| На главную | Контакты | Поиск на текущей странице: "Ctr+F" |


       Содержание библиотеки:

 

Утверждаю

Заместитель Главного

государственного

санитарного врача СССР

А.И.ЗАИЧЕНКО

28 января 1980 г. N 2124-80

 

ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОКОЛИЧЕСТВ ПРОПАНИДА,

ЛИНУРОНА, МОНОЛИНУРОНА И ИХ МЕТАБОЛИТОВ В ВОДЕ, ПОЧВЕ

И РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ <*>

 

--------------------------------

<*> Л.Л. Кныр, В.П. Сухопарова, М.С. Соколов (Институт агрохимии и почвоведения АН СССР, г. Пущино).

 

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Е.И. Марциновского и лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

 

1. Характеристика анализируемых пестицидов

 

    Линурон   и   3,4-дихлоранилин   (3,4-ДХА)   представляют  собой  белые

кристаллические   вещества,  плохо  растворимые  в  воде  (75  и  659  мг/л

соответственно) и хорошо - в большинстве органических растворителей (низких

спиртах, ацетоне, ароматических углеводородах). Активное вещество гербицида

линурона  -  N-(3,4-дихлорфенил)-N'-метокси-N'-метилмочевина.   Температура

плавления  линурона  -  93  -  94°,  3,4-ДХА  -  71  -  72°  (1,2). Линурон

применяется как гербицид избирательного действия для уничтожения однолетних

злаковых  и двудольных сорняков на посевах кукурузы, сои, картофеля, льна и

моркови.  Линурон  малотоксичен  для  теплокровных (IV пр. г.к.).  ЛД   для

                                                                     50

белых  мышей  и  крыс  -  2,17  - 2,40 г/кг. ДОК в картофеле - 0,1 мг/кг; в

моркови наличие остатков гербицидов не допускается.

    Монолинурон   представляет   собой  белое  кристаллическое  вещество  с

температурой  плавления  79 - 80°. Растворимость в воде - 580 мг/л при 20°,

хорошо  растворяется  в  этаноле,  ацетоне,  бензоле  и других органических

растворителях,    кроме   предельных   углеводородов.   Активное   вещество

монолинурона  N-(4-хлорфенил)-N-метокси-N'-метилмочевина  (1,3).  Химически

чистый  4-хлоранилин (4-ХА) - белое кристаллическое вещество с температурой

плавления  70  -  71°.  Монолинурон применяется для уничтожения сорняков на

посадках   картофеля   и   льна-долгунца.   Соединение   малотоксично   для

теплокровных:  ЛД    для  мышей  и  крыс  -  2,0  - 2,5 г/кг. ДОК в клубнях

                 50

картофеля - 0,11 мг/кг.

    Пропанид - белое кристаллическое вещество, лишенное запаха,  с Т пл. 92

-  93  °С  (технический продукт плавится при 88 - 91 °С), мол. масса 218,08

(3).  Растворимость  в  воде  - 225 мг/л (при 22 °С), в бензоле - 70 г/л; в

ацетоне  -  1700  г/л. Хорошо растворим в хлороформе, изофороне (60% при 25

°С),  этаноле  (54%  при  25 °С), бензине, петролейном и диэтиловом эфирах,

хорошо  растворяется  в метаноле. Упругость паров - 0,008 мм рт. ст. при 40

°С,  по  другим  данным  -  0,001  мм  рт. ст. при 50 °С. Активное вещество

пропанида   -  3,4-дихлоранилид  пропионовой  кислоты.  Электронный  спектр

поглощения  спиртового раствора пропанида характеризуется тремя максимумами

(лямбда    ) в ультрафиолетовой области - 247 - 250; 252,5 и 287,5; водного

       макс

раствора - 248 нм.

    Пропанид  среднетоксичен  для  теплокровных животных. ЛД   для крыс при

                                                            50

пероральном  введении  - 1384 +/- 100 мг/кг; по другим данным - 1300 - 2270

мг/кг,  токсичная  концентрация  для  рыб  -  10  мг/л. По некоторым данным

пропанид  обладает  кумулятивным  действием - коэффициент кумуляции 1,2 при

введении 1/50 ЛД  .

                50

Пропанид - высокоэффективный гербицид для избирательного уничтожения злаковых просовидных сорняков на посевах риса. ДОК в рисе - 0,3 мг/кг.

Структурные формулы:

 

                                  Cl     N O   CH

                                   \___  | || /  3

Линурон C H  N O Cl             Cl-// \\-N-C-N           мол. масса 249,1.

         9 10 2 2  2               \___/      \

                                    ---        OCH

                                                  3

 

                                         N O   CH

                                    ___  | || /  3

Монолинурон C H  N O Cl         Cl-// \\-N-C-N           мол. масса 241,8.

             9 11 2 2              \___/      \

                                    ---        OCH

                                                  3

 

                                  Cl___

Пропанид C H ONCl               Cl-// \\NHCOC H          мол. масса 218,03.

