

         │ßäðà           │40,00       │0          │0            │0           

         │Ìèòîõîíäðèè    │86,67       │12,47      │0,14         │31,02       

         │Ìèêðîñîìàëüíàÿ │16,00       │4,00       │0,25         │9,95        

         │ôðàêöèÿ                                                        

         │Ïîñòìèêðîñî-   │86,67       │12,47      │0,14         │31,02       

         │ìàëüíàÿ ôðàêöèÿ│                                                

│2,4-ÄÕÔ  │Êðîâü          │28,33       │2,82       │0,10         │8,61        

         │Ïî÷êè          │38,00       │7,42       │0,20         │9,20        

         │Ïå÷åíü         │44,00       │11,18      │0,25         │13,85       

         │Ñåðäöå         │36,00       │5,48       │0,15         │6,78        

         │Ìîçã           │30,00       │0          │0            │0           

         │Æèð            │40,00       │10,00      │0,25         │12,39       

         │ßäðà           │33,33       │12,47      │0,37         │31,02       

         │Ìèòîõîíäðèè    │57,33       │24,72      │0,43         │61,48       

         │Ìèêðîñîìàëüíàÿ │17,33       │4,62       │0,27         │11,49       

         │ôðàêöèÿ                                                        

         │Ïîñòìèêðîñî-   │66,67       │24,04      │0,36         │59,79       

         │ìàëüíàÿ ôðàêöèÿ│                                                

│4-ÕÔ     │Êðîâü          │37,50       │5,00       │0,13         │7,96        

         │Ïî÷êè          │30,00       │5,77       │0,19         │9,18        

         │Ïå÷åíü         │20,00       │10,00      │0,50         │24,87       

         │Ñåðäöå         │37,50       │17,09      │0,46         │27,19       

         │Ìîçã           │40,00       │8,19       │0,20         │13,03       

         │Æèð            │35,00       │5,77       │0,16         │9,18        

         │Ñóáêëåòî÷íûå   │44,00       │12,00      │0,27         │29,85       

         │ôðàêöèè ïå÷åíè │                                                

└─────────┴───────────────┴────────────┴───────────┴─────────────┴─────────────┘

 

Òàáëèöà 11

 

ÏÐÅÄÅËÛ ÎÁÍÀÐÓÆÅÍÈß ÃÀÌÌÀ-ÃÕÖÃ,

ÅÃÎ ÈÇÎÌÅÐÎÂ È ÌÅÒÀÁÎËÈÒÎÂ Â ÁÈÎÑÓÁÑÒÐÀÒÀÕ

 

┌───────────┬───────────────────────┐┌────────────┬───────────────────────┐

Ïåñòèöèä  │ Àíàëèçèðóåìûé îáúåêò  ││  Ïåñòèöèä  │ Àíàëèçèðóåìûé îáúåêò 

           ├───────────────┬───────┤│            ├───────────────┬───────┤

                êðîâü,    │îðãàíû,││                 êðîâü,    │îðãàíû,│

             ñóáêëåòî÷íûå │òêàíè, ││              ñóáêëåòî÷íûå │òêàíè, │

           │ôðàêöèè ïå÷åíè,│ ìã/êã ││            │ôðàêöèè ïå÷åíè,│ ìã/êã │

                 ìã/ë            ││                  ìã/ë           

├───────────┼───────────────┼───────┤├────────────┼───────────────┼───────┤

│ÃÕÁ        │0,02           │0,1    ││2,3,4,6-ÒåÕÔ│0,01           │0,05  

│àëüôà-ÃÕÖà │0,1            │0,5    ││2,4,6-ÒÕÔ   │0,01           │0,05  

│ãàììà-ÃÕÖà │0,1            │0,5    ││2,4,5-ÒÕÔ   │0,01           │0,05  

│áåòà-ÃÕÖà │0,1            │0,5    ││2,4-ÄÕÔ     │0,02           │0,1   

│äåëüòà-ÃÕÖÃ│0,1            │0,5    ││4-ÕÔ        │0,02           │0,1   

│ÏÕÔ        │0,01           │0,05   ││                                 

└───────────┴───────────────┴───────┘└────────────┴───────────────┴───────┘

 

Èçáèðàòåëüíîñòü ìåòîäà. Ìåòîä èçáèðàòåëåí â ïðèñóòñòâèè ÃÕÁ, ÃÕÏÊ, ÃÏÕ, 2,4'- è 4,4'-ÄÄÒ, ÄÄÄ, ÄÄÝ è íåêîòîðûõ äðóãèõ ÕÎÏ.

