Утверждены

Минздравом СССР

24 августа 1983 г. N 2852-83

 

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ

ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТРИМОРФАМИДА

В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ

 

    Краткая   характеристика   препарата.   Триморфамид   -  N-(1-

формамидо-2,2,2-трихлорэтил)морфолин. Брутто-формула C H  Cl N O .

                                                      7 11  3 2 2

Молекулярная масса 261,4. Синонимы - трифоран, фадеморф.

Триморфамид - белое кристаллическое вещество. Растворимость, г/л: в воде - 3; толуоле - 100; ацетоне - 600; этаноле - 1200. Т. пл. 116 - 117 °C.

В воздухе может находиться в виде паров и аэрозоля. ОБУВ в воздухе рабочей зоны 0,3 мг/куб. м.

Принцип метода. Метод основан на газожидкостной хроматографии с использованием ДПР и в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации препарата путем обработки реактивом Драгендорфа.

Пробы отбирают с концентрированием (бумажный фильтр "синяя лента", стеклянный фильтр с пористой пластинкой, вода дистиллированная).

Метрологическая характеристика метода. Нижний предел измерения триморфамида в анализируемом объеме раствора 3 нг (ГЖХ), 3 мкг (ТСХ), в воздухе - 0,06 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 мг/куб. м (ТСХ) (при отборе 20 л воздуха). Диапазон измеряемых концентраций 0,06 - 1 мг/куб. м (ГЖХ), 0,3 - 2 мг/куб. м (ТСХ). Граница суммарной погрешности измерения 12,6% (ГЖХ), 17,2% (ТСХ).

Избирательность метода. Определению не мешают наполнители технического препарата.

Реактивы и растворы. Ацетон ч. Безводный сульфат натрия ч. Хлороформ х.ч. Фильтры бумажные беззольные "синяя лента". Стеклянный фильтр с пористой пластинкой (фильтр Шотта) N 2 (40 мк). Стандартный раствор триморфамида N 1, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с притертой пробкой в 100 мл ацетона. Хранят в холодильнике не более 2 мес.

К методу ТСХ. Гексан ч. Нитрат висмута основной ч. Винная кислота ч. Йодид калия х.ч. Сульфат кальция ч.д.а. Силикагель ЛС 5/40 мю + 13% гипса.

Подвижная фаза: гексан - ацетон (1:1).

Проявляющий реагент (реактив Драгендорфа). Готовят раствор А: 1,7 г основного нитрата висмута растворяют в 80 мл дистиллированной воды и добавляют 20 г винной кислоты. Раствор Б: 16 г йодида калия растворяют в 40 мл дистиллированной воды. Растворы А и Б смешивают в равных объемах. При хранении в темном прохладном месте раствор стоек в течение года. Рабочий раствор: для обработки одной пластинки отбирают 1 мл приготовленного основного раствора, прибавляют 2 г винной кислоты и разбавляют 10 мл дистиллированной воды.

К методу ГЖХ. Неподвижная фаза - 15% карбовакса 20 М на хроматоне N-AW (0,16 - 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты.

Стандартный раствор N 2. Для приготовления раствора с концентрацией 5 мкг/мл вносят 5 мл раствора N 1 (100 мкг/мл) в мерную колбу на 100 мл и доводят до метки ацетоном. Хранят в холодильнике не дольше двух недель.

Приборы и посуда. Электроаспиратор для отбора проб воздуха. Фильтродержатели. Поглотительный прибор Зайцева. Ротационный вакуумный испаритель для отгонки растворителей. Водяная баня. Воронки делительные на 100 и 200 мл. Колбы: конические вместимостью 100 мл; грушевидные; мерные на 25 мл. Воронки химические диаметром 6 см. Цилиндры мерные на 50 мл.

К методу ТСХ. Камера хроматографическая. Пульверизатор стеклянный. Пластинки стеклянные (9 x 12 см). Для приготовления пластинок 14 г силикагеля ЛС 5/40 мю смешивают с 1 г гипса, тщательно растирают, добавляют 40 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают. Полученную однородную массу наносят на 6 - 7 пластинок размером 9 x 12 см (пластинки предварительно обезжиривают).

К методу ГЖХ. Хроматограф с ДПР или ДЭЗ. Микрошприцы. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм.

Отбор проб. Воздух со скоростью 1 л/мин. последовательно аспирируют через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр "синяя лента" (стеклянный фильтр Шотта) и для поглощения паров - через поглотительный прибор, содержащий дистиллированную воду, в течение 20 мин. Для определения 1/2 ОБУВ следует отобрать 20 л воздуха (при определении методом ТСХ) или 10 л (при определении методом ГЖХ). Длительность хранения проб в холодильнике не более 2 сут.

