Утверждены
Минздравом СССР
31 июля 1984 г. N 3067-84
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ЦИАНОКСА В МЕДЕ МЕТОДОМ
ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
--------------------------------
<*> Разработаны В.И. Ярошенко
(ЦНИИЭВ).
Краткая
характеристика препарата. Цианокс - О,О-диметил-О-
(4-цианофенил) тиофосфат.
Брутто-формула C H NO SP. Молекулярная
масса
9
10 3
370,5.
Общепринятое название - цианофос. Действующее вещество
представляет
собой жидкость
светло-желтого цвета, т.
пл. 14 - 15 °C. Цианокс
практически нерастворим в воде,
хорошо растворим в
спиртах, кетонах,
ароматических углеводородах. Применяется в качестве инсектоакарицида на
плодовых, цитрусовых
и технических культурах. ДСД 0,003 мг/кг.
Принцип метода. Метод основан на
извлечении цианокса из водного раствора меда гексаном, разрушении эмульсии спиртом и определении
хроматографией в тонком слое оксида алюминия.
Метрологическая характеристика метода.
Предел обнаружения 0,5 мкг. Предел определения 0,05 мг/кг. Среднее значение
определения стандартных количеств цианокса 85%.
Стандартное отклонение +/- 8,12%; доверительный интервал среднего (при p = 0,05
и n = 9) +/- 8,29%.
Избирательность метода. Метод избирателен
в присутствии ХОП, так как под воздействием УФ-лучей
пятна цианокса исчезают, а пятна ХОП остаются.
Реактивы и растворы. Алюминия оксид II
степени активности. Аммиак водный ч.д.а,
25-процентный. Гексан х.ч. Кальция сульфат ч.д.а.,
прокаленный при 160 °C в течение 6 ч. Натрия сульфат безводный ч.д.а. Пергидроль х.ч.,
30-процентный водный раствор. Серебра нитрат ч.д.а.
Спирт этиловый ректиф. Цианокс
х.ч. или технический препарат.
Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания.
Весы торсионные. Камеры хроматографические. Камеры
для опрыскивания хроматограмм. Пластинки стеклянные
для хроматографии размером 9 х 12 см. Посуда химическая (колбы на 100 мл,
воронки делительные, пипетки, стаканы химические, цилиндры мерные). Опрыскиватели
стеклянные. Термостат или сушильный шкаф. Чашки для выпаривания. Флакончики с
притертыми пробками. Микропипетки на 0,1 и 0,2 мл.
Подготовка к определению. Для
приготовления стандартного раствора цианокса препарат
(10 мг) растворяют в 100 мл ацетона (содержание пестицида составляет 100 мкг в
1 мл). Хранят на холоде в плотно закрытой посуде.
Для приготовления проявляющего реагента
нитрат серебра (0,1 г) растворяют в 1 мл дистиллированной воды, приливают 1,25
мл аммиака и 30 мл ацетона. Затем к раствору добавляют 0,1 мл пергидроля.
Раствор готовят в день проведения анализа. На одну пластинку требуется 6 - 8 мл
проявляющего реагента.
Для приготовления хроматографических
пластинок стеклянные пластинки моют хромовой смесью, затем водопроводной и
дистиллированной водой и высушивают. Перед нанесением сорбента их протирают
спиртом. Для приготовления сорбционной массы 50 г оксида алюминия, просеянного
через сито 100 меш, смешивают в фарфоровой ступке с 5 г сульфата кальция,
переносят в колбу и прибавляют 75 мл дистиллированной воды. Смесь встряхивают
20 мин. до образования однородной массы, 8 - 10 г ее наносят на пластинку.
Сушат пластинки с нанесенным сорбентом в строго горизонтальном положении в
течение 12 - 18 ч при комнатной температуре, хранят в эксикаторе.
Ход анализа. Экстракция. Навеску меда (10
г) помещают в химический стакан, растворяют в 20 мл дистиллированной воды и
переносят в делительную воронку. Затем приливают 90 мл гексана,
встряхивают воронку в течение 2 мин. и оставляют на 5 мин. для разделения
жидкостей. Нижний (водный) слой отбрасывают, а к верхнему для разрушения
эмульсии добавляют 0,5 мл 96-процентного этанола. Через 5
мин. делительную воронку 4 - 5 раз энергично встряхивают и, после того как
верхний слой станет светлым, нижний отбрасывают, а содержимое воронки переносят
в чистый химический стакан и сушат 10 - 15 г безводного сульфата натрия 15 - 20
мин. Затем растворитель упаривают в вакуумном ротационном испарителе или в токе
теплого воздуха от электротепловентилятора
(температура воздуха возле чашек не должна превышать 40 °C) до
небольшого объема или оставляют на ночь под вытяжкой. Досуха остаток гексана упаривают при комнатной температуре, затем
содержимое растворяют в 0,5 мл гексана, количественно
переносят в мерную центрифужную пробирку и наносят на
пластинку.
Хроматография в тонком слое. Гексановый экстракт с помощью микрошприца
или микропипетки наносят на хроматографическую
пластинку на расстоянии 1,5 см от ее нижнего края. Диаметр пятна не должен
превышать 1 см. Рядом с опытной пробой наносят известные количества цианокса в ацетоне. Пластинку с пробой и стандартными
растворами цианокса ставят левым краем в хроматографическую камеру с гексаном.
После прохождения фронта растворителя через всю пластинку ее вынимают из камеры
и оставляют на несколько минут для испарения гексана.
Затем пластинку хроматографируют в системе подвижных
растворителей гексан-ацетон (7:1), повернув ее на
90°. После подъема растворителей до линии фронта пластинку вынимают из камеры и
оставляют на воздухе на 5 - 10 мин.
После
испарения растворителей пластинку
ставят в камеру
для
опрыскивания, обрабатывают
проявляющим реагентом и сразу
же помещают на
10 мин. в
термостат с температурой 36 - 40 °C. Цианокс
проявляется в виде
темно-серых
пятен на белом фоне с R 0,58 - 0,60.
f
Обработка результатов анализа.
Количественное определение проводят, сравнивая интенсивность окраски и величину
пятна пробы и стандартных растворов цианокса. Для
расчета содержания цианокса в образце (X, мг/кг)
используют формулу:
AV
2
X = ---,
V P
1
где:
A
- содержание цианокса в хроматографируемом
объеме стандартного
раствора, мкг;
V -
площадь пятна на хроматограмме стандартного раствора,
кв. мм;
1
V -
площадь пятна на хроматограмме пробы, кв. мм;
2
P - масса анализируемой пробы, г.
Требования безопасности. Соблюдают
общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и
токсичными веществами.