Ðåàêòèâû è ðàñòâîðû. Àöåòîí ÷. í-Ãåêñàí ÷. Ñïèðò ýòèëîâûé ðåêòèô. 2-Ôåíîêñèýòàíîë ÷. Àììèàê âîäíûé 25-ïðîöåíòíûé ÷. Ïåðîêñèä âîäîðîäà ÷. Ñóëüôàò íàòðèÿ áåçâîäíûé ÷. (ïðîêàëåííûé). Õëîðèä íàòðèÿ õ.÷. Íèòðàò ñåðåáðà õ.÷.

Ïðîÿâëÿþùèå ðåàãåíòû. N 1: ê ðàñòâîðó 0,5 ã íèòðàòà ñåðåáðà â 5 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû äîáàâëÿþò 7 - 10 ìë 25-ïðîöåíòíîãî âîäíîãî àììèàêà. Ïîëó÷åííóþ ñìåñü ðàçáàâëÿþò àöåòîíîì äî 100 ìë è ïåðåìåøèâàþò. Õðàíÿò â ñêëÿíêå òåìíîãî ñòåêëà.

N 2: ê ðàñòâîðó 0,1 ã íèòðàòà ñåðåáðà â 1 ìë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû äîáàâëÿþò 10 ìë 2-ôåíîêñèýòàíîëà, 190 ìë àöåòîíà, 1 - 2 êàïëè ïåðîêñèäà âîäîðîäà, òùàòåëüíî ïåðåìåøèâàþò. Õðàíÿò â ñêëÿíêå òåìíîãî ñòåêëà.

Ñòàíäàðòíûå ðàñòâîðû ïðåïàðàòîâ â í-ãåêñàíå ñ êîíöåíòðàöèåé 100 è 10 ìêã/ìë õðàíÿò â õîëîäèëüíèêå â ïîñóäå ñ ïðèøëèôîâàííûìè ïðîáêàìè.

    Ïðèáîðû  è  ïîñóäà.  Àïïàðàò  äëÿ  âñòðÿõèâàíèÿ. Áàíÿ âîäÿíàÿ.

Èñïàðèòåëü   ðîòàöèîííûé  ÈÐ-1Ì.  Ìèêðîèçìåëü÷èòåëü  òêàíåé  ÐÒ-2.

Îáëó÷àòåëü    ðòóòíî-êâàðöåâûé    íàñòîëüíûé   ÎÊÍ-11.   Óñòàíîâêà

êîìïðåññîðíàÿ.  Öåíòðèôóãà ëàáîðàòîðíàÿ êëèíè÷åñêàÿ ÎÏÍ-3. Âîðîíêè

äåëèòåëüíûå   è   êîíè÷åñêèå.  Êàìåðû  õðîìàòîãðàôè÷åñêèå.  Êîëáû:

êîíè÷åñêèå,    ãðóøåâèäíûå    íà   øëèôå,   ìåðíûå.   Ìèêðîïèïåòêè

âìåñòèìîñòüþ  0,1 ìë. Ìèêðîøïðèöû íà 10 ìêë ÌØ-10. Ïèïåòêè ìåðíûå.

Ïðîáèðêè  ìåðíûå  íà  øëèôå.  Ïóëüâåðèçàòîðû  ñòåêëÿííûå. Öèëèíäðû

ìåðíûå.  Ïëàñòèíêè  õðîìàòîãðàôè÷åñêèå  ñòàíäàðòíûå  "Ñèëóôîë" èëè

"Êèçåëüãåëü 60" F    ðàçìåðîì 20 x 20 ñì.

                 254

Îòáîð è õðàíåíèå ïðîá. Ïðîáû îòáèðàþò â ëàáîðàòîðíûõ óñëîâèÿõ è ñðàçó æå ïîìåùàþò â èñïàðèòåëüíóþ êàìåðó õîëîäèëüíèêà (õðàíÿò íà ëüäó íå äîëüøå 5 ñóò.).

