Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

3 января 1985 г. N 3187-85

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МОНУРОНА И ДИУРОНА В ЧАЕ

МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

 

1. Краткая характеристика препаратов

 

Физико-химические свойства фенилмочевинных гербицидов приведены в Методических указаниях по определению фенилмочевинных гербицидов в воде методом газожидкостной хроматографии.

 

2. Методика определения фенилмочевинных гербицидов

 

2.1. Основные положения

 

2.1.1. Принцип метода

Метод заключается в извлечении препаратов из исследуемых проб ацетоном, перераспределении в системе вода - хлороформ, кислотном гидролизе в ароматические амины, извлечении последних из водного раствора бензолом, получении производных для ГЖХ и определении методом ГЖХ. Производные получают, обрабатывая аликвоту бензольного экстракта ангидридом 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой или гептафтормасляной кислот.

 

                     CH      +

         ---        /  3    H           ---

    1. //   \\-NHCON     -------->    //   \\-NH

       \/___ /      \       H O       \/___ /   2

       / ---         CH      2        / ---

      R                3             R

       n                              n

 

                           F

                         (R CO) O

         ---                   2        ---        F

    2. //   \\-NH        -------->    //   \\-NHCOR

       \/___ /   2                    \/___ /

       / ---                          / ---

      R                              R

       n                              n

 

     F

    R  = C F , CF CF OCF

          3 7    2  2   3

 

    2.1.2.  Метрологическая характеристика метода при n = 5, р = 0,95  (при

                  -3

внесении 0,75 х 10   мг гербицидов) на 10 г сухого чая.

    Предел обнаружения:

    Монурона - 0,02 мг/кг

    Диурона - 0,03 мг/кг.

                                 _

    Среднее значение определения с, %:

    Монурона - 80

    Диурона - 94.

    Стандартное отклонение S , %:

                            n

    Монурон - 2,1

    Диурон - 3,0.

    Относительное стандартное отклонение S , %:

                                          z

    Монурон - 2,7

    Диурон - 3,9.

                                  S  х t

                                   n    альфа

    Доверительный интервал (С +/- -----------), %:

                                        _

                                      \/n

    Монурон 80 + 5

    Диурон 94 + 5.

2.1.3. Избирательность метода

Определению могут мешать соединения, дающие при гидролизе ароматические амины.

 

2.2. Реактивы и растворы

 

Ацетон, о.с.ч., ТУ 6-09-3513-75.

Хлороформ фарм., ГОСТ 20015-74, перегнанный.

Бензол, х.ч., ГОСТ 5955-81. Встряхивают 1 л бензола со 100 мл концентрированной серной кислоты, бензол промывают раствором соды и дистиллированной воды, сушат безводным сульфатом натрия и перегоняют.

н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.

Спирт этиловый 96-процентный, ТУ 6-09-1710-77.

Серная кислота концентрированная d = 1,82, ч., ГОСТ 4204-77.

Натрий гидроокись, х.ч., ГОСТ 4328-77, 15% раствор.

Натрий углекислый кислый, ч.д.а., ГОСТ 4201-79, 0,1% раствор.

Натрий сернокислый безводный, ч., ГОСТ 4166-76.

Ангидрид 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой или гептафтормасляной кислот. Для получения ангидрида полифторкарбоновые кислоты кипятят над равным объемом фосфорного ангидрида 3 часа, затем отгоняют ангидрид 3-трифторметокси-2,2,3,3-тетрафторпропионовой кислоты при 112 - 114°, ангидрид гептафтормасляной кислоты - при 108°.

    Азот, о.с.ч.,  ГОСТ 9293-74, или аргон, ч., высший сорт, содержание O -

                                                                         2

0,002%.

Хроматон N-AW-ДМСS (0,16 - 0,20 мм) с 5% ХЕ-60 (ЧССР).

Стандартные растворы фенилмочевин в этиловом спирте с концентрацией 0,1 мг/мл.

Стандартные растворы фенилмочевин в водно-этанольном растворе с концентрацией 0,50; 0,75; 1,00 мкг/мл готовят последовательным разбавлением водой стандартных растворов 0,1 мг/мл.

 

2.3. Приборы и посуда

 

Хроматограф "Цвет-106" (или любой другой с детектором по захвату электронов).

Колонка стеклянная 1 м х 3 мм.

Аппарат для встряхивания любого типа АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.

Ротационный испаритель вакуумный любого типа ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.

Баня металлическая или масляная

Термометры электроконтактные до 100° и 150°, ГОСТ 9871-75.

Воронки делительные емкостью 100 мл, тип УШ, ГОСТ 8613-75.

Колбы круглодонные емкостью 100 мл, тип КККШ, ГОСТ 10394-72.

Колбы плоскодонные конические емкостью 100 и 25 мл, тип КН, ГОСТ 10394-72.

Холодильники с водяным охлаждением, тип ХПТ-КШ, ГОСТ 9499-70.

Воронки фильтрующие (Шотта) диаметром 20 мм, тип ВФ, ГОСТ 9775-69.

Пробирки градуированные со шлифом емкостью 10 мл, тип ПГКШ, ГОСТ 10515-75.