          9 9    2                 \___/     2 5

                                    ---

 

                                  Cl___

3,4-дихлоранилин C H NCl        Cl-// \\NH               мол. масса 162,0.

                  6 5   2          \___/  2

                                    ---

 

                                    ___

4-хлоранилин C H NCl            Cl-// \\NH               мол. масса 127,5.

              6 6                  \___/  2

                                    ---

 

2. Принцип метода

 

    Определение  пропанида,  линурона, монолинурона, 3,4-ДХА и 4-ХА в одной

пробе методом хроматографии в тонком слое основано на извлечении соединений

смесью органических растворителей, их упаривании, переэкстракции гербицидов

в  н-гексан  из  строго  контролируемой  кислой  среды и их упаривании (4).

                                                   о

Упаренный  экстракт очищают на колонке с цеолитом 4А (щелочная форма) (5) и

хроматографируют на пластинках Силуфол.

В качестве подвижных фаз используют бензолцетон (60:1,5) или н-гексан:диэтиловый эфир (1:2), в качестве азосоставляющей используют 1-нафтилэтилендиамин (6,7). Полуколичественное определение производят путем визуального сравнения интенсивности окраски и размера пятен пробы и стандартных растворов.

Чувствительность метода: для воды - 0,5 - 1,0 мкг/л, для почвы - 5 - 10 мкг/кг, для растительного материала - 0,2 - 0,3 мг/кг. Ошибка определения +/- 5 - 10%.

 

3. Преимущество метода

 

    В    основу    предлагаемого    метода    положены    разработанные   и

усовершенствованные  элементы  анализа, пригодные как для метода ТСХ, так и

для  количественного  фотометрического  определения.  Способ  заключается в

очистке   гексанового  экстракта,  содержащего  исследуемые  соединения  на

                       о

колонке  с  цеолитом    (щелочная  форма),  что  позволяет  количественно

разделять гербициды и почвенные и растительные пигменты.

Преимущество рассматриваемого метода, в отличие от известных, заключается в его экспрессности, хорошей воспроизводимости, достаточно высокой чувствительности, возможности раздельного определения в одной пробе гербицида и его основного метаболита.

 

4. Реактивы и растворы

 

1. Едкий натр, чда, 10 н водный раствор (400 г NaOH растворяют, раствор доливают водой до 1 л, перемешивают).

    2. Серная кислота, хч, 50-процентный водный раствор (275 мл конц. H SO

                                                                       2  4

уд.  веса 1,84 осторожно вливают в 500 мл дистиллированной воды, охлаждают,

перемешивают).

3. Натрий сернокислый безводный, чда.

4. Бензол, хч.

5. Ацетон, хч.

6. н-Гексан, хч.

7. Диэтиловый эфир, хч.

8. Хлороформ, чда.

9. Изопропиловый спирт, чда.

10. Проявляющие реактивы:

N 1 - к 20 мл конц. HCl (d = 1,10) прибавляют 80 мл этилового спирта;

N 2 - 1 г азотистокислого натрия растворяют в 2 мл воды и доводят до 100 мл этиловым спиртом;

N 3 - 1 г дигидрохлорида 1-нафтилэтилендиамина растворяют при нагревании на водяной бане в 2 мл воды и доводят до 100 мл этиловым спиртом.

11. Стандартные растворы: 20 мг пропанида, линурона, монолинурона, 3,4-дихлоранилина и 4-хлоранилина растворяют в 100 мл этилового спирта; концентрация этого раствора 200 мкг/мл.

 

5. Аппаратура и оборудование

 

Роторный испаритель или выпаритель-концентратор.

Аппарат для встряхивания.

Камера для хроматографирования - стеклянный цилиндрический или прямоугольный сосуд с притертой крышкой.

Пульверизаторы стеклянные.

Шприцы медицинские туберкулиновые емкостью 1 мл.

Сито металлическое почвенное с диаметром отверстий 0,1 - 1,0 мм.

 

6. Приготовление сорбционной колонки

 

    Стеклянную  хроматографическую колонку  диаметром  15 мм, длиной 150 мм

заполняют  стекловатой,  имеющей  волокна  1 - 2 см (толщина слоя 0,3 - 0,5

мм).  Далее  колонку  на  4  -  5  см заполняют предварительно измельченным

                                 о

(фракция 0,1 - 0,5 мм) цеолитом 4А (щелочная форма).

 

7. Подготовка проб к определению

 

Экстракция гербицидов

а) Из воды: анализируемый образец воды (до 1 л) после отстаивания сливают в стакан, подщелачивают 20-процентным NaOH до рН 10, переносят в делительную воронку и экстрагируют хлороформом (3 х 50 мл). Объединенный экстракт высушивают, пропуская через безводный сернокислый натрий, и растворитель упаривают досуха.