Õîä àíàëèçà. Ýêñòðàêöèÿ. Ñóùåñòâóþò äâà ñïîñîáà ýêñòðàêöèè ïðåïàðàòà èç ïðîá êðîâè.

1. Öåëüíóþ êðîâü (1 - 5 ìë) ïîìåùàþò â ìåðíóþ ïðîáèðêó íà øëèôå, ïðèëèâàþò 3 - 5 ìë í-ãåêñàíà, ïåðåìåøèâàþò è äàëåå ýêñòðàãèðóþò íà àïïàðàòå äëÿ âñòðÿõèâàíèÿ ñî ñðåäíåé èíòåíñèâíîñòüþ â òå÷åíèå 5 - 7 ìèí.

Ïîñëå ðàçäåëåíèÿ ñëîåâ ãåêñàíîâûé ýêñòðàêò (âåðõíèé ñëîé) îòäåëÿþò ñ ïîìîùüþ ïèïåòêè, ñîåäèíåííîé ñ ðåçèíîâîé ãðóøåé, è ôèëüòðóþò ÷åðåç ñëîé áåçâîäíîãî ñóëüôàòà íàòðèÿ, ïîìåùåííîãî â êîíè÷åñêóþ âîðîíêó ñ ïîäëîæêîé èç îáåçæèðåííîé âàòû. Ýêñòðàêöèþ ïîâòîðÿþò, ýêñòðàêòû îáúåäèíÿþò.

Åñëè îáðàçóåòñÿ óñòîé÷èâàÿ ýìóëüñèÿ è ôàçû ðàçäåëèòü òðóäíî, â ïðîáèðêó âíîñÿò íåñêîëüêî êàïåëü ýòàíîëà èëè 0,1 - 0,2 ã (íà êîí÷èêå ñêàëüïåëÿ) õëîðèäà íàòðèÿ.

2. Ïðîáó êðîâè (1 - 5 ìë) òùàòåëüíî ðàñòèðàþò ñ èçáûòî÷íûì êîëè÷åñòâîì áåçâîäíîãî ñóëüôàòà íàòðèÿ (äî ñûïó÷åãî ñîñòîÿíèÿ). Ïîìåùàþò â ïëîñêîäîííóþ êîëáó íà øëèôå è ýêñòðàãèðóþò í-ãåêñàíîì, âçÿòûì â 1,5-êðàòíîì ïî îòíîøåíèþ ê ãîìîãåíàòó îáúåìå. Ýêñòðàêò îñòîðîæíî äåêàíòèðóþò, äîïîëíèòåëüíî ôèëüòðóÿ ÷åðåç ñëîé áåçâîäíîãî ñóëüôàòà íàòðèÿ.

Ïðîáó ñóáêëåòî÷íîé ôðàêöèè ýêñòðàãèðóþò í-ãåêñàíîì (ñì. ñïîñîá 1 äëÿ êðîâè). Ïðè îáðàçîâàíèè óñòîé÷èâîé ýìóëüñèè ñëåäóåò ïðîâåñòè öåíòðèôóãèðîâàíèå ñìåñè ïðè 3000 - 5000 îá./ìèí. â òå÷åíèå 3 - 5 ìèí.

Ãåêñàíîâûé ýêñòðàêò îòäåëÿþò è ôèëüòðóþò ÷åðåç ñëîé áåçâîäíîãî ñóëüôàòà íàòðèÿ. Ýêñòðàêöèþ ïîâòîðÿþò, ýêñòðàêòû îáúåäèíÿþò.

Íàâåñêó îðãàíîâ è òêàíåé (ïå÷åíè, ïî÷åê, ñåðäöà è äð.) òùàòåëüíî èçìåëü÷àþò íîæíèöàìè, çàòåì ïîìåùàþò â òåôëîíîâóþ ïðîáèðêó, çàëèâàþò í-ãåêñàíîì (5 ìë ðàñòâîðèòåëÿ íà 1 ã ïðîáû) è ãîìîãåíèçèðóþò íà ìèêðîèçìåëü÷èòåëå òêàíåé ïðè 3000 - 5000 îá./ìèí. â òå÷åíèå 5 ìèí. Ýêñòðàêò äåêàíòèðóþò ÷åðåç ñëîé áåçâîäíîãî ñóëüôàòà íàòðèÿ â ïðèåìíóþ êîëáó. Ýêñòðàêöèþ ïîâòîðÿþò, ýêñòðàêòû îáúåäèíÿþò.