Колбы мерные емкостью 50 мл, тип 1а, ГОСТ 1660-74.

Пипетки емкостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.

Микрошприцы на 10 мкл МШ-10М, ТУ 2-833-106.

Индикаторная бумага универсальная, ТУ 6-09-1181-71.

Бумажные фильтры.

 

2.4. Проведение определения

 

2.4.1. Отбор пробы

Отбор проб осуществляется в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов", утвержденными Зам. Главного государственного санитарного врача СССР за N 2051-79 от 21.08.1979. Шифр 3.4.4.3.9.1.

2.4.2. Экстракция

    Навеску  чая  (10  г)  помещают  в  плоскодонную колбу емкостью 100 мл,

приливают  40  мл   ацетона,  встряхивают  на аппарате  для  встряхивания в

течение  30  мин.,  отфильтровывают  через  бумажный фильтр. Колбу и фильтр

дважды   промывают   10  мл  ацетона.  Объединенный  экстракт  отгоняют  на

ротационном  испарителе  при 50° до нескольких капель. Остаток растворителя

удаляют в токе воздуха, добавляют 3 мл концентрированной H SO , выдерживают

                                                          2  4

30  мин., приливают 20 мл 15% NaOH и экстрагируют хлороформом  порциями  10

мл  и  два  раза  по  5  мл. Экстракты объединяют и отгоняют на ротационном

испарителе при температуре бани 50° до нескольких капель, которые удаляют в

токе воздуха.

2.4.3. Гидролиз и количественное определение

Приливают в колбы 4,5 мл воды и 0,5 мл концентрированной серной кислоты, выдерживают с обратным холодильником при температуре бани 120° 1,5 часа, охлаждают, смывают стенки и шлиф холодильника 5 мл воды, переносят в делительную воронку и промывают 5 мл бензола при энергичном встряхивании. Водный слой сливают в колбу, приливают 5 мл бензола и нейтрализуют при охлаждении 15% раствором гидроокиси натрия до рН 10, контролируя по универсальной индикаторной бумаге. Закрывают колбу притертой пробкой и энергично встряхивают в течение минуты, затем переливают содержимое колбы в делительную воронку. Отделяют бензольный слой и фильтруют его через 0,5 см слой безводного сульфата натрия, засыпанного в воронку Шотта. К фильтрату добавляют микрошприцем 5 мкл реагента - ангидрида полифторкарбоновой кислоты, через 5 мин. добавляют 10 мл 0,1% раствора натрия углекислого кислого и встряхивают. Отделяют бензольный слой, добавляют 1 г безводного сульфата натрия, отбирают и вводят 5 мкл раствора в хроматограф.

 

2.5. Условия хроматографирования

 

Газ-носитель - аргон ч. При разработке методики в качестве газа-носителя использовали аргон ч., при использовании азота о.с.ч. чувствительность детектирования увеличивается в 4 - 5 раз.

Скорость газа-носителя через колонку - 45 мл/мин.

Скорость газа-носителя на продувку детектора - 150 мл/мин.

    Температура  испарителя - 250°, детектора - 250°, температура колонки -

160°.

                                       -12

    Рабочая шкала  электрометра 20 х 10    А  при использовании в  качестве

                               -12

газа-носителя аргона и 100 х 10    - при использовании азота о.с.ч.

Скорость диаграммной ленты потенциометра - 240 мм/ч.

 

Времена удерживания  гексахлорбензол         монурон            диурон

                                    (производные гептафтормасляной кислоты)

 

абсолютные (с)              76                 80                212

относительные               1                  1,05              2,79

 

Линейность сигнала детектора сохраняется до содержания анилидов во вводимой пробе, равного 1 нг, при больших концентрациях раствор необходимо разбавлять.

 

2.6. Обработка результатов анализа

 

Количественное определение проводят по калибровочному графику. Для построения калибровочного графика в серию колб вносят по 1 мл стандартного раствора фенилмочевины, содержащего 0,50; 0,75; 1,00 мкг гербицида, приливают 3,5 мл воды и 0,5 мл серной кислоты и проводят гидролиз, ацилирование, ГЖК-анализ так, как описано выше. Строят график зависимости:

 

H = f(C),

 

где:

Н - высота пика, мм;

С - содержание гербицида в стандартном растворе, мкг.

Содержание гербицида в анализируемой пробе вычисляют по уравнению:

 

                                      А

                                  Х = -,

                                      Р

 

где:

Х - содержание препарата в анализируемой пробе, мг/кг;

А - количество гербицида, найденное по калибровочному графику, мкг;

Р - количество анализируемой пробы, г.

 

3. Требования безопасности

 

Соблюдаются обычные требования по технике безопасности, необходимые при работе с органическими растворителями, кислотами и щелочами. Работа с ангидридами полифторкарбоновых кислот производится в вытяжном шкафу.

 

4. Методические указания подготовлены: Г.С. Куликовой, к.х.н. В.Е. Кириченко, д.х.н. К.И. Пашкевичем.

По материалам института химии УНЦ АН СССР, г. Свердловск.