б) Из сухой или влажной почвы и почвенной суспензии: 100 - 500 г почвы или суспензии, освобожденной от растительных остатков, заливают 100 - 300 мл ацетона, 3 - 5 мл 20-процентного NaOH, тщательно перемешивают палочкой, после чего встряхивают в течение часа. Затем водно-ацетоновый экстракт фильтруют через воронку Бюхнера, колбу ополаскивают ацетоном, почву на фильтре промывают ацетоном (3 x 15 - 20 мл). Ацетон отгоняют на роторном испарителе, водную часть экстракта подщелачивают 20-процентным NaOH до рН 10, переносят в делительную воронку и токсиканты экстрагируют хлороформом (3 х 20 - 30 мл). Объединенный экстракт высушивают, пропуская через безводный сернокислый натрий, и растворитель упаривают досуха.

в) Из растительного материала (водоросли, корнеплоды моркови): 50 г измельченного материала (морковь, водоросли) заливают 150 мл смеси н-гексанцетон (9:1), встряхивают в течение 1 ч и фильтруют. Остаток на фильтре трижды промывают смесью растворителей (3 х 15 - 20 мл). Из объединенного экстракта отгоняют органические растворители, жидкую фазу, оставшуюся после отгонки растворителей, количественно переносят в делительную воронку. Колбу несколько раз обмывают дистиллированной водой, сливая ее затем в воронку, и доводят общий объем пробы до 100 мл. Приливают 18 мл 50-процентной серной кислоты, экстрагируют гербициды хлороформом (3 х 10 мл), отгоняют органический растворитель и следы хлороформа удаляют током воздуха.

 

8. Экстракция 3,4-ДХА и 4-ХА

 

После экстракции гербицидов сернокислый раствор (100 мл) нейтрализуют, подщелачивают до рН 10 (~ 30 мл 10 н NaOH) и экстрагируют 3,4-ДХА (4-ХА) хлороформом (3 х 20 мл), отгоняют органический растворитель и следы хлороформа удаляют током воздуха.

 

9. Очистка экстрактов, содержащих гербициды <*>

 

--------------------------------

<*> Очистку на колонке с сорбентом проводят только для проб, содержащих пропанид, линурон и монолинурон, а пробы с 3,4-ДХА (4-ХА), полученные при раздельной экстракции, в очистке не нуждаются.

 

Сухие остатки в колбах, содержащих гербициды, растворяют в 10 мл н-гексана и для отделения пигментов раствор пропускают через колонку с цеолитом со скоростью 2 - 4 мл/мин. После подсушивания сорбента вакуумом соединения вымывают 50 мл смеси растворителей н-гексаниэтиловый эфир (3:1), затем элюат упаривают досуха и далее соединение анализируют.

 

9. Хроматографирование

 

    Сухие   остатки,  содержащие  анализируемые  соединения,  количественно

переносят  диэтиловым  эфиром  на  пластинки  Силуфол, пластинки помещают в

камеру  для  хроматографирования;  подвижный  растворитель  - бензолцетон

(60:1,5).  Край  пластинки  погружают  в  растворитель на глубину 5 - 7 мм.

Когда   фронт   растворителя   поднимается   на  высоту  10  см,  пластинку

ополаскивают,  вновь  заполняют смесью растворителей и производят повторное

хроматографирование.   Затем  пластинки  термостатируют  при  160  °С:  для

определения  пропанида  в  течение  40  мин.,  для  определения  линурона и

монолинурона  -  5  мин.  После  этого  пластинки  охлаждают  и опрыскивают

последовательно  проявляющими  реактивами  N  1,  2, 3. При наличии в пробе

ароматических   аминов,   пропанида,  линурона  и  монолинурона  появляются

фиолетовые  пятна  на  белом  фоне.  R   для  3,4-ДХА  - 0,64 +/- 0,02; для

                                      f

линурона - 0,42 +/- 0,02; для монолинурона - 0,26 +/- 0,02; для 4-ХА - 0,36

+/- 0,02; для пропанида - 0,25 +/- 0,02.

 

10. Обработка результатов анализа

 

Содержание токсикантов рассчитывают по формуле:

 

                                      A

                                  X = -,

                                      B

 

где:

X - содержание препарата в пробе (мг/кг или мг/л);

A - количество препарата, найденное путем визуального сравнения размера и интенсивности окраски пятен пробы и стандартных растворов, мкг;

B - навеска пробы (г) или объем аликвоты (мл).

Вместо термостатирования можно облучать пластинки хроматоскопом типа БУФ-3 (расстояние от лампы 15 см, экспозиция 10 мин.).

 

 







Яндекс цитирования



Интернет архив законодательства СССР. Более 20000 нормативно-правовых актов.
СССР, Союз Советских Социалистических республик, Советская власть, законодательство СССР, Ленин, Сталин, Маленков, Хрущев, Брежнев, Андропов, Черненко, Горбачев, история СССР.

© LibUSSR.RU, 2011 - 2017