Êîíöåíòðèðîâàíèå ýêñòðàêòîâ ïðîâîäÿò â âàêóóìå íà ðîòàöèîííîì èñïàðèòåëå ïðè òåìïåðàòóðå âîäÿíîé áàíè 35 - 38 °C, çàòåì â òîêå àçîòà îñîáîé ÷èñòîòû äî îáúåìà 0,1 - 0,2 ìë.

    Õðîìàòîãðàôèðîâàíèå  â  òîíêîì ñëîå ñîðáåíòà. Àëèêâîòíóþ ÷àñòü

(0,1 ìë) ýêñòðàêòà ñ ïîìîùüþ ìèêðîïèïåòêè (ìèêðîøïðèöà) íàíîñÿò íà

õðîìàòîãðàôè÷åñêóþ  ïëàñòèíêó  "Ñèëóôîë" èëè "Êèçåëüãåëü 60" F   .

                                                              254

Ðÿäîì  ñ ïðîáîé íàíîñÿò ðàçëè÷íûå êîëè÷åñòâà ñòàíäàðòíûõ ðàñòâîðîâ

èçîìåðîâ  ÃÕÖÃ, õëîðèðîâàííûõ ôåíîëîâ (ïî 0,2; 1; 2; 5 ìêã êàæäîãî

êîìïîíåíòà).

    Ïëàñòèíêó   ïîìåùàþò   â   êàìåðó   äëÿ   õðîìàòîãðàôèðîâàíèÿ,

ñîäåðæàùóþ   ñìåñü   í-ãåêñàíà   ñ   àöåòîíîì  â  ñîîòíîøåíèè  4:1

("Ñèëóôîë") èëè 6:1 ("Êèçåëüãåëü 60" F   ). Âðåìÿ íàñûùåíèÿ êàìåðû

                                      254

30 ìèí.

Ïîñëå õðîìàòîãðàôèðîâàíèÿ (äëèíà ïðîáåãà ðàñòâîðèòåëÿ 15 - 17 ñì) ïëàñòèíêó ïðîâåòðèâàþò â ãîðèçîíòàëüíîì ïîëîæåíèè, à çàòåì îáðàáàòûâàþò îäíèì èç ïðîÿâëÿþùèõ ðåàãåíòîâ ñ ïîìîùüþ ïóëüâåðèçàòîðà, ïîäêëþ÷åííîãî ê âîçäóøíîìó êîìïðåññîðó.

    Çîíû   ëîêàëèçàöèè   ãàììà-,   àëüôà-,  áåòà-  è  äåëüòà-ÃÕÖÃ,

ïåíòàõëîðôåíîëà,       2,3,4,6-òåòðàõëîðôåíîëà,      2,4,6-      è

2,4,5-òðèõëîðôåíîëà, 2,4-äèõëîðôåíîëà, 4-õëîðôåíîëà îáíàðóæèâàþòñÿ

íà  õðîìàòîãðàììàõ  ïîñëå  îáëó÷åíèÿ  ÓÔ-ñâåòîì â âèäå áóðûõ ïÿòåí

(âåëè÷èíû R  ïðèâåäåíû â òàáëèöå 12).

           f

 

                                                        Òàáëèöà 12

 

            ÂÅËÈ×ÈÍÛ R  ÈÇÎÌÅÐΠÃÅÊÑÀÕËÎÐÖÈÊËÎÃÅÊÑÀÍÀ

                      F

         È ÍÅÊÎÒÎÐÛÕ ÕËÎÐÈÐÎÂÀÍÍÛÕ ÔÅÍÎËÎÂ ÍÀ ÏËÀÑÒÈÍÊÀÕ

                 "ÑÈËÓÔÎË" È "ÊÈÇÅËÜÃÅËÜ 60" F

                                              254

 

┌─────────────────────────┬─────────────────────┬─────────────────────────┐

        Ïåñòèöèä         │"Êèçåëüãåëü 60" F   ,│"Ñèëóôîë", ïîäâèæíàÿ ôàçà│

                                          254 │  ãåêñàí - àöåòîí (4:1) 