Ход анализа. Бумажный фильтр помещают в коническую колбу и заливают 20 мл ацетона. Экстрагируют пестицид из фильтра в течение 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют ацетоновый экстракт, сушат безводным сульфатом натрия и переносят в колбу для отгонки растворителя.

Дистиллированную воду из поглотителя переносят в делительную воронку и дважды экстрагируют хлороформом порциями по 10 мл, объединяют органический слой, сушат безводным сульфатом натрия и сливают в колбу для отгонки растворителей. Отгоняют органический растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл при температуре бани не выше 50 °C. Досуха упаривают на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и определяют методами ГЖХ и ТСХ.

Если для поглощения аэрозоля использовали стеклянный фильтр с пористой пластинкой, то пористую пластинку фильтра дважды смывают ацетоном порциями по 20 мл, тщательно обмывая поверхность фильтра, сливают ацетон через слой сульфата натрия в колбу для отгонки растворителя, концентрируют и анализируют методами ГЖХ и ТСХ.

    Условия  анализа  методом ГЖХ. Используют колонку длиной 1 м с

внутренним  диаметром 3 мм. Твердый носитель хроматон N-AW (0,16 -

0,20  мм).  Жидкая  фаза  -  15% карбовакса 20 М. Температура, °C:

колонки  - 170, испарителя - 200, детектора - 200. Скорость потока

газа-носителя  (азота особой чистоты) 70 мл/мин. Скорость протяжки

диаграммной  ленты  240  мм/ч. Объем вводимой пробы 5 мкл. Рабочая

                           -12

шкала  электрометра 20 x 10    А. Линейный диапазон детектирования

0,1 - 4 нг. Абсолютное время удерживания 7 мин. 6 с.

Для дополнительной идентификации хроматографирование пробы можно проводить на колонке с неподвижной фазой 5% SE-30 при аналогичных температурных условиях. В этом случае время удерживания триморфамида составляет 3 мин. 18 с.

Количественное определение пестицида проводят по методу абсолютной калибровки.

Условия анализа методом ТСХ. Пробу, сконцентрированную до объема 0,2 - 0,3 мл, количественно наносят капиллярной пипеткой на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 - 3 раза смывают небольшими порциями ацетона, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартных растворов пестицида, содержащих 2, 5, 7 и 10 мкг препарата.

    Пластинку     с     нанесенными    растворами    помещают    в

хроматографическую    камеру,    в   которую   за   30   мин.   до

хроматографирования  налита  смесь  гексан  -  ацетон (1:1). После

поднятия   фронта  подвижного  растворителя  на  10  см  пластинку

вынимают  и  оставляют на несколько минут на воздухе для испарения

растворителя. После этого пластинку обрабатывают из пульверизатора

рабочим  раствором реактива Драгендорфа. Триморфамид проявляется в

виде  пятен  кирпично-красного  цвета  на желтом фоне. Величина R

                                                                 f

0,75 +/- 0,05.

Количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора. Прямолинейная зависимость между площадью и интенсивностью пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в интервале 1 - 10 мкг.

Обработка результатов анализа. При использовании метода ГЖХ концентрацию препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

 

                                GS V

                                  1 2

                           X = -------,

                               S V V

                                2 1 20

 

    где:

    G   -   количество   препарата   во  введенном  в  хроматограф

стандартном растворе, нг;

    S   - площадь пика препарата в исследуемом растворе пробы, кв.

     1

мм;

    S   - площадь пика стандартного раствора препарата, введенного

     2

в хроматограф, кв. мм;

    V  - объем раствора пробы, введенный в хроматограф, мкл;

     1

    V  - общий объем раствора пробы, мл;

     2

    V    -  объем  воздуха, отобранный для анализа и приведенный к

     20

стандартным условиям, л.

    При  использовании метода ТСХ концентрацию препарата в воздухе

(X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:

 

                               GV

                                 2

                          X = -----,

                              V  V

                               20 1

 

    где:

    G  -  количество  препарата,  найденное  в  хроматографируемом

объеме, мкг;

    V  - объем раствора пробы, взятый для хроматографирования, мл;

     1

    V  - общий объем раствора пробы, мл;

     2

    V    -  объем  воздуха, отобранный для анализа и приведенный к

     20

стандартным условиям, л.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.