                            ïîäâèæíàÿ ôàçà                            

                         │ãåêñàí - àöåòîí (6:1)│                         

├─────────────────────────┼─────────────────────┼─────────────────────────┤

│ÃÕÁ                      │0,96                 │-                       

│àëüôà-ÃÕÖà              │0,87                 │0,98                    

│ãàììà-ÃÕÖà              │0,79                 │0,81                    

│áåòà-ÃÕÖà               │0,73                 │0,77                    

│äåëüòà-ÃÕÖà             │0,64                 │0,74                    

│2,3,4,5,6-Ïåíòàõëîðôåíîë │0,18                 │0,69                    

│2,3,4,6-Òåòðàõëîðôåíîë   │0,39                 │0,71                    

│2,4,6-Òðèõëîðôåíîë       │0,57                 │0,73                    

│2,4,5-Òðèõëîðôåíîë       │0,43                 │0,68                     

│2,4-Äèõëîðôåíîë          │0,42                 │0,65                    

│4-Õëîðôåíîë              │0,34                 │0,60                    

└─────────────────────────┴─────────────────────┴─────────────────────────┘

 

Êîëè÷åñòâåííóþ îöåíêó ñîäåðæàíèÿ èçîìåðîâ ÃÕÖà è ïîëèõëîðèðîâàííûõ ôåíîëîâ â ïðîáå ïðîâîäÿò âèçóàëüíî èëè äåíñèòîìåòðè÷åñêè íà ïðèáîðå òèïà "Îïòîí".

Îñòàâøóþñÿ ÷àñòü ýêñòðàêòà ïðè íåîáõîäèìîñòè òàêæå ïîäâåðãàþò õðîìàòîãðàôèðîâàíèþ ïîñëå ýêñïðåññ-î÷èñòêè êîíöåíòðèðîâàííîé ñåðíîé êèñëîòîé.

Ê ýêñòðàêòó, êîëè÷åñòâåííî ïåðåíåñåííîìó â öåíòðèôóæíóþ ïðîáèðêó, ïðèáàâëÿþò 2 - 3 êàïëè êîíöåíòðèðîâàííîé ñåðíîé êèñëîòû, ïîñëå ÷åãî ñîäåðæèìîå âñòðÿõèâàþò. Ïîñëå ðàçäåëåíèÿ ôàç (÷åðåç 5 - 7 ìèí.) ýêñòðàêò íàíîñÿò ñ ïîìîùüþ ìèêðîïèïåòêè íà õðîìàòîãðàôè÷åñêóþ ïëàñòèíêó è äàëåå ïîñòóïàþò òàê æå, êàê îïèñàíî âûøå.  ýòîì ñëó÷àå îáíàðóæèâàþòñÿ âñå ïåðå÷èñëåííûå êîìïîíåíòû, êðîìå 4-õëîðôåíîëà.

Îáðàáîòêà ðåçóëüòàòîâ àíàëèçà. Ñîäåðæàíèå ãàììà-ÃÕÖÃ, åãî èçîìåðîâ è ìåòàáîëèòîâ â àíàëèçèðóåìîì îáúåêòå (X, ìã/êã, ìã/ë) ðàññ÷èòûâàþò ïî ôîðìóëå:

 

                                 AV

                                   2

                           X = K ---,

                                 V P

                                  1

 

    ãäå:

    K - ïîïðàâî÷íûé êîýôôèöèåíò, ïðèâåäåííûé â òàáëèöå 13;

    A  -  ñîäåðæàíèå ïðåïàðàòà, îáíàðóæåííîå â àëèêâîòå ýêñòðàêòà,

âçÿòîé äëÿ õðîìàòîãðàôèðîâàíèÿ, ìêã;

    V     -    îáúåì    àëèêâîòû    ýêñòðàêòà,    íàíåñåííîé    íà

     1

õðîìàòîãðàôè÷åñêóþ ïëàñòèíó, ìë;

    V  - êîíå÷íûé îáúåì ýêñòðàêòà, ìë;

     2

P - ìàññà (îáúåì) ïðîáû, ã (ìë).

 

Òàáëèöà 13

 

ÏÎÏÐÀÂÎ×ÍÛÉ ÊÎÝÔÔÈÖÈÅÍÒ Ê ÐÀÑ×ÅÒÀÌ ÑÎÄÅÐÆÀÍÈß ÃÀÌÌÀ-ÃÕÖÃ,

ÅÃÎ ÈÇÎÌÅÐÎÂ È ÌÅÒÀÁÎËÈÒÎÂ Â ÁÈÎÑÓÁÑÒÐÀÒÀÕ

 

┌────────────────┬───┬──────┬──────┬─────┬───────┬───┬────────┬──────┬──────┬────┬────┐

     Îáúåêò     │ÃÕÁ│àëüôà-│ãàììà-│áåòà-│äåëüòà-│ÏÕÔ│2,3,4,6-│2,4,6-│2,4,5-│2,4-│4-ÕÔ│

  èññëåäîâàíèÿ     │ ÃÕÖà │ ÃÕÖà │ÃÕÖà │ ÃÕÖà      ÒåÕÔ  │ ÒÕÔ  │ ÒÕÔ  │ÄÕÔ │<*> │

├────────────────┼───┼──────┼──────┼─────┼───────┼───┼────────┼──────┼──────┼────┼────┤

│Êðîâü           │2,3│2,0   │2,0   │1,7  │1,8    │2,7│2,4     │2,7   │2,5   │3,5 │2,7 │

│Ïî÷êè           │1,7│1,7   │1,2   │1,2  │1,2    │3,9│1,4     │1,4   │1,3   │2,6 │3,3 │

│Ïå÷åíü          │1,9│3,6   │3,6   │3,2  │2,4    │4,7│1,6     │1,2   │3,0   │2,3 │5,0 │

│Ñåðäöå          │1,6│1,3   │1,6   │1,3  │1,8    │2,4│1,1     │1,2   │1,4   │2,8 │2,7 │

│Ìîçã            │1,1│1,8   │1,4   │1,3  │2,0    │1,9│1,2     │1,2   │1,6   │3,3 │2,5 │

│Æèð             │1,9│2,4   │2,4   │2,9  │1,9    │2,0│1,8     │1,2   │1,8   │2,5 │2,8 │

│ßäðà            │1,1│1,2   │1,2   │1,0  │1,0    │6,0│2,7     │2,7   │2,5   │3,0 │2,3 │

│Ìèòîõîíäðèè     │1,2│1,2   │1,1   │1,0  │1,1    │1,3│1,7     │1,7   │1,2   │1,7 │2,3 │

│Ìèêðîñîìàëüíàÿ  │-  │1,5   │1,4   │1,4  │1,5    │3,1│2,9     │2,7   │6,0   │5,7 │2,3 │

│ôðàêöèÿ                                                                  

│Ïîñòìèêðîñîìàëü-│1,2│1,4   │1,3   │1,3  │1,3    │1,9│1,7     │1,2   │1,2   │1,5 │2,3 │

│íàÿ ôðàêöèÿ                                                              

└────────────────┴───┴──────┴──────┴─────┴───────┴───┴────────┴──────┴──────┴────┴────┘

 

--------------------------------

<*> Áåç ïðèìåíåíèÿ î÷èñòêè ýêñòðàêòà ñåðíîé êèñëîòîé.

 

Òðåáîâàíèÿ áåçîïàñíîñòè. Íåîáõîäèìî ñîáëþäàòü îáùåïðèíÿòûå ïðàâèëà áåçîïàñíîñòè ïðè ðàáîòå ñ îðãàíè÷åñêèìè ðàñòâîðèòåëÿìè è òîêñè÷íûìè âåùåñòâàìè. Íå äîïóñêàòü ïîïàäàíèÿ ïîëèõëîðèðîâàííûõ ôåíîëîâ íà êîæó!

 

 







ßíäåêñ öèòèðîâàíèÿ



Èíòåðíåò àðõèâ çàêîíîäàòåëüñòâà ÑÑÑÐ. Áîëåå 20000 íîðìàòèâíî-ïðàâîâûõ àêòîâ.
ÑÑÑÐ, Ñîþç Ñîâåòñêèõ Ñîöèàëèñòè÷åñêèõ ðåñïóáëèê, Ñîâåòñêàÿ âëàñòü, çàêîíîäàòåëüñòâî ÑÑÑÐ, Ëåíèí, Ñòàëèí, Ìàëåíêîâ, Õðóùåâ, Áðåæíåâ, Àíäðîïîâ, ×åðíåíêî, Ãîðáà÷åâ, èñòîðèÿ ÑÑÑÐ.

© LibUSSR.RU, 2011 